LIETUVOS RESPUBLIKOS ŽEMĖS ŪKIO MINISTRO

Į S A K Y M A S

DĖL TECHNINIO REGLAMENTO, NUSTATANČIO VYNO ANALIZĖS METODUS, PATVIRTINIMO

2001 m. kovo 29 d. Nr. 83

Vilnius

Įgyvendindamas Lietuvos Respublikos Vyriausybės 2001 m. vasario 22 d. nutarimu Nr. 192 „Dėl Lietuvos pasirengimo narystei Europos Sąjungoje programos (Nacionalinė acquis priėmimo programa) teisės derinimo priemonių ir acquis įgyvendinimo priemonių 2001 metų planų patvirtinimo“ (Žin., 2001, Nr. 18-554) patvirtintą Lietuvos pasirengimo narystei Europos Sąjungoje programos (Nacionalinė acquis priėmimo programa) teisės derinimo priemonių 2001 metų planą,

1. Tvirtinu Techninį reglamentą, nustatantį vyno analizės metodus (pridedama).

2. Nustatau, kad:

2.1. Techninis reglamentas, nustatantis vyno analizės metodus, įsigalioja nuo 2001 m. birželio 1 d;

2.2. 1 punktu patvirtinto Techninio reglamento priedo 1.6, 3.3, 5.4.2, 12.3, 16.3, 18.3, 23.3, 25.3.3, 26.3, 27.3, 30.3, 37.4, 40.3.2 punktai galioja iki 2001 m. rugpjūčio 1 d.

ŽEMĖS ŪKIO MINISTRAS                                                                  KĘSTUTIS KRISTINAITIS

______________

PATVIRTINTA

Lietuvos Respublikos žemės ūkio ministro

2001 03 29 įsakymu Nr. 83

TECHNINIS REGLAMENTAS, NUSTATANTIS VYNO ANALIZĖS METODUS

Techninis reglamentas yra parengtas pagal 1990 m. rugsėjo 17 d. Europos Komisijos Reglamentą Nr. 2676/90, nustatantį Bendrijos analizės metodus vynui, kurie yra taikomi ES valstybėse analizuojant vyną ir jo produktus ir 2000 m. liepos 24 d. Europos Komisijos Reglamentą (EB) 1622/2000, nustatantį detalias Reglamento 1493/1999 dėl vyno rinkos bendro organizavimo įgyvendinimo taisykles ir Bendrijos vyndarystės procesų ir technologijų kodekso įsteigimą.

I. TAIKYMO SRITIS

1. Šio reglamento priede yra aprašyti Lietuvos Respublikoje taikytini vyno analizės metodai, kurie taikomi:

1.1. nustatant vyno ir vyno produktų sudėtį;

1.2. tikrinant, ar šie produktai buvo apdoroti nepažeidžiant leistinų vyndarystės technologijų.

2. Kai gali būti taikomi ir pamatiniai, ir įprastiniai medžiagų nustatymo metodai, pirmenybė teikiama rezultatams, gautiems pagal pamatinius metodus.

II. BENDROSIOS SĄVOKOS

Pakartojamumas – matavimo rezultatų, gautų tomis pačiomis sąlygomis, artumas; absoliutus skirtumas tarp dviejų vienkartinio nustatymo rezultatų, gautų atlikus bandymus tomis pačiomis sąlygomis (tas pats vykdytojas, ta pati aparatūra, ta pati laboratorija ir trumpas laiko tarpas tarp bandymų) neviršija vertės, kuri yra nustatyta tikimybės ribose.

Atkuriamumas – matavimo rezultatų, gautų skirtingomis sąlygomis, artumas; absoliutus skirtumas tarp dviejų vienkartinio nustatymo rezultatų, gautų atlikus bandymus skirtingomis sąlygomis (kitas vykdytojas, kita aparatūra, kita laboratorija ir ilgesnis laiko tarpas tarp bandymų) neviršija vertės, yra nustatytos tikimybės ribose.

Vienkartinio nustatymo rezultatas – vertė, gauta tuo pačiu metu atliekant numatytas operacijas su vienu mėginiu pagal standartizuotą analizės metodą. Jei nėra numatyta kitaip, turi būti taikoma 95 proc. tikimybė.

III. AUTOMATIZUOTŲ ANALIZĖS METODŲ TAIKYMAS

3. Automatizuoti analizės metodai yra priimtini, kai už juos atsako laboratorijos vadovas, be to, su sąlyga, kad rezultatų tikslumas, pakartojamumas ir palyginamumas yra bent jau ekvivalentiški rezultatams, gautiems taikant priede išvardintus analizės metodus. Kilus ginčui, automatizuoti analizės metodai negali pakeisti priede išvardytų metodų.

4. Automatizuotas tankio matavimo metodas, kuris remiasi osciliatoriaus dažniu, turi būti laikomas tolygiu šio reglamento priedo 1 skyriuje išvardytiems metodams.

IV. BENDRIEJI REIKALAVIMAI VANDENIUI IR CHEMIKALAMS

5. Tirpinti, skiesti ar plauti naudojamas vanduo turi būti distiliuotas arba to paties grynumo demineralizuotas. Visi chemikalai turi būti analizinio grynumo, išskyrus atvejus, kai metodo aprašyme nurodyta kitaip.

SUDERINTA                                                             SUDERINTA

Valstybinės maisto ir veterinarijos tarnybos                Respublikinio mitybos centro

direktorius                                                                   l. e. p. direktorius

K. Lukauskas                                                              A. Kranauskas

2001 03 21                                                                  2001 03 22

______________

PRIEDAS

1. Tankio ir santykinio tankio 20 ºC temperatūroje nustatymo metodai

1.1. Apibrėžimas

Tankis yra dydis, gaunamas padalijus tam tikro tūrio vyno masę 20 ºC temperatūroje iš to tūrio dydžio. Jis išreiškiamas g/cm³ ir žymimas simboliu ρ_20ºC. Santykinis tankis 20 ºC temperatūroje, arba tankis 20 ºC/20 ºC, – tai vyno tankio 20 ºC temperatūroje ir vandens tankio toje pačioje temperatūroje santykis, išreikštas 0,1 tikslumu. Jis žymimas ;

1.2. Metodų esmė

Tankis ir santykinis tankis 20 ºC temperatūroje nustatomi piknometru (pamatinis metodas); areometru (arba densimetru) arba hidrostatinėmis svarstyklėmis (įprastinis metodas).

PASTABA. Kai nustatyti reikia ypač tiksliai, gautasis rezultatas pataisomas įvertinant esamą sieros dioksido kiekį pagal formulę: ρ₂₀ = ρ’₂₀ - 0,0006´S; čia ρ₂₀ – tankis su pataisa; ρ’₂₀ - išmatuotas ir tankis; S – bendrasis sieros dioksido kiekis, g/dm³;

1.3. Mėginių paruošimas

Jeigu vyne arba misoje yra didelis kiekis anglies dioksido, jis pašalinamas purtant 250 cm³ vyno 1000 cm³ talpos kolboje arba nufiltruojamas vakuume per 2 g vatos, įdėtos į ilginamąjį vamzdį;

1.4. Pamatinis metodas:

1.4.1. Įranga ir priemonės:

1.4.1.1. 100 cm³ talpos karščiui atsparaus stiklo piknometras su išimamu šlifo termometru, kurio matavimo ribos nuo 10 iki 30 ºC, o padalos vertė 0,1 ºC. Šis termometras turi būti patikrintas. Galima naudotis ir bet kokiu kitu identiškų parametrų piknometru. 1.1 pav. pavaizduotas piknometras turi 25 mm ilgio šoninį vamzdelį, kurio vidinis skersmuo ne didesnis kaip 1 mm. Vamzdelis baigiasi šlifuota kūgio dalimi. Vamzdelio gale gali būti šlifo kamštis su kūginiu smailėjančiu šlifo vamzdeliu ir atliekantis plėtimosi kameros funkciją. Šie du šlifai turi būti pagaminti labai kruopščiai;

1.4.1.2. Etaloninis indas, kurio išorinis tūris yra toks pat kaip piknometro, (skirtumas neturi viršyti 1 cm³), ir masė yra tokia pat kaip piknometro, pripildytas 1,01 santykinio tankio skysčio (2 g/100 cm³ koncentracijos natrio chlorido tirpalo);

1.4.1.3. Termiškai izoliuotas indas, tiksliai atitinkantis piknometro matmenis;

1.4.1.4. Svarstyklės, kurių padalos vertė 0,1 mg;

1.4.2. Piknometro kalibravimas - tai tuščio piknometro masės ir tūrio, taip pat piknometro su vandeniu masės nustatymas 20 ºC temperatūroje:

1.4.2.1. Kalibravimas dviejų lėkščių svarstyklėmis

Etaloninis indas pastatomas ant kairiosios svarstyklių lėkštės, o švarus ir sausas piknometras su kamščiu ant dešiniosios. Sulyginami lėkščių svoriai ant dešiniosios svarstyklių lėkštės padėjus masės P svarsčius. Į piknometrą atsargiai įpilama kambario temperatūros distiliuoto vandens, įstatomas termometras, nušluostoma ir įdedama į termostatą; purtoma tol, kol termometras rodo pastovią temperatūrą. Sulyginamas lygis pagal viršutinį šoninio vamzdelio kraštą, šoninis vamzdelis nušluostomas, uždedamas šlifo kamštis ir užrašoma temperatūra. Pasveriamas pripildytas vandens piknometras, ir užrašoma masė p’, g, kuri reikalinga pusiausvyrai pasiekti.

Apskaičiavimas. Tuščio piknometro masė yra p+m; čia m – oro masė piknometre, m=0,0012´(p-p’). Tūris 20 ºC temperatūroje V_20ºC =(p+m-p’)´F_t; čia F_t – koeficientas (randamas 1.1 lentelėje temperatūroje t). V_20ºC išreiškiamas 0,001 cm³ tikslumu. Piknometro su vandeniu masė 20 ºC temperatūroje M_20ºC =V_20ºC´·0,998203; čia 0,998203 - vandens tankis 20 ºC temperatūroje;

1.4.2.2. Kalibravimas vienos lėkštės svarstyklėmis

Nustatoma švaraus ir sauso piknometro masė P, vandens pripildyto piknometro masė temperatūroje t ºC, P₁ (pagal 1.4.2.1) ir etaloninio indo masė T₀.

Apskaičiavimas. Tuščio piknometro masė yra P–m; čia m – oro masė piknometre; m=0,0012´(P₁-P). Tūris 20 ºC temperatūroje V_20ºC = [P₁–(P – m)]´F_t; čia F_t – koeficientas (randamas 1.1 lentelėje temperatūroje t). V_20ºC išreiškiamas ±0,001 cm³ tikslumu. Masė su vandeniu 20 ºC temperatūroje M_20ºC =V_20ºC´0,998203“ čia 0,998203 – vandens tankis 20 ºC temperatūroje;

1.1 pav. Piknometras ir tokio pat tūrio etaloninis indas

1.5. Analizė:

1.5.1. Analizė naudojantis dviejų lėkščių svarstyklėmis

Pasveriamas piknometras su vyno mėginiu, kaip aprašyta 1.4.2.1 p. Jeigu p“ - masė, g, kurios reikia pusiausvyrai pasiekti temperatūroje t, piknometre esančio skysčio masė bus p+m–p“. Tankis temperatūroje t:

Ρ_tºC =[p+m–p“]/V_{20 ºC}.

Apskaičiuojamas tankis 20 ºC temperatūroje pagal vieną iš korekcinių lentelių: 1.2 – sausam vynui, 1.3 – natūraliai arba koncentruotai misai, 1.4 – saldžiam vynui. Apskaičiuojamas vyno tankis (20 ºC/20 ºC) padalijus tūrio masę 20 ºC temperatūroje iš 0,998203;

1.5.2. Analizė vienos lėkštės svarstyklėmis

Pasveriamas etaloninis indas, kurio masė T₁. Apskaičiuojama dT=T₁–T₀. Tuščio piknometro masė matavimo metu bus P–m+dT. Pasveriamas piknometras, pripildytas vyno (misos) mėginio, kaip aprašyta 1.4.2.1 p. Pažymima jo masė P₂ temperatūroje t. Piknometre esančio skysčio masė P₂–(P–m+dT). Tankis temperatūroje t:

P₂ – (P–m+dT)

ρ_tºC =                                      

V_{20 ºC}

Apskaičiuojamas tiriamojo skysčio tankis 20 ºC temperatūroje: sausam vynui, natūraliai arba koncentruotai misai ir saldžiam vynui, kaip nurodyta 1.5.1 p. Apskaičiuojamas tankis (20 ºC/20 ºC) dalijant tūrio masę 20 ºC temperatūroje iš 0,998203;

1.5.3. Pakartojamumas

Sauso ir pusiau saldaus vyno tankio nustatymo rezultatų pakartojamumas r=0,00010, saldaus vyno r=0,00018;

1.5.4. Atkuriamumas

Sauso ir pusiau saldaus vyno tankio nustatymo rezultatų atkuriamumas R=0,00037, saldaus vyno R=0,00045;

1.6. Įprastiniai analizės metodai:

1.6.1. Areometrinis metodas:

1.6.1.1. Įranga ir priemonės:

1.6.1.1.1. Areometro matmenys ir sugradavimas turi atitikti ISO standartus. Areometras turi turėti cilindro korpusą, kuris įleidžiamas į skystį, ir ne mažesnį negu 3 mm skersmens kaklelį. Sausojo vyno skalė nuo 0,983 iki 1,003, padalos vertė 0,001 ir 0,002, atstumas tarp padalų ne mažesnis kaip 5 mm. Vynų, iš kurių pašalintas alkoholis, saldžių vynų ir misos tankio matavimams gali būti naudojami 5 areometrai, kurių skalės tokios: 1,000-1,030; 1,030-1,060; 1,060-1,090; 1,090-1,120; 1,120-1,150. Šių areometrų skalės graduojamos tankiui 20 ºC temperatūroje matuoti, padalos vertė 0,001 arba 0,0005 ir atstumas tarp kiekvienos tūkstantosios dalies ne mažesnis kaip 3 mm. Be to, skalė turi būti sugraduota taip, kad rodmenis galima būtų perskaityti pagal skysčio viršutinį meniską. Tankio ar santykinio tankio 20 °C temperatūroje matavimo rodmenų, taip pat rodmenų, skaitomų pagal viršutinį menisko kraštą, žymos daromos ant graduotos skalės arba ant popieriaus juostelės, kuri dedama į įmerkiamą prietaiso korpusą. Areometrai turi būti patikrinti oficialiųjų valstybės tarnybų;

1.6.1.1.2. Patikrintas termometras, kurio padalos vertė 0,5 ºC;

1.6.1.1.3. 36 mm vidinio skersmens ir 320 mm aukščio cilindras su jo stabilią vertikaliąją padėtį palaikančiu dugnu;

1.6.1.2. Analizė

Į cilindrą (1.6.1.1.3) įpilama 250 cm³ paruošto tirti mėginio, įdedamas areometras ir termometras. Po 1 min užrašoma temperatūra, išimamas termometras ir dar po 1 min išmatuojamas tankis t ºC temperatūroje pagal areometro rodmenis. Tankis, išmatuotas temperatūroje t, °C, patikslinamas pagal lenteles: sausam vynui 1.5, misai 1.6, cukraus turinčiam vynui 1.7. Apskaičiuojamas santykinis tankis (20 ºC/20 ºC) dalijant tankį 20 ºC temperatūroje iš 0,998203;

1.6.2. Densimetrinis hidrostatinių svarstyklių metodas:

1.6.2.1. Įranga ir priemonės:

1.6.2.1.1. Hidrostatinės svarstyklės, kurių didžiausia svėrimo riba yra 100 g, o padalos vertė ne didesnė kaip 0,1 mg. Po kiekviena lėkšte tvirtinama ne mažesnė kaip 20 cm³ apimties plūdė iš karščiui atsparaus stiklo. Abi vienodos plūdės pakabinamos ant ne storesnio kaip 0,1 mm skersmens siūlo. Plūdė, pakabinta po dešiniąja svarstyklių lėkšte, turi būti nuleidžiama į cilindrą su žyma. Vidinis šio cilindro skersmuo turi būti 6 mm didesnis už plūdės skersmenį. Cilindras turi būti visiškai panardinamas į matuojamą skystį kitame cilindre ir būti žemiau žymos; matuojamo skysčio paviršius turi kirstis tik su siūlu, skirtu pakabinti. Skysčio temperatūra cilindre matuojama termometru, kurio padalos vertė ne didesnė kaip 0,2 ºC. Galima naudoti ir vienos lėkštės hidrostatines svarstykles;

1.6.2.2. Analizė:

1.6.2.2.1. Etaloninis hidrostatinių svarstyklių paruošimas

Sulyginamos dvi ore esančias plūdės - ant dešiniosios svarstyklių lėkštės padedamas masės P svarstis. Į cilindrą įpilama distiliuoto vandens iki žymos, maišoma ir laikoma 2-3 min. Užrašoma temperatūra t. Nustatoma pusiausvyra svarsčiais, kurie dedami ant dešiniosios svarstyklių lėkštės. Svarsčių masė žymima p’. Plūdės tūris 20 ºC temperatūroje bus V_20ºC =(p’–p)´(F+0,0012); čia F – koeficientas, randamas 1.1 lentelėje; p ir V_{20ºC –} plūdės parametrai;

1.6.2.2.2. Nustatymas

Didžioji plūdė panardinama į vyno (arba misos) pripildytą cilindrą iki žymos. Užrašoma vyno (arba misos) temperatūra, sulyginamos svarstyklės svarsčiais ir pažymima jų masė p“. Apskaičiuojama tūrio masė:

                   (p“–p)+0,0012

ρ_tºC =                                            

                         V_{20 ºC}

Gautas tankis perskaičiuojamas 20 ºC temperatūrai. Naudojamasi 1.2, 1.3, ir 1.4 lentelėmis, jeigu plūdė pagaminta iš karščiui atsparaus stiklo, ir 1.5, 1.6, ir 1.7 lentelėmis jeigu plūdė pagaminta iš paprasto stiklo.

1.1 lentelė. Koeficiento F vertės, iš kurių reikia padauginti iš karščiui atsparaus pirekso stiklo pagamintame piknometre esančio vandens masę temperatūroje t, °C, nustatant piknometro tūrį 20 °C temperatūroje

t, ^0C	F	t, ^0C	F	t, ^0C	F	t, ^0C	F	t, ^0C	F	t, ^0C	F	t, ^0C	F
10,0 ,1 ,2 ,3 ,4 10,5 ,6 ,7 ,8 ,9 11,0 ,1 ,2 ,3 ,4 11,5 ,6 ,7 ,8 ,9 12,0 ,1 ,2 ,3 ,4 12,5 ,6 ,7 ,8 ,9	1,000398 1,000406 1,000414 1,000422 1,000430 1,000439 1,000447 1,000456 1,000465 1,000474 1,000483 1,000492 1,000501 1,000511 1,000520 1,000530 1,000540 1,000550 1,000560 1,000570 1,000580 1,000591 1,000601 1,000612 1,000623 1,000634 1,000645 1,000656 1,000668 1,000679	13,0 ,1 ,2 ,3 ,4 13,5 ,6 ,7 ,8 ,9 14,0 ,1 ,2 ,3 ,4 14,5 ,6 ,7 ,8 ,9 15,0 ,1 ,2 ,3 ,4 15,5 ,6 ,7 ,8 ,9	1,000691 1,000703 1,000714 1,000726 1,000738 1,000752 1,000764 1,000777 1,000789 1,000803 1,000816 1,000829 1,000842 1,000855 1,000868 1,000882 1,000895 1,000909 1,000923 1,000937 1,000951 1,000965 1,000979 1,000993 1,001008 1,001022 1,001037 1,001052 1,001067 1,001082	16,0 ,1 ,2 ,3 ,4 16,5 ,6 ,7 ,8 ,9 17,0 ,1 ,2 ,3 ,4 17,5 ,6 ,7 ,8 ,9 18,0 ,1 ,2 ,3 ,4 18,5 ,6 ,7 ,8 ,9	1,001097 1,001113 1,001128 1,001144 1,001159 1,001175 1,001191 1,001207 1,001223 1,001239 1,001257 1,001273 1,001290 1,001306 1,001323 1,001340 1,001357 1,001374 1,001391 1,001409 1,001427 1,001445 1,001462 1,001480 1,001498 1,001516 1,001534 1,001552 1,001570 1,001589	19,0 ,1 ,2 ,3 ,4 19,5 ,6 ,7 ,8 ,9 20,0 ,1 ,2 ,3 ,4 20,5 ,6 ,7 ,8 ,9 21,0 ,1 ,2 ,3 ,4 21,5 ,6 ,7 ,8 ,9	1,001608 1,001627 1,001646 1,001665 1,001684 1,001703 1,001722 1,001741 1,001761 1,001780 1,001800 1,001819 1,001839 1,001859 1,001880 1,001900 1,001920 1,001941 1,001961 1,001982 1,002002 1,002023 1,002044 1,002065 1,002086 1,002107 1,002129 1,002151 1,002172 1,002194	22,0 ,1 ,2 ,3 ,4 22,5 ,6 ,7 ,8 ,9 23,0 ,1 ,2 ,3 ,4 23,5 ,6 ,7 ,8 ,9 24,0 ,1 ,2 ,3 ,4 24,5 ,6 ,7 ,8 ,9	1,002215 1,002238 1,002260 1,002282 1,002304 1,002326 1,002349 1,002372 1,002394 1,002417 1,002439 1,002462 1,002485 1,002508 1,002531 1,002555 1,002578 1,002602 1,002625 1,002649 1,002672 1,002696 1,002720 1,002745 1,002769 1,002793 1,002817 1,002842 1,002866 1,002891	25,0 ,1 ,2 ,3 ,4 25,5 ,6 ,7 ,8 ,9 26,0 ,1 ,2 ,3 ,4 26,5 ,6 ,7 ,8 ,9 27,0 ,1 ,2 ,3 ,4 27,5 ,6 ,7 ,8 ,9	1,002916 1,002941 1,002966 1,002990 1,003015 1,003041 1,003066 1,003092 1,003117 1,003143 1,003168 1,003194 1,003222 1,003247 1,003273 1,003299 1,003326 1,003352 1,003379 1,003405 1,003432 1,003458 1,003485 1,003513 1,003540 1,003567 1,003594 1,003621 1,003649 1,003676	28,0 ,1 ,2 ,3 ,4 28,5 ,6 ,7 ,8 ,9 29,0 ,1 ,2 ,3 ,4 29,5 ,6 ,7 ,8 ,9 30,0	1,003704 1,003731 1,003759 1,003787 1,003815 1,003843 1,003871 1,003899 1,003928 1,003956 1,003984 1,004013 1,004042 1,004071 1,004099 1,004128 1,004158 1,004187 1,004216 1,004245 1,004275

1.2 lentelė. Temperatūros pataisos c, kurias reikia įvertinti nustatant sauso vyno ir sauso vyno, iš kurio pašalintas etilo alkoholis, tankį 20 °C temperatūroje, kai tankis matuojamas iš pirekso stiklo pagamintame piknometre t °C temperatūroje, °C

c

r_20ºC = r_t ± „-„, jei t < 20 °C; „+“ jei t > 20 °C

1000

t,^0C	Etilo alkoholio koncentracija
	0	5	6	7	8	9	10	11	12	13	14	15	16	17	18	19	20	21	22	23	24	25	26	27
10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30	1,59 1,48 1,36 1,22 1,08 0,92 0,76 0,59 0,40 0,21 0,21 0,44 0,68 0,93 1,19 1,47 1,75 2,04 2,34 2,66	1,64 1,53 1,40 1,26 1,11 0,96 0,79 0,61 0,42 0,21 0,22 0,45 0,70 0,96 1,23 1,51 1,80 2,10 2,41 2,73	1,67 1,56 1,43 1,28 1,13 0,97 0,80 0,62 0,42 0,22 0,22 0,46 0,71 0,97 1,25 1,53 1,82 2,13 2,44 2,77	1,71 1,60 1,46 1,32 1,16 0,99 0,81 0,63 0,43 0,22 0,23 0,47 0,72 0,99 1,27 1,56 1,85 2,16 2,48 2,81	1,77 1,64 1,50 1,35 1,19 1,02 0,84 0,65 0,44 0,23 0,23 0,48 0,74 1,01 1,29 1,59 1,89 2,20 2,53 2,86	1,84 1,70 1,56 1,40 1,23 1,05 0,86 0,67 0,46 0,23 0,24 0,49 0,76 1,03 1,32 1,62 1,93 2,25 2,58 2,92	1,91 1,77 1,62 1,45 1,27 1,09 0,89 0,69 0,47 0,24 0,25 0,51 0,78 1,06 1,36 1,67 1,98 2,31 2,65 3,00	2,01 1,86 1,69 1,52 1,33 1,13 0,93 0,72 0,49 0,25 0,26 0,52 0,80 1,10 1,40 1,72 2,04 2,38 2,72 3,08	2,11 1,95 1,78 1,59 1,39 1,19 0,97 0,75 0,51 0,26 0,27 0,54 0,83 1,13 1,45 1,77 2,11 2,45 2,81 3,17	2,22 2,05 1,86 1,67 1,46 1,24 1,01 0,78 0,53 0,27 0,28 0,56 0,86 1,18 1,50 1,83 2,18 2,53 2,89 3,27	2,34 2,16 1,96 1,75 1,52 1,30 1,06 0,81 0,55 0,28 0,29 0,59 0,90 1,22 1,55 1,90 2,25 2,62 2,99 3,37	2,46 2,27 2,05 1,83 1,60 1,36 1,10 0,85 0,57 0,29 0,30 0,61 0,93 1,26 1,61 1,96 2,33 2,70 3,09 3,48	2,60 2,38 2,16 1,92 1,67 1,42 1,16 0,88 0,60 0,30 0,31 0,63 0,96 1,31 1,67 2,03 2,41 2,80 3,19 3,59	2,73 2,51 2,27 2,01 1,75 1,48 1,21 0,95 0,63 0,32 0,32 0,66 1,00 1,36 1,73 2,11 2,50 2,89 3,30 3,72	2,88 2,63 2,38 2,11 1,84 1,55 1,26 0,96 0,65 0,33 0,34 0,69 1,03 1,41 1,80 2,19 2,59 3,00 3,42 3,84	3,03 2,77 2,50 2,22 1,93 1,63 1,32 1,01 0,68 0,34 0,36 0,71 1,08 1,47 1,86 2,27 2,68 3,10 3,53 3,97	3,19 2,91 2,62 2,32 2,03 1,70 1,38 4,05 0,71 0,36 0,37 0,74 1,13 1,52 1,93 2,35 2,78 3,21 3,65 4,11	3,35 3,06 2,75 2,44 2,11 1,78 1,44 1,11 0,74 0,37 0,38 0,77 1,17 1,58 2,00 2,44 2,88 3,32 3,78 4,25	3,52 3,21 2,88 2,55 2,21 1,86 1,51 1,15 0,77 0,39 0,40 0,80 1,22 1,64 2,08 2,53 2,98 3,45 3,92 4,40	3,70 3,36 3,02 2,67 2,31 1,95 1,57 1,20 0,81 0,41 0,41 0,83 1,26 1,71 2,16 2,62 3,09 3,57 4,05 4,55	3,87 3,53 3,16 2,79 2,42 2,03 1,64 1,25 0,84 0,42 0,43 0,87 1,31 1,77 2,24 2,72 3,20 3,69 4,19 4,70	4,06 3,69 3,31 2,92 2,52 2,12 1,71 1,30 0,87 0,44 0,44 0,90 1,37 1,84 2,32 2,81 3,31 3,82 4,33 4,85	4,25 3,86 3,46 3,05 2,63 2,21 1,78 1,35 0,91 0,46 0,46 0,93 1,41 1,90 2,40 2,91 3,42 3,94 4,47 4,92	4,44 4,03 3,61 3,18 2,74 2,30 1,85 1,40 0,94 0,47 0,48 0,97 1,46 1,97 2,48 3,01 3,53 4,07 4,61 5,17

Pastaba. Šia lentele galima naudotis perskaičiuojant santykinį tankį  į santykinį tankį .

1.3 lentelė. Temperatūros pataisos c, kurias reikia įvertinti nustatant natūralios ir koncentruotos misos tankį 20 °C temperatūroje, kai tankis matuojamas iš pirekso stiklo pagamintame piknometre temperatūroje t, °C

c

r_20ºC = r_t ± „-„, jei t < 20 °C; „+“ jei t > 20 °C

1000

t,^0C	Tūrio masė
	1,05	1,06	1,07	1,08	1,09	1,10	1,11	1,12	1,13	1,14	1,15	1,16	1,18	1,20	1,22	1,24	1,26	1,28	1,30	1,32	1,34	1,36
10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30	2,31 2,12 1,92 1,72 1,52 1,28 1,05 0,80 0,56 0,29 0,29 0,58 0,89 1,20 1,51 1,84 2,17 2,50 2,86 3,20	2,48 2,28 2,06 1,84 1,62 1,36 1,12 0,86 0,59 0,31 0,30 0,61 0,94 1,25 1,59 1,92 2,26 2,62 2,98 3,35	2,66 2,42 2,19 1,95 1,72 1,44 1,18 0,90 0,62 0,32 0,32 0,64 0,99 1,31 1,66 2,01 2,36 2,74 3,10 3,49	2,82 2,57 2,32 2,06 1,81 1,52 1,25 0,95 0,66 0,34 0,34 0,67 1,03 1,37 1,74 2,10 2,46 2,85 3,22 3,64	2,99 2,72 2,45 2,17 1,90 1,60 1,31 1,00 0,68 0,36 0,35 0,70 1,08 1,43 1,81 2,18 2,56 2,96 3,35 3,77	3,13 2,86 2,58 2,27 2,00 1,67 1,37 1,04 0,72 0,37 0,37 0,73 1,12 1,49 1,88 2,26 2,66 3,07 3,47 3,91	3,30 2,99 2,70 2,38 2,09 1,75 1,43 1,09 0,75 0,39 0,38 0,76 1,16 1,54 1,95 2,34 2,75 3,18 3,59 4,05	3,44 3,12 2,82 2,48 2,17 1,82 1,49 1,13 0,77 0,40 0,40 0,79 1,20 1,60 2,02 2,42 2,84 3,28 3,70 4,17	3,59 3,25 2,94 2,58 2,26 1,89 1,55 1,18 0,80 0,42 0,41 0,81 1,25 1,66 2,09 2,50 2,93 3,40 3,82 4,30	3,73 3,37 3,04 2,69 2,34 1,96 1,60 1,22 0,83 0,43 0,42 0,84 1,29 1,71 2,16 2,58 3,01 3,50 3,93 4,43	3,88 3,50 3,15 2,78 2,43 2,04 1,66 1,26 0,85 0,44 0,44 0,87 1,33 1,77 2,23 2,65 3,10 3,60 4,03 4,55	4,01 3,62 3,26 2,88 2,51 2,11 1,71 1,30 0,88 0,45 0,46 0,90 1,37 1,82 2,30 2,73 3,18 3,69 4,14 4,67	4,28 3,85 3,47 3,05 2,66 2,24 1,81 1,37 0,93 0,48 0,48 0,96 1,44 1,92 2,42 2,87 3,35 3,87 4,34 4,90	4,52 4,08 3,67 3,22 2,42 2,36 1,90 1,44 0,98 0,50 0,50 1,00 1,51 2,01 2,53 3,00 3,50 4,04 4,53 5,12	4,76 4,29 3,85 3,39 2,96 2,48 2,00 1,51 1,02 0,52 0,53 1,05 1,57 2,10 2,63 3,13 3,66 4,21 4,72 5,39	4,98 4,48 4,03 3,55 3,09 2,59 2,08 1,57 1,05 0,54 0,56 1,09 1,63 2,17 2,72 3,25 3,80 4,36 4,89 5,51	5,18 4,67 4,20 3,65 3,22 2,69 2,16 1,62 1,09 0,56 0,58 1,12 1,67 2,24 2,82 3,36 3,93 4,50 5,05 5,68	5,42 4,84 4,36 3,84 3,34 2,79 2,24 1,68 1,12 0,57 0,59 1,15 1,73 2,30 2,89 3,47 4,06 4,64 5,20 5,84	5,56 5,00 4,51 3,98 3,45 2,88 2,30 1,72 1,16 0,59 0,60 1,18 1,77 2,36 2,95 3,57 4,16 4,75 5,34 5,96	5,73 5,16 4,65 4,11 3,56 2,97 2,37 1,76 1,19 0,60 0,61 1,20 1,80 2,40 2,99 3,65 4,26 4,86 5,46 6,08	5,90 5,31 4,78 4,24 3,67 3,03 2,43 1,80 1,21 0,61 0,62 1,22 1,82 2,42 3,01 3,72 4,35 4,94 5,56 6,16	6,05 5,45 4,91 4,36 3,76 3,10 2,49 1,84 1,24 0,62 0,62 1,23 1,84 2,44 3,05 3,79 4,42 5,00 5,64 6,22

Pastaba. Šia lentele galima naudotis perskaičiuojant santykinį tankį  į santykinį tankį .

1.4 lentelė. Temperatūros pataisos c, kurias reikia įvertinti nustatant saldaus vyno (etilo alkoholio koncentracija yra 13, 15, 17, 19, 21 tūrio %) tankį 20 °C temperatūroje, kai tankis matuojamas iš pirekso stiklo pagamintame piknometre temperatūroje t, °C

c

r_20ºC = r_t ± „-„, jei t < 20 °C; „+“ jei t > 20 °C

1000

t, ^0C	13 tūrio %							15 tūrio %							17 tūrio %
	Tankis							Tankis							tankis
	1,000	1,020	1,040	1,060	1,080	1,100	1,120	1,000	1,020	1,040	1,060	1,080	1,100	1,120	1,000	1,020	1,040	1,060	1,080	1,100	1,120
10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30	2,36 2,17 1,97 1,78 1,57 1,32 1,08 0,83 0,58 0,30 0,30 0,60 0,93 1,27 1,61 1,94 2,30 2,66 3,05 3,44	2,71 2,49 2,25 2,02 1,78 1,49 1,22 0,94 0,64 0,34 0,33 0,67 1,02 1,39 1,75 2,12 2,51 2,90 3,31 3,70	3,06 2,80 2,53 2,25 1,98 1,66 1,36 1,04 0,71 0,37 0,36 0,73 1,12 1,50 1,90 2,29 2,70 3,13 3,56 3,99	3,42 2,99 2,79 2,47 2,16 1,82 1,48 1,13 0,78 0,40 0,40 0,80 1,22 1,61 2,05 2,47 2,90 3,35 3,79 4,28	3,72 3,39 3,05 2,69 2,35 1,97 1,61 1,22 0,84 0,43 0,43 0,85 1,30 1,74 2,19 2,63 3,09 3,57 4,04 4,54	3,96 3,65 3,29 2,89 2,53 2,12 1,73 1,31 0,89 0,46 0,46 0,91 1,39 1,84 2,33 2,79 3,27 3,86 4,27 4,80	4,32 3,90 3,52 3,09 2,70 2,26 1,84 1,40 0,95 0,49 0,49 0,98 1,49 1,95 2,47 2,95 3,44 4,00 4,49 5,06	2,64 2,42 2,19 1,97 1,74 1,46 1,18 0,91 0,63 0,33 0,33 0,65 1,01 1,37 1,73 2,09 2,48 2,86 3,28 3,68	2,99 2,73 2,47 2,21 1,94 1,63 1,32 1,02 0,69 0,37 0,36 0,72 1,10 1,49 1,87 2,27 2,68 3,10 3,53 3,94	3,36 3,05 2,75 2,44 2,14 1,79 1,46 1,12 0,76 0,40 0,39 0,78 1,20 1,59 2,02 2,44 2,87 3,23 3,77 4,23	3,68 3,34 3,01 2,66 2,32 1,95 1,59 1,21 0,83 0,43 0,43 0,84 1,29 1,72 2,17 2,62 3,07 3,55 4,02 4,52	3,99 3,63 3,27 2,87 2,52 2,10 1,71 1,30 0,89 0,46 0,46 0,90 1,38 1,84 2,31 2,78 3,27 3,77 4,26 4,79	4,30 3,89 3,51 3,08 2,69 2,25 1,83 1,39 0,94 0,49 0,49 0,96 1,46 1,95 2,45 2,94 3,45 3,99 4,49 5,05	4,59 4,15 3,73 3,29 2,86 2,39 1,94 1,48 1,00 0,52 0,51 1,01 1,55 2,06 2,59 3,10 3,62 4,20 4,71 5,30	2,94 2,69 2,42 2,18 1,91 1,60 1,30 1,00 0,69 0,36 0,35 0,71 1,10 1,48 1,87 2,26 2,67 3,08 3,52 3,95	3,29 3,00 2,70 2,42 2,11 1,77 1,44 1,10 0,75 0,39 0,39 0,78 1,19 1,60 2,01 2,44 2,88 3,31 3,77 4,22	3,64 3,32 2,98 2,64 2,31 1,93 1,58 1,20 0,82 0,42 0,42 0,84 1,29 1,71 2,16 2,61 3,07 3,55 4,01 4,51	3,98 3,61 3,24 2,87 2,50 2,09 1,71 1,30 0,89 0,46 0,45 0,90 1,38 1,83 2,31 2,79 3,27 3,76 4,26 4,79	4,29 3,90 3,50 3,08 2,69 2,24 1,83 1,39 0,95 0,49 0,48 0,96 1,46 1,95 2,45 2,95 3,46 3,99 4,50 5,07	4,60 4,16 3,74 3,29 2,86 2,39 1,95 1,48 1,00 0,52 0,51 1,01 1,55 2,06 2,59 3,11 3,64 4,21 4,73 5,32	4,89 4,41 3,96 3,49 3,03 2,53 2,06 1,56 1,06 0,54 0,54 1,07 1,63 2,17 2,73 3,26 3,81 4,41 4,95 5,57

1.4 lentelės tęsinys

t, ^0C	19 tūrio %							21 tūrio %
	Tankis							Tankis
	1,000	1,020	1,040	1,060	1,080	1,100	1,120	1,000	1,020	1,040	1,060	1,080	1,100	1,120
10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30	3,27 2,99 2,68 2,40 2,11 1,76 1,43 1,09 0,76 0,39 0,38 0,78 1,19 1,60 2,02 2,44 2,88 3,31 3,78 4,24	3,62 3,30 2,96 2,64 2,31 1,93 1,57 1,20 0,82 0,42 0,42 0,84 1,28 1,72 2,16 2,62 3,08 3,54 4,03 4,51	3,97 3,61 3,24 2,87 2,51 2,09 1,70 1,30 0,88 0,45 0,45 0,90 1,38 1,83 2,31 2,79 3,27 3,78 4,27 4,80	4,30 3,90 3,50 3,09 2,69 2,25 1,83 1,39 0,95 0,49 0,48 0,96 1,47 1,95 2,46 2,96 3,42 4,00 4,52 5,08	4,62 4,19 3,76 3,30 2,88 2,40 1,95 1,48 1,01 0,52 0,51 1,02 1,55 2,06 2,60 3,12 3,66 4,22 4,76 5,36	4,92 4,45 4,00 3,51 3,05 2,55 2,08 1,57 1,06 0,55 0,45 1,07 1,64 2,18 2,74 3,28 3,84 4,44 4,99 5,61	5,21 4,70 4,21 3,71 3,22 2,69 2,18 1,65 1,12 0,57 0,57 1,13 1,72 2,29 2,88 3,43 4,01 4,64 5,21 5,86	3,62 3,28 2,96 2,64 2,31 1,93 1,56 1,20 0,82 0,42 0,41 0,84 1,29 1,73 2,18 2,53 3,10 3,56 4,06 4,54	3,97 3,61 3,24 2,88 2,51 2,10 1,70 1,31 0,88 0,46 0,45 0,90 1,39 1,85 2,32 2,81 3,30 3,79 4,31 4,82	4,32 3,92 3,52 3,11 2,71 2,26 1,84 1,41 0,95 0,49 0,48 0,96 1,48 1,96 2,47 2,97 3,47 4,03 4,55 5,11	4,66 4,22 3,78 3,33 2,89 2,42 1,97 1,50 1,01 0,52 0,51 1,02 1,57 2,08 2,62 3,15 3,69 4,25 4,80 5,39	4,97 4,50 4,03 3,54 3,08 2,57 2,09 1,59 1,08 0,55 0,54 1,08 1,65 2,19 2,76 3,31 3,88 4,47 5,04 5,66	5,27 4,76 4,27 3,74 3,25 2,72 2,21 1,68 1,13 0,58 0,57 1,14 1,74 2,31 2,90 3,47 4,06 4,69 5,27 5,91	5,56 5,01 4,49 3,95 3,43 2,86 2,32 1,77 1,18 0,61 0,60 1,19 1,82 2,42 3,04 3,62 4,23 4,89 5,48 6,16

1.5 lentelė. Temperatūros pataisos c, kurias reikia įvertinti nustatant sauso vyno ir sauso vyno, iš kurio pašalintas etilo alkoholis, tankį 20 °C temperatūroje, kai tankis matuojamas iš paprasto stiklo pagamintame piknometre ar areometru temperatūroje t, °C

t,^0C	Etilo alkoholio koncentracija
	0	5	6	7	8	9	10	11	12	13	14	15	16	17	18	19	20	21	22	23	24	25	26	27
10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30	1,45 1,35 1,24 1,12 0,99 0,86 0,71 0,55 0,38 0,19 0,21 0,43 0,67 0,91 1,16 1,42 1,69 1,97 2,26 2,56	1,51 1,40 1,28 1,16 1,03 0,89 0,73 0,57 0,39 0,20 0,22 0,45 0,69 0,93 1,19 1,46 1,74 2,03 2,33 2,64	1,55 1,43 1,31 1,18 1,05 0,90 0,74 0,57 0,39 0,20 0,22 0,45 0,70 0,95 1,21 1,49 1,77 2,06 2,37 2,67	1,58 1,47 1,34 1,21 1,07 0,92 0,76 0,59 0,40 0,21 0,23 0,46 0,71 0,97 1,23 1,51 1,80 2,09 2,40 2,72	1,64 1,52 1,39 1,25 1,11 0,95 0,78 0,60 0,41 0,21 0,23 0,47 0,72 0,99 1,26 1,54 1,83 2,14 2,45 2,77	1,70 1,58 1,44 1,30 1,14 0,98 0,81 0,62 0,43 0,22 0,24 0,49 0,74 1,01 1,29 1,58 1,88 2,19 2,50 2,83	1,78 1,65 1,50 1,35 1,19 1,02 0,84 0,65 0,44 0,23 0,25 0,50 0,77 1,04 1,33 1,62 1,93 2,24 2,57 2,90	1,88 1,73 1,58 1,42 1,24 1,07 0,87 0,67 0,46 0,24 0,25 0,52 0,79 1,07 1,37 1,67 1,98 2,31 2,64 2,98	1,98 1,83 1,66 1,49 1,31 1,12 0,91 0,70 0,48 0,25 0,26 0,54 0,82 1,11 1,42 1,73 2,05 2,38 2,73 3,08	2,09 1,93 1,75 1,56 1,37 1,17 0,96 0,74 0,50 0,26 0,27 0,56 0,85 1,15 1,47 1,79 2,12 2,46 2,82 3,18	2,21 2,03 1,84 1,64 1,44 1,23 0,99 0,77 0,52 0,27 0,29 0,58 0,88 1,20 1,52 1,85 2,20 2,55 2,91 3,28	2,34 2,15 1,94 1,73 1,52 1,29 1,05 0,81 0,55 0,28 0,29 0,60 0,91 1,24 1,57 1,92 2,27 2,63 2,99 3,38	2,47 2,26 2,04 1,82 1,59 1,35 1,10 0,84 0,57 0,29 0,31 0,63 0,95 1,29 1,63 1,99 2,35 2,73 3,11 3,50	2,60 2,38 2,15 1,91 1,67 1,42 1,15 0,88 0,60 0,30 0,32 0,65 0,99 1,34 1,70 2,07 2,44 2,83 3,22 3,62	2,75 2,51 2,26 2,01 1,75 1,49 1,21 0,92 0,62 0,32 0,34 0,68 1,03 1,39 1,76 2,14 2,53 2,93 3,34 3,75	2,90 2,65 2,38 2,11 1,84 1,56 1,27 0,96 0,65 0,33 0,35 0,71 1,07 1,45 1,83 2,22 2,63 3,03 3,45 3,88	3,06 2,78 2,51 2,22 1,93 1,63 1,33 1,01 0,68 0,35 0,36 0,73 1,12 1,50 1,90 2,31 2,72 3,14 3,58 4,02	3,22 2,93 2,63 2,33 2,03 1,71 1,39 1,05 0,71 0,36 0,38 0,77 1,16 1,56 1,97 2,40 2,82 3,26 3,70 4,16	3,39 3,08 2,77 2,45 2,13 1,80 1,45 1,11 0,74 0,38 0,39 0,80 1,21 1,62 2,05 2,49 2,93 3,38 3,84 4,30	3,57 3,24 2,91 2,57 2,23 1,88 1,52 1,15 0,78 0,39 0,41 0,83 1,25 1,69 2,13 2,58 3,04 3,50 3,97 4,46	3,75 3,40 3,05 2,69 2,33 1,96 1,59 1,20 0,81 0,41 0,43 0,86 1,30 1,76 2,21 2,67 3,14 3,62 4,11 4,61	3,93 3,57 3,19 2,81 2,44 2,05 1,66 1,26 0,85 0,43 0,44 0,89 1,35 1,82 2,29 2,77 3,25 3,75 4,25 4,76	4,12 3,73 3,34 2,95 2,55 2,14 1,73 1,31 0,88 0,44 0,46 0,93 1,40 1,88 2,37 2,86 3,37 3,85 4,39 4,92	4,31 3,90 3,49 3,07 2,66 2,23 1,80 1,36 0,91 0,46 0,48 0,96 1,45 1,95 2,45 2,96 3,48 4,00 4,54 5,07

Pastaba. Šia lentele galima naudotis perskaičiuojant santykinį tankį  į santykinį tankį .

1.6 lentelė. Temperatūros pataisos c, kuria reikia įvertinti nustatant natūralios ir koncentruotos misos tankį 20 °C temperatūroje, kai tankis matuojamas iš paprasto stiklo pagamintame piknometre ar areometru temperatūroje t, °C

t,^0C	Tankis
	1,05	1,06	1,07	1,08	1,09	1,10	1,11	1,12	1,13	1,14	1,15	1,16	1,18	1,20	1,22	1,24	1,26	1,28	1,30	1,32	1,34	1,36
10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30	2,17 2,00 1,81 1,62 1,44 1,21 1,00 0,76 0,53 0,28 0,28 0,55 0,85 1,15 1,44 1,76 2,07 2,39 2,74 3,06	2,34 2,16 1,95 1,74 1,54 1,29 1,06 0,82 0,56 0,30 0,29 0,58 0,90 1,19 1,52 1,84 2,16 2,51 2,86 3,21	2,52 2,29 2,08 1,85 1,64 1,37 1,12 0,86 0,59 0,31 0,31 0,61 0,95 1,25 1,59 1,93 2,26 2,63 2,97 3,35	2,68 2,44 2,21 1,96 1,73 1,45 1,19 0,91 0,63 0,33 0,33 0,64 0,99 1,31 1,67 2,02 2,36 2,74 3,09 3,50	2,85 2,59 2,34 2,07 1,82 1,53 1,25 0,96 0,65 0,35 0,34 0,67 1,04 1,37 1,74 2,10 2,46 2,85 3,22 3,63	2,99 2,73 2,47 2,17 1,92 1,60 1,31 1,00 0,69 0,36 0,36 0,70 1,08 1,43 1,81 2,18 2,56 2,96 3,34 3,77	3,16 2,86 2,58 2,28 2,00 1,68 1,37 1,05 0,72 0,38 0,37 0,73 1,12 1,48 1,88 2,25 2,65 3,06 3,46 3,91	3,29 2,99 2,70 2,38 2,08 1,75 1,43 1,09 0,74 0,39 0,39 0,76 1,16 1,54 1,95 2,33 2,74 3,16 3,57 4,02	3,44 3,12 2,82 2,48 2,17 1,82 1,49 1,14 0,77 0,41 0,40 0,78 1,21 1,60 2,02 2,41 2,83 3,28 3,69 4,15	3,58 3,24 2,92 2,59 2,25 1,89 1,54 1,18 0,80 0,42 0,41 0,81 1,25 1,65 2,09 2,49 2,91 3,38 3,80 4,28	3,73 3,37 3,03 2,68 2,34 1,97 1,60 1,22 0,82 0,43 0,43 0,84 1,29 1,71 2,16 2,56 3,00 3,48 3,90 4,40	3,86 3,48 3,14 2,77 2,42 2,03 1,65 1,25 0,85 0,43 0,44 0,87 1,32 1,76 2,22 2,64 3,07 3,57 4,00 4,52	4,13 3,71 3,35 2,94 2,57 2,16 1,75 1,32 0,90 0,46 0,46 0,93 1,39 1,86 2,34 2,78 3,24 3,75 4,20 4,75	4,36 3,94 3,55 3,11 2,73 2,28 1,84 1,39 0,95 0,48 0,48 0,97 1,46 1,95 2,45 2,91 3,39 3,92 4,39 4,96	4,60 4,15 3,72 3,28 2,86 2,40 1,94 1,46 0,99 0,50 0,51 1,02 1,52 2,04 2,55 3,03 3,55 4,08 4,58 5,16	4,82 4,33 3,90 3,44 2,99 2,51 2,02 1,52 1,02 0,52 0,54 1,06 1,58 2,11 2,64 3,15 3,69 4,23 4,74 5,35	5,02 4,52 4,07 3,54 3,12 2,61 2,09 1,57 1,06 0,54 0,56 1,09 1,62 2,17 2,74 3,26 3,82 4,37 4,90 5,52	5,25 4,69 4,23 3,72 3,24 2,71 2,17 1,63 1,09 0,55 0,57 1,12 1,68 2,23 2,81 3,37 3,94 4,51 5,05 5,67	5,39 4,85 4,37 3,86 3,35 2,80 2,23 1,67 1,13 0,57 0,58 1,15 1,72 2,29 2,87 3,47 4,04 4,62 5,19 5,79	5,56 5,01 4,52 3,99 3,46 2,89 2,30 1,71 1,16 0,58 0,59 1,17 1,75 2,33 2,90 3,55 4,14 4,73 5,31 5,91	5,73 5,15 4,64 4,12 3,57 2,94 2,36 1,75 1,18 0,59 0,60 1,19 1,77 2,35 2,92 3,62 4,23 4,80 5,40 5,99	5,87 5,29 4,77 4,24 3,65 3,01 2,42 1,79 1,20 0,60 0,60 1,19 1,79 2,37 2,96 3,60 4,30 4,86 5,48 6,04

Pastaba. Šia lentele galima naudotis perskaičiuojant santykinį tankį  į santykinį tankį .

1.7 lentelė. Temperatūros pataisos c, kurias reikia įvertinti nustatant saldaus vyno (etilo alkoholio koncentracija yra 13, 15, 17, 19, 21 tūrio %) tankį 20 °C temperatūroje, kai tankis matuojamas iš paprasto stiklo pagamintame piknometre ar areometru temperatūroje t, °C

t,^0C	13 tūrio %							15 tūrio %							17 tūrio %
	Tankis							Tankis							Tankis
	1,000	1,020	1,040	1,060	1,080	1,100	1,120	1,000	1,020	1,040	1,060	1,080	1,100	1,120	1,000	1,020	1,040	1,060	1,080	1,100	1,120
10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30	2,24 2,06 1,87 1,69 1,49 1,25 1,03 0,80 0,54 0,29 0,29 0,57 0,89 1,22 1,61 1,87 2,21 2,56 2,93 3,31	2,58 2,37 2,14 1,93 1,70 1,42 1,17 0,90 0,61 0,33 0,32 0,64 0,98 1,34 1,68 2,05 2,42 2,80 3,19 3,57	2,93 2,69 2,42 2,14 1,90 1,59 1,30 1,00 0,68 0,36 0,35 0,70 1,08 1,44 1,83 2,22 2,60 3,02 3,43 3,86	3,27 2,97 2,67 2,37 2,09 1,75 1,43 1,09 0,75 0,39 0,39 0,76 1,17 1,56 1,98 2,40 2,80 3,25 3,66 4,15	3,59 3,26 2,94 2,59 2,27 1,90 1,55 1,17 0,81 0,42 0,42 0,82 1,26 1,68 2,12 2,56 3,00 3,47 3,91 4,41	3,89 3,53 3,17 2,80 2,44 2,05 1,67 1,27 0,86 0,45 0,45 0,88 1,34 1,79 2,26 2,71 3,18 3,67 4,14 4,66	4,18 3,78 3,40 3,00 2,61 2,19 1,78 1,36 0,92 0,48 0,47 0,93 1,43 1,90 2,40 2,87 3,35 3,89 4,37 4,92	2,51 2,31 2,09 1,88 1,67 1,39 1,06 0,87 0,60 0,32 0,32 0,63 0,97 1,32 1,66 2,02 2,39 2,75 3,16 3,55	2,85 2,61 2,36 2,12 1,86 1,56 1,27 0,98 0,66 0,36 0,35 0,69 1,06 1,44 1,81 2,20 2,59 2,89 3,41 3,81	3,20 2,93 2,64 2,34 2,06 1,72 1,40 1,08 0,73 0,39 0,38 0,75 1,16 1,54 1,96 2,37 2,78 3,22 3,65 4,10	3,54 3,21 2,90 2,56 2,25 1,88 1,53 1,17 0,80 0,42 0,42 0,81 1,25 1,66 2,11 2,54 2,98 3,44 3,89 4,38	3,85 3,51 3,16 2,78 2,45 2,03 1,65 1,26 0,85 0,45 0,45 0,87 1,34 1,78 2,25 2,70 3,17 3,66 4,13 4,66	4,02 3,64 3,27 2,88 2,51 2,11 1,77 1,35 0,91 0,48 0,48 0,93 1,42 1,89 2,39 2,85 3,35 3,86 4,36 4,90	4,46 4,02 3,61 3,19 2,77 2,32 1,88 1,44 0,97 0,51 0,50 0,98 1,51 2,00 2,52 3,01 3,52 4,07 4,59 5,16	2,81 2,57 2,32 2,09 1,83 1,54 1,25 0,96 0,66 0,35 0,34 0,68 1,06 1,43 1,80 2,18 2,58 2,97 3,40 3,82	3,15 2,89 2,60 2,33 2,03 1,71 1,39 1,06 0,72 0,38 0,38 0,75 1,15 1,56 1,94 2,36 2,78 3,21 3,66 4,08	3,50 3,20 2,87 2,55 2,23 1,87 1,52 1,16 0,79 0,41 0,41 0,81 1,25 1,65 2,09 2,53 2,97 3,44 3,89 4,37	3,84 3,49 3,13 2,77 2,42 2,03 1,65 1,26 0,86 0,45 0,44 0,87 1,34 1,77 2,24 2,71 3,17 3,66 4,13 4,65	4,15 3,77 3,39 2,98 2,61 2,18 1,77 1,35 0,92 0,48 0,47 0,93 1,42 1,89 2,39 2,86 3,36 3,88 4,38 4,93	4,45 4,03 3,63 3,19 2,77 2,32 1,89 1,44 0,97 0,51 0,50 0,99 1,51 2,00 2,52 3,02 3,54 4,09 4,61 5,17	4,74 4,28 3,84 3,39 2,94 2,47 2,00 1,52 1,03 0,53 0,53 1,04 1,59 2,11 2,66 3,17 3,71 4,30 4,82 5,42

1.7 lentelės tęsinys

t, ^0C	19 tūrio %							21 tūrio %
	Tankis							Tankis
	1,000	1,020	1,040	1,060	1,080	1,100	1,120	1,000	1,020	1,040	1,060	1,080	1,100	1,120
10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30	3,14 2,87 2,58 2,31 2,03 1,69 1,38 1,06 0,73 0,38 0,37 0,75 1,15 1,55 1,95 2,36 2,79 3,20 3,66 4,11	3,48 3,18 2,86 2,55 2,23 1,86 1,52 1,16 0,79 0,41 0,41 0,81 1,30 1,67 2,09 2,54 2,99 3,44 3,92 4,37	3,83 3,49 3,13 2,77 2,43 2,02 1,65 1,26 0,85 0,44 0,44 0,87 1,34 1,77 2,24 2,71 3,18 3,66 4,15 4,66	4,17 3,78 3,39 2,99 2,61 2,18 1,78 1,35 0,92 0,48 0,47 0,93 1,43 1,89 2,39 2,89 3,38 3,89 4,40 4,94	4,48 4,06 3,65 3,20 2,80 2,33 1,90 1,44 0,98 0,51 0,50 0,99 1,51 2,00 2,53 3,04 3,57 4,11 4,64 5,22	4,78 4,32 3,88 3,41 2,96 2,48 2,02 1,53 1,03 0,52 0,53 1,04 1,60 2,11 2,67 3,20 3,75 4,32 4,87 5,46	5,07 4,57 4,10 3,61 3,13 2,62 2,13 1,62 1,09 0,56 0,56 1,10 1,68 2,23 2,71 3,35 3,92 4,53 5,08 5,71	3,50 3,18 2,86 2,56 2,23 1,86 1,51 1,15 0,79 0,41 0,41 0,81 1,25 1,68 2,11 2,55 3,01 3,46 3,95 4,42	3,84 3,49 3,13 2,79 2,43 2,03 1,65 1,25 0,85 0,44 0,44 0,88 1,34 1,80 2,25 2,73 3,20 3,69 4,20 4,68	4,19 3,80 3,41 3,01 2,63 2,19 1,78 1,35 0,92 0,47 0,47 0,94 1,44 1,90 2,40 2,90 3,40 3,93 4,43 4,97	4,52 4,09 3,67 3,23 2,81 2,35 1,91 1,45 0,98 0,51 0,51 1,00 1,63 2,02 2,55 3,07 3,59 4,15 4,68 5,25	4,83 4,34 3,92 3,44 3,00 2,50 2,03 1,54 1,05 0,54 0,54 1,06 1,61 2,13 2,69 3,22 3,78 4,36 4,92 5,53	5,12 4,63 4,15 3,65 3,16 2,65 2,15 1,63 1,10 0,57 0,57 1,10 1,70 2,25 2,83 3,38 3,96 4,58 5,15 5,77	5,41 4,88 4,37 3,85 3,33 2,80 2,26 1,71 1,15 0,59 0,59 1,17 1,78 2,36 2,97 3,54 4,13 4,77 5,36 6,02

2. Cukraus koncentracijos vynuogių misoje, koncentruotoje vynuogių misoje ir rektifikuotoje koncentruotoje vynuogių misoje nustatymas refraktometriniu metodu

2.1. Metodo esmė

Lūžio rodiklis esant 20 °C temperatūrai, išreikštas absoliutine verte, arba sacharozės masės procentais, yra pateiktas atitinkamoje lentelėje, kuria naudojantis galima apskaičiuoti cukraus koncentraciją, g/dm³ ar g/kg vynuogių misoje, koncentruotoje vynuogių misoje bei rektifikuotoje koncentruotoje vynuogių misoje;

2.2. Įranga ir priemonės:

2.2.1. Abės refraktometras

Naudojamo refraktometro skalė turi būti sugraduota sacharozės masės procentais 0,1% tikslumu arba lūžio rodiklio vienetais keturių skaičių po kablelio tikslumu. Refraktometras turi turėti termometrą, kurio skalė būtų bent nuo 15 °C iki 25 ^oC, bei įtaisą vandeniui cirkuliuoti (termostatą), kad būtų galima atlikti matavimus 20±5 ^oC temperatūroje. Turi būti griežtai laikomasi darbo su šiuo prietaisu taisyklių, ypač kalibruojant ir reguliuojant šviesos šaltinį;

2.3. Mėginio paruošimas:

2.3.1. Misa ir koncentruota misa

Prireikus misa perkošiama per sausą keturgubą marlę ir nuleidus pirmuosius filtrato lašus, atliekami filtruoto produkto matavimai;

2.3.2. Rektifikuota koncentruota misa

Nuo koncentracijos priklauso ar bus vartojama rektifikuota koncentruota misa, ar jos tirpalas. Tirpalas gaminamas skiedžiant 200 g rektifikuotos koncentruotos misos vandeniu, kol gaunama 500 g tirpalo. Sverti būtina tiksliai;

2.4. Analizė

Mėginys pašildomas iki 20±5 ^oC temperatūros. Nedaug jo užlašinama ant apatinės refraktometro prizmės taip, kad tolygiai padengtų stiklo paviršių (kadangi prizmės yra stipriai prispaustos viena prie kitos). Matavimai atliekami pagal naudojamo prietaiso darbo instrukciją. Nustatomas sacharozės kiekis masės procentais 0,1% tikslumu arba lūžio rodiklis keturių skaičių po kablelio tikslumu. To paties mėgino matavimus reikia atlikti ne mažiau kaip du kartus. Pažymima temperatūra t, ^oC;

2.5. Apskaičiavimas:

2.5.1. Temperatūros pataisa:

2.5.1.1. Jei naudojamasi sacharozės masės procentais sugraduotos skalės prietaisais, temperatūros pataisos randamos 2.1 lentelėje;

2.5.1.2. Jei naudojamasi lūžio rodiklio vienetais sugraduotos skalės prietaisais, pirmiausia 2.2 lentelėje randamas lūžio rodiklis temperatūroje t, ^oC, paskui (I-mas stulpelis) jį atitinkantis sacharozės kiekis masės procentais temperatūroje t, ^oC. Ši vertė yra patikslinama atsižvelgiant į išmatuotą temperatūrą ir naudojantis 2.1 lentele, išreiškiama koncentracija 20 ^oC temperatūroje;

2.5.2. Cukraus koncentracija misoje ir koncentruotoje misoje

2.2 lentelėje randamas sacharozės kiekis masės procentais 20 ^oC temperatūroje bei toje pačioje eilutėje – cukraus koncentracija g/dm³ ir g/kg. Cukraus koncentracija išreiškiama invertuotuoju cukrumi vieno skaičiaus po kablelio tikslumu;

2.5.3. Cukraus koncentracija rektifikuotoje koncentruotoje misoje

2.3 lentelėje randamas sacharozės kiekis masės procentais 20 ^oC temperatūroje bei toje pačioje eilutėje – cukraus koncentraciją g/dm³ ir g/kg. Cukraus koncentracija išreiškiama invertuotuoju cukrumi vieno skaičiaus po kablelio tikslumu. Jei matavimai atlikti praskiestos rektifikuotos koncentruotos misos, gautą rezultatą reikia padauginti iš praskiedimo koeficiento;

2.5.4. Misos, koncentruotos misos ir rektifikuotos koncentruotos misos lūžio rodiklis

2.2 lentelėje randamas sacharozės kiekis masės procentais 20 ^oC temperatūroje bei toje pačioje eilutėje – lūžio rodiklis 20 ^oC temperatūroje. Šis rodiklis užrašomas keturių skaičių po kablelio tikslumu;

2.1 lentelė. Cukraus koncentracijos masės vnt., kuri buvo nustatyta ne 20 °C temperatūroje (temperatūra gali būti 20±5 °C) pataisos

Temperatūra, ^0С	Sacharozė, g/100 g produkto
	5	10	15	20	30	40	50	60	70	75
	Atimti
15 16 17 18 19	0,25 0,21 0,16 0,11 0,06	0,27 0,23 0,18 0,12 0,07	0,31 0,27 0,20 0,14 0,08	0,31 0,27 0,20 0,15 0,08	0,34 0,29 0,22 0,16 0,08	0,36 0,31 0,23 0,16 0,09	0,36 0,31 0,23 0,15 0,09	0,37 0,32 0,23 0,12 0,08	0,36 0,31 0,20 0,12 0,07	0,36 0,23 0,17 0,09 0,05
	Pridėti
21 22 23 24 25	0,06 0,12 0,18 0,24 0,30	0,07 0,14 0,20 0,26 0,32	0,07 0,14 0,20 0,26 0,32	0,07 0,14 0,21 0,27 0,34	0,07 0,14 0,21 0,28 0,36	0,07 0,14 0,21 0,28 0,36	0,07 0,14 0,21 0,28 0,36	0,07 0,14 0,22 0,28 0,36	0,07 0,14 0,22 0,29 0,36	0,07 0,14 0,22 0,29 0,37

2.2 lentelė. Cukrų kiekis misoje, koncentruotoje misoje, nustatytas refraktometru, kurio skalė sugraduota cukraus masės vnt. arba lūžio rodiklio vnt.

Sacharozė, % (m/m)	Lūžio rodiklis	Tankis	Cukrus
	20 ^°С		G/dm^3	g/kg
10,0 10,1 10,2 10,3 10,4 10,5 10,6 10,7 10,8 10,9	1,34781 1,34798 1,34814 1,34830 1,34845 1,34860 1,34875 1,34890 1,34906 1,34921	1,0390 1,0394 1,0398 1,0402 1,0406 1,0410 1,0414 1,0419 1,0423 1,0427	82,3 83,4 84,5 85,6 86,6 87,6 88,6 89,7 90,8 91,8	79,2 80,2 81,3 82,2 83,2 84,1 85,1 86,1 87,1 88,1
11,0 11,1 11,2 11,3 11,4 11,5 11,6 11,7 11,8 11,9	1,34936 1,34952 1,34968 1,34984 1,34999 1,35015 1,35031 1,35046 1,35062 1,35077	1,0431 1,0435 1,0439 1,0443 1,0447 1,0452 1,0456 1,0460 1,0464 1,0468	92,9 94,0 95,0 96,1 97,1 98,2 99,3 100,3 101,4 102,5	89,1 90,0 91,0 92,0 92,9 94,0 95,0 95,9 96,9 97,9
12,0 12,1 12,2 12,3 12,4 12,5 12,6 12,7 12,8 12,9	1,35092 1,35108 1,35124 1,35140 1,35156 1,35172 1,35187 1,35203 1,35219 1,35234	1,0473 1,0477 1,0481 1,0485 1,0489 1,0494 1,0498 1,0502 1,0506 1,0510	103,6 104,7 105,7 106,8 107,9 109,0 110,0 111,1 112,2 113,3	98,9 99,9 100,8 101,9 102,9 103,8 104,8 105,8 106,8 107,8
13,0 13,1 13,2 13,3 13,4 13,5 13,6 13,7 13,8 13,9	1,35249 1,35266 1,35282 1,35298 1,35313 1,35329 1,35345 1,35360 1,35376 1,35391	1,0514 1,0519 1,0523 1,0527 1,0531 1,0536 1,0540 1,0544 1,0548 1,0552	114,3 115,4 116,5 117,6 118,6 119,7 120,8 121,8 122,9 124,0	108,7 109,7 110,7 111,7 112,6 113,6 114,6 115,6 116,5 117,5
14,0 14,1 14,2 14,3 14,4 14,5 14,6 14,7 14,8 14,9	1,35407 1,35424 1,35440 1,35456 1,35472 1,35488 1,35503 1,35519 1,35535 1,35551	1,0557 1,0561 1,0565 1,0569 1,0574 1,0578 1,0582 1,0586 1,0591 1,0595	125,1 126,2 127,3 128,4 129,5 130,6 131,6 132,7 133,8 134,9	118,5 119,5 120,5 121,5 122,5 123,4 124,4 125,4 126,3 127,3
15,0 15,1 15,2 15,3 15,4 15,5 15,6 15,7 15,8 15,9	1,35567 1,35583 1,35599 1,35615 1,35631 1,35648 1,35664 1,35680 1,35696 1,35712	1,0599 1,0603 1,0608 1,0612 1,0616 1,0621 1,0625 1,0629 1,0633 1,0638	136,0 137,1 138,2 139,3 140,4 141,5 142,6 143,7 144,8 145,9	128,3 129,3 130,3 131,3 132,3 133,2 134,2 135,2 136,2 137,2
16,0 16,1 16,2 16,3 16,4 16,5 16,6 16,7 16,8 16,9	1,35728 1,35744 1,35760 1,35776 1,35793 1,35809 1,35825 1,35842 1,35858 1,35874	1,0642 1,0646 1,0651 1,0655 1,0660 1,0664 1,0668 1,0672 1,0677 1,0681	147,0 148,1 149,2 150,3 151,5 152,6 153,7 154,8 155,9 157,0	138,1 139,1 140,1 141,1 142,1 143,1 144,1 145,1 146,0 147,0
17,0 17,1 17,2 17,3 17,4 17,5 17,6 17,7 17,8 17,9	1,3890 1,35907 1,35923 1,35939 1,35955 1,35972 1,35988 1,36004 1,36020 1,36036	1,0685 1,0690 1,0694 1,0699 1,0703 1,0707 1,0711 1,0716 1,0720 1,0724	158,1 159,3 160,4 161,5 162,6 163,7 164,8 165,9 167,0 168,1	148,0 149,0 150,0 151,0 151,9 152,9 153,9 154,8 155,8 156,8
18,0 18,1 18,2 18,3 18,4 18,5 18,6 18,7 18,8 18,9	1,36053 1,36070 1,36086 1,36102 1,36119 1,36136 1,36152 1,36169 1,36185 1,36201	1,0729 1,0733 1,0738 1,0742 1,0746 1,0751 1,0755 1,0760 1,0764 1,0768	169,3 170,4 171,5 172,6 173,7 174,9 176,0 177,2 178,3 179,4	157,8 158,8 159,7 160,7 161,6 162,6 163,6 164,6 165,6 166,6
19,0 19,1 19,2 19,3 19,4 19,5 19,6 19,7 19,8 19,9	1,36217 1,36234 1,36251 1,36267 1,36284 1,36301 1,36318 1,36335 1,36351 1,36367	1,0773 1,0777 1,0782 1,0786 1,0791 1,0795 1,0800 1,0804 1,0809 1,0813	180,5 181,7 182,8 183,9 185,1 186,3 187,4 188,6 189,7 190,8	167,6 168,6 169,5 170,5 171,5 172,5 173,5 174,5 175,5 176,5
20,0 20,1 20,2 20,3 20,4 20,5 20,6 20,7 20,8 20,9	1,3683 1,36400 1,36417 1,36434 1,36451 1,36468 1,36484 1,36501 1,36518 1,36534	1,0817 1,0822 1,0826 1,0831 1,0835 1,0840 1,0844 1,0849 1,0853 1,0857	191,9 193,1 194,2 195,3 196,5 197,7 198,8 200,0 201,1 202,2	177,4 178,4 179,4 180,4 181,4 182,3 183,3 184,3 185,3 186,2
21,0 21,1 21,2 21,3 21,4 21,5 21,6 21,7 21,8 21,9	1,36550 1,36568 1,36585 1,36601 1,36618 1,36635 1,36652 1,36669 1,36685 1,36702	1,0862 1,0866 1,0871 1,0875 1,0880 1,0884 1,0889 1,0893 1,0897 1,0902	203,3 204,5 205,7 206,8 207,9 209,1 210,3 211,4 212,5 213,6	187,2 188,2 189,2 190,2 191,1 192,1 193,1 194,1 195,0 196,0
22,0 22,1 22,2 22,3 22,4 22,5 22,6 22,7 22,8 22,9	1,36719 1,36736 1,36753 1,36770 1,36787 1,36804 1,36820 1,36837 1,36854 1,36871	1,0906 1,0911 1,0916 1,0920 1,0925 1,0929 1,0933 1,0938 1,0943 1,0947	214,8 216,0 217,2 218,3 219,5 220,6 221,7 222,9 224,1 225,2	196,9 198,0 199,0 199,9 200,9 201,8 202,8 203,8 204,8 205,8
23,0 23,1 23,2 23,3 23,4 23,5 23,6 23,7 23,8 23,9	1,36888 1,36905 1,36922 1,36939 1,36956 1,36973 1,36991 1,37008 1,37025 1,37042	1,0952 1,0956 1,0961 1,0965 1,0970 1,0975 1,0979 1,0984 1,0988 1,0993	226,4 227,6 228,7 229,9 231,1 232,3 233,4 234,6 235,8 237,0	206,7 207,7 208,7 209,7 210,7 211,6 212,6 213,6 214,6 215,6
24,0 24,1 24,2 24,3 24,4 24,5 24,6 24,7 24,8 24,9	1,37059 1,37076 1,37093 1,37110 1,37128 1,37145 1,37162 1,37180 1,37197 1,37214	1,0998 1,1007 1,1011 1,1016 1,1022 1,1026 1,1030 1,1035 1,1041 1,1045	238,2 239,3 240,3 241,6 243,0 244,0 245,0 246,4 247,7 248,7	216,6 217,4 218,2 219,4 220,5 221,3 222,1 223,2 224,4 225,2
25,0 25,1 25,2 25,3 25,4 25,5 25,6 25,7 25,8 25,9	1,37232 1,37249 1,37266 1,37283 1,37300 1,37317 1,37335 1,37353 1,37370 1,37387	1,1049 1,1053 1,1057 1,1062 1,1068 1,1072 1,1076 1,1081 1,1087 1,1091	249,7 250,7 251,7 253,0 254,4 255,4 256,4 257,8 259,1 260,1	226,0 226,8 227,6 228,7 229,9 230,7 231,5 232,6 233,7 234,5
26,0 26,1 26,2 26,3 26,4 26,5 26,6 26,7 26,8 26,9	1,37405 1,37423 1,37440 1,37457 1,37475 1,37493 1,37510 1,37528 1,37545 1,37562	1,1095 1,1100 1,1106 1,1110 1,1114 1,1119 1,1125 1,1129 1,1133 1,1138	261,1 262,5 263,8 264,8 265,8 267,2 268,5 269,5 270,5 271,8	235,3 236,4 237,5 238,3 239,2 240,3 241,4 242,2 243,0 244,1
27,0 27,1 27,2 27,3 27,4 27,5 27,6 27,7 27,8 27,9	1,3780 1,37598 1,37615 1,37632 1,37650 1,37667 1,37685 1,37703 1,37721 1,37739	1,1144 1,1148 1,1152 1,1157 1,1163 1,1167 1,1171 1,1176 1,1182 1,1186	273,2 274,2 275,2 276,5 277,9 278,9 279,9 281,3 282,6 283,6	245,2 246,0 246,8 247,9 249,0 249,8 250,6 251,6 252,7 253,5
28,0 28,1 28,2 28,3 28,4 28,5 28,6 28,7 28,8 28,9	1,37757 1,37775 1,37793 1,37810 1,37828 1,37846 1,37863 1,37881 1,37899 1,37917	1,1190 1,1195 1,1201 1,1205 1,1209 1,1214 1,1220 1,1224 1,1228 1,1233	284,6 286,0 287,3 288,3 289,3 290,7 292,0 293,0 294,0 295,3	254,3 255,4 256,5 257,3 258,1 259,2 260,3 261,0 261,8 262,9
29,0 29,1 29,2 29,3 29,4 29,5 29,6 29,7 29,8 29,9	1,37935 1,37953 1,37971 1,37988 1,388006 1,38024 1,38042 1,38060 1,38078 1,38096	1,1239 1,1244 1,1250 1,1254 1,1258 1,1263 1,1269 1,1273 1,1277 1,1282	296,7 298,1 299,4 300,4 301,4 302,8 304,1 305,1 306,1 307,4	264,0 265,1 266,1 266,9 267,7 268,8 269,9 270,6 271,4 272,5
30,0 30,1 30,2 30,3 30,4 30,5 30,6 30,7 30,8 30,9	1,38114 1,38132 1,38150 1,38168 1,38186 1,38204 1,38222 1,38240 1,38258 1,38276	1,1288 1,1293 1,1298 1,1302 1,1307 1,1312 1,1317 1,1322 1,1327 1,1332	308,8 310,0 311,2 312,4 313,6 314,8 316,0 317,2 318,4 319,6	273,6 274,5 275,5 276,4 277,3 278,3 279,2 280,2 281,1 282,0
31,0 31,1 31,2 31,3 31,4 31,5 31,6 31,7 31,8 31,9	1,38294 1,38312 1,38330 1,38349 1,38367 1,38385 1,38403 1,38421 1,38440 1,38458	1,1336 1,1341 1,1346 1,1351 1,1356 1,1361 1,1366 1,1371 1,1376 1,1380	320,8 322,0 323,2 324,4 325,6 326,8 328,1 329,3 330,5 331,7	283,0 283,9 284,9 285,8 286,8 287,7 288,6 289,6 290,5 291,5
32,0 32,1 32,2 32,3 32,4 32,5 32,6 32,7 32,8 32,9	1,38476 1,38494 1,38513 1,38531 1,38550 1,38568 1,38586 1,38605 1,38623 1,38642	1,1385 1,1391 1,1396 1,1401 1,1406 1,1411 1,1416 1,1422 1,1427 1,1432	332,9 334,2 335,5 336,7 338,0 339,3 340,6 341,9 343,1 344,4	292,4 293,4 294,4 295,4 296,4 297,3 298,3 299,3 300,3 301,3
33,0 33,1 33,2 33,3 33,4 33,5 33,6 33,7 33,8 33,9	1,38660 1,38678 1,38697 1,38715 1,38734 1,38753 1,38771 1,38790 1,38808 1,38827	1,1437 1,1442 1,1447 1,1452 1,1457 1,1461 1,1466 1,1471 1,1476 1,1481	345,7 346,9 348,1 349,3 350,5 351,7 352,9 354,1 355,3 356,5	302,3 303,2 304,1 305,0 305,9 306,9 307,8 308,7 309,6 310,5
34,0 34,1 34,2 34,3 34,4 34,5 34,6 34,7 34,8 34,9	1,38845 1,38864 1,38882 1,38901 1,38919 1,38938 1,38957 1,38975 1,38994 1,39012	1,1486 1,1491 1,1496 1,1501 1,1506 1,1512 1,1517 1,1522 1,1527 1,1532	357,7 359,0 360,3 361,5 362,8 364,1 365,4 366,7 367,9 369,2	311,4 312,4 313,4 314,3 315,3 316,3 317,3 318,2 319,2 320,2
35,0 35,1 35,2 35,3 35,4 35,5 35,6 35,7 35,8 35,9	1,39031 1,39050 1,39069 1,39087 1,39106 1,39125 1,39144 1,39163 1,39181 1,39200	1,1537 1,1543 1,1548 1,1553 1,1558 1,1563 1,1568 1,1573 1,1579 1,1584	370,5 371,8 373,0 374,3 375,6 376,9 378,1 379,4 380,7 381,9	321,1 322,1 323,0 324,0 325,0 325,9 326,9 327,8 328,8 329,7
36,0 36,1 36,2 36,3 36,4 36,5 36,6 36,7 36,8 36,9	1,39219 1,39238 1,39257 1,39276 1,39295 1,39314 1,39332 1,39351 1,39370 1,39389	1,1589 1,1594 1,1599 1,1604 1,1610 1,1615 1,1620 1,1625 1,1630 1,1635	383,2 384,5 385,8 387,0 388,3 389,6 390,9 392,2 393,4 394,7	330,7 331,6 332,6 333,5 334,5 335,4 336,4 337,3 338,3 339,2
37,0 37,1 37,2 37,3 37,4 37,5 37,6 37,7 37,8 37,9	1,39408 1,39427 1,39446 1,39465 1,39484 1,39504 1,39523 1,39542 1,39561 1,39580	1,1641 1,1646 1,1651 1,1656 1,1661 1,1666 1,1672 1,1677 1,1682 1,1687	396,0 397,3 398,6 399,8 401,1 402,4 403,7 405,0 406,2 407,5	340,2 341,1 342,1 343,0 344,0 344,9 345,9 346,8 347,7 348,7
38,0 38,1 38,2 38,3 38,4 38,5 38,6 38,7 38,8 38,9	1,39599 1,39618 1,39637 1,39657 1,39676 1,39695 1,39714 1,39733 1,39753 1,39772	1,1692 1,1698 1,1703 1,1708 1,1713 1,1718 1,1723 1,1728 1,1733 1,1739	408,8 410,1 411,3 412,6 413,9 415,2 416,4 417,7 419,0 420,2	349,6 350,6 351,5 352,4 353,4 354,3 355,2 356,1 357,1 358,0
39,0 39,1 39,2 39,3 39,4 39,5 39,6 39,7 39,8 39,9	1,39791 1,39810 1,39830 1,39849 1,39869 1,39888 1,39907 1,39927 1,39946 1,39966	1,1744 1,1749 1,1754 1,1759 1,1764 1,1770 1,1775 1,1780 1,1785 1,1790	421,5 422,8 424,1 425,3 426,6 427,9 429,2 430,5 431,7 433,0	358,9 359,8 360,8 361,7 362,6 363,6 364,5 365,4 366,3 367,3
40,0 40,1 40,2 40,3 40,4 40,5 40,6 40,7 40,8 40,9	1,39985 1,40004 1,40024 1,40043 1,40063 1,40083 1,40102 1,40122 1,40141 1,40161	1,1796 1,1801 1,1806 1,1812 1,1817 1,1823 1,1828 1,1833 1,1839 1,1844	434,3 435,6 437,0 438,3 439,7 441,0 442,3 443,7 445,0 446,4	368,2 369,2 370,1 371,1 372,1 373,0 374,0 374,9 375,9 376,9
41,0 41,1 41,2 41,3 41,4 41,5 41,6 41,7 41,8 41,9	1,40180 1,40200 1,40219 1,40239 1,40259 1,40279 1,40298 1,40318 1,40338 1,40357	1,1850 1,1855 1,1860 1,1865 1,1870 1,1875 1,1881 1,1886 1,1891 1,1896	447,7 449,0 450,2 451,5 452,8 454,1 455,3 456,6 457,9 459,1	377,8 378,7 379,6 380,5 381,4 382,3 383,2 384,2 385,1 386,0
42,0 42,1 42,2 42,3 42,4 42,5 42,6 42,7 42,8 42,9	1,40377 1,40397 1,40417 1,40436 1,40456 1,40476 1,40496 1,40516 1,40535 1,40555	1,1901 1,1907 1,1912 1,1917 1,1923 1,1928 1,1934 1,1939 1,1945 1,1950	460,4 461,7 463,1 464,4 465,8 467,2 468,5 469,9 471,2 472,6	386,9 387,8 388,8 389,7 390,7 391,6 392,6 393,5 394,5 395,4
43,0 43,1 43,2 43,3 43,4 43,5 44,6 44,7 44,8 44,9	1,40775 1,40795 1,40815 1,40836 1,40856 1,40876 1,40896 1,40916 1,40937 1,40957	1,2010 1,2015 1,2021 1,2026 1,2032 1,2037 1,2042 1,2048 1,2053 1,2059	487,3 488,6 490,0 491,3 492,7 494,0 495,3 496,7 498,0 499,4	405,7 406,7 407,6 408,5 409,5 410,4 411,3 412,3 413,2 414,1
45,0 45,1 45,2 45,3 45,4 45,5 45,6 45,7 45,8 45,9	1,40977 1,40997 1,41018 1,41038 1,41058 1,41079 1,41099 1,41119 1,41139 1,41160	1,2064 1,2070 1,2076 1,2081 1,2087 1,2093 1,2098 1,2104 1,2110 1,2115	500,7 502,1 503,5 504,9 506,3 507,8 509,2 510,6 512,0 513,4	415,0 416,0 417,0 417,9 418,9 419,9 420,9 421,8 422,8 423,7
46,0 46,1 46,2 46,3 46,4 46,5 46,6 46,7 46,8 46,9	1,41180 1,41200 1,41221 1,41241 1,41262 1,41282 1,41302 1,41323 1,41343 1,41364	1,2121 1,2127 1,2132 1,2137 1,2143 1,2148 1,2154 1,2159 1,2165 1,2170	514,8 516,1 517,5 518,8 520,2 521,5 522,8 524,2 525,5 526,9	424,7 425,6 426,5 427,5 428,4 429,3 430,2 431,1 432,0 432,9
47,0 47,1 47,2 47,3 47,4 47,5 47,6 47,7 47,8 47,9	1,41384 1,41405 1,41425 1,41446 1,41466 1,41487 1,41508 1,41528 1,41549 1,41569	1,2175 1,2181 1,2187 1,2192 1,2198 1,2204 1,2210 1,2215 1,2221 1,2227	528,2 529,6 531,0 532,4 533,8 535,3 536,7 538,1 539,5 540,9	433,8 434,8 435,7 436,7 437,6 438,6 439,5 440,5 441,4 442,4
48,0 48,1 48,2 48,3 48,4 48,5 48,6 48,7 48,8 48,9	1,41590 1,41611 1,41632 1,41652 1,41673 1,41694 1,41715 1,41736 1,41756 1,41777	1,2232 1,2238 1,2243 1,2249 1,2254 1,2260 1,2265 1,2271 1,2276 1,2282	542,3 543,6 545,0 546,3 547,7 549,1 550,4 551,8 553,1 554,5	443,3 444,2 445,1 446,0 446,9 447,8 448,7 449,7 450,6 451,4
49,0 49,1 49,2 49,3 49,4 49,5 49,6 49,7 49,8 49,9	1,41798 1,41819 1,41840 1,41861 1,41882 1,41903 1,41924 1,41945 1,41966 1,41987	1,2287 1,2293 1,2298 1,2304 1,2310 1,2315 1,2321 1,2327 1,2332 1,2338	555,8 557,2 558,6 560,0 561,4 562,8 564,2 565,6 567,0 568,4	452,3 453,3 454,2 455,1 456,1 457,0 457,9 458,8 459,8 460,7
50,0 50,1 50,2 50,3 50,4 50,5 50,6 50,7 50,8 50,9	1,42008 1,42029 1,42050 1,42071 1,42092 1,42114 1,42135 1,42156 1,42177 1,42198	1,2344 1,2349 1,2355 1,2361 1,2366 1,2372 1,2378 1,2384 1,2389 1,2395	569,8 571,2 572,6 574,0 575,4 576,9 578,3 579,7 581,1 582,5	461,6 462,5 463,5 464,4 465,3 466,2 467,2 468,1 469,0 469,9
51,0 51,1 51,2 51,3 51,4 51,5 51,6 51,7 51,8 51,9	1,42219 1,42240 1,42261 1,42283 1,42304 1,42325 1,42346 1,42367 1,42389 1,42410	1,2401 1,2407 1,2413 1,2419 1,2425 1,2431 1,2437 1,2443 1,2449 1,2455	583,9 585,4 586,9 588,3 589,8 591,3 592,8 594,3 595,7 597,2	470,9 471,8 472,8 473,8 474,7 475,7 476,6 477,6 478,6 479,5
52,0 52,1 52,2 52,3 52,4 52,5 52,6 52,7 52,8 52,9	1,42431 1,42452 1,42474 1,42495 1,42517 1,42538 1,42559 1,42581 1,42602 1,42624	1,2461 1,2466 1,2472 1,2478 1,2483 1,2489 1,2495 1,2500 1,2506 1,2512	598,7 600,1 601,5 602,9 604,3 605,8 607,2 608,6 610,0 611,4	480,5 481,4 482,3 483,2 484,1 485,0 485,9 486,8 487,7 488,6
53,0 53,1 53,2 53,3 53,4 53,5 53,6 53,7 53,8 53,9	1,42645 1,42666 1,42686 1,42707 1,42727 1,42748 1,42769 1,42789 1,42810 1,42830	1,2518 1,2524 1,2530 1,2536 1,2542 1,2548 1,2554 1,2560 1,2566 1,2571	612,8 614,3 615,8 617,2 618,7 620,2 621,7 623,2 624,6 626,1	489,6 490,5 491,4 492,4 493,3 494,3 495,2 496,2 497,1 498,0
54,0 54,1 54,2 54,3 54,4 54,5 54,6 54,7 54,8 54,9	1,42851 1,42874 1,42897 1,42919 1,42942 1,42965 1,42988 1,43011 1,43033 1,43056	1,2577 1,2583 1,2589 1,2595 1,2600 1,2606 1,2612 1,2617 1,2623 1,2629	927,6 629,0 630,4 631,8 633,2 634,7 636,1 637,5 638,9 940,3	499,0 499,9 500,8 501,7 502,6 503,5 504,3 505,2 506,1 507,0
55,0 55,1 55,2 55,3 55,4 55,5 55,6 55,7 55,8 55,9	1,43079 1,43101 1,43123 1,43145 1,43167 1,43189 1,43210 1,43232 1,43254 1,43276	1,2635 1,2640 1,2643 1,2652 1,2658 1,2664 1,2670 1,2676 1,2682 1,2688	641,7 643,2 644,6 646,1 647,6 649,1 650,5 652,0 653,5 654,9	507,9 508,8 509,7 510,7 511,6 512,5 513,4 514,3 515,3 516,2
56,0 56,1 56,2 56,3 56,4 56,5 56,6 56,7 56,8 56,9	1,43298 1,43320 1,43342 1,43364 1,43386 1,43409 1,43431 1,43453 1,43475 1,43497	1,2694 1,2700 1,2706 1,2712 1,2718 1,2724 1,2730 1,2736 1,2742 1,2748	656,4 657,9 659,4 660,8 662,3 663,8 665,3 666,8 668,2 669,7	517,1 518,0 518,9 519,9 520,8 521,7 522,6 523,5 524,4 525,4
57,0 57,1 57,2 57,3 57,4 57,5 57,6 57,7 57,8 57,9	1,43519 1,43541 1,43563 1,43586 1,43608 1,43630 1,43652 1,43674 1,43697 1,43719	1,2754 1,2760 1,2766 1,2773 1,2779 1,2785 1,2791 1,2797 1,2804 1,2810	671,2 672,7 674,3 675,8 677,4 678,9 680,4 682,0 683,5 685,1	526,3 527,2 528,2 529,1 530,1 531,0 532,0 532,9 533,8 534,8
58,0 58,1 58,2 58,3 58,4 58,5 58,6 58,7 58,8 58,9	1,43741 1,43763 1,43786 1,43808 1,43831 1,43854 1,43876 1,43899 1,43921 1,43944	1,2816 1,2822 1,2828 1,2834 1,2840 1,2846 1,2852 1,2858 1,2864 1,2870	686,6 688,1 689,6 691,0 692,5 694,0 695,5 697,0 698,4 699,9	535,7 536,6 537,5 538,4 539,3 540,2 541,1 542,0 542,9 543,8
59,0 59,1 59,2 59,3 59,4 59,5 59,6 59,7 59,8 59,9	1,43966 1,43989 1,44011 1,44034 1,44056 1,44079 1,44102 1,44124 1,44147 1,44169	1,2876 1,2882 1,2888 1,2895 1,2901 1,2907 1,2913 1,2920 1,2926 1,2932	701,4 702,9 704,5 706,0 707,6 709,1 710,6 712,2 713,7 715,3	544,7 545,7 546,6 547,5 548,5 549,4 550,3 551,2 552,2 553,1
60,0 60,1 60,2 60,3 60,4 60,5 60,6 60,7 60,8 60,9	1,44192 1,44215 1,44237 1,44260 1,44283 1,44306 1,44328 1,44351 1,44374 1,44396	1,2938 1,2944 1,2950 1,2956 1,2962 1,2968 1,2974 1,2980 1,2986 1,2992	716,8 718,3 719,8 721,2 722,7 724,2 725,7 727,2 728,6 730,1	554,0 554,9 555,8 556,7 557,6 558,4 559,3 560,2 561,1 562,0
61,0 61,1 61,2 61,3 61,4 61,5 61,6 61,7 61,8 61,9	1,44419 1,44442 1,44465 1,44488 1,44511 1,44533 1,44556 1,44579 1,44602 1,44625	1,2998 1,3004 1,3011 1,3017 1,3023 1,3030 1,3036 1,3042 1,3048 1,3055	731,6 733,1 734,7 736,2 737,8 739,4 740,9 742,5 744,0 745,6	562,8 563,8 564,7 565,6 566,5 567,4 568,4 569,3 570,2 571,1
62,0 62,1 62,2 62,3 62,4 62,5 62,6 62,7 62,8 62,9	1,44648 1,44671 1,44694 1,44717 1,44740 1,44764 1,44787 1,44810 1,44833 1,44856	1,3061 1,3067 1,3073 1,3080 1,3086 1,3092 1,3098 1,3104 1,3111 1,3117	747,1 748,6 750,2 751,7 753,3 754,8 756,3 757,9 759,4 761,0	572,0 572,9 573,8 574,7 575,6 576,5 577,4 578,3 579,2 580,1
63,0 63,1 63,2 63,3 63,4 63,5 63,6 63,7 63,8 63,9	1,44879 1,44902 1,44926 1,44949 1,44972 1,44996 1,45019 1,45042 1,45065 1,45089	1,3123 1,3130 1,3136 1,3143 1,3149 1,3156 1,3162 1,3169 1,3175 1,3182	762,5 764,1 765,7 767,3 768,9 770,6 772,2 773,8 775,4 777,0	581,0 582,0 582,9 583,8 584,8 585,7 586,6 587,6 588,5 589,4
64,0 64,1 64,2 64,3 64,4 64,5 64,6 64,7 64,8 64,9	1,45112 1,45135 1,45159 1,45183 1,45206 1,45230 1,45253 1,45276 1,45300 1,45324	1,3188 1,3195 1,3201 1,3207 1,3213 1,3219 1,3226 1,3232 1,3238 1,3244	778,6 780,1 781,7 783,2 784,8 786,3 787,8 789,4 790,9 792,5	590,4 591,3 592,1 593,0 593,9 594,8 595,7 596,6 597,5 598,3
65,0 65,1 65,2 65,3 65,4 65,5 65,6 65,7 65,8 65,9	1,45347 1,45371 1,45394 1,45418 1,45441 1,45465 1,45489 1,45512 1,45536 1,45559	1,3251 1,3257 1,3264 1,3270 1,3277 1,3283 1,3290 1,3296 1,3303 1,3309	794,0 795,6 797,2 798,8 800,4 802,1 803,7 805,3 806,9 808,5	599,2 600,1 601,1 602,0 602,9 603,8 604,7 605,6 606,6 607,5
66,0 66,1 66,2 66,3 66,4 66,5 66,6 66,7 66,8 66,9	1,45583 1,45607 1,45630 1,45654 1,45678 1,45702 1,45725 1,45749 1,45773 1,45796	1,3316 1,3322 1,3328 1,3335 1,3341 1,3347 1,3353 1,3360 1,3366 1,3372	810,1 811,6 813,2 814,8 816,3 817,9 819,4 820,9 822,5 824,1	608,4 609,3 610,1 611,0 611,9 612,8 613,6 614,5 615,4 616,2
67,0 67,1 67,2 67,3 67,4 67,5 67,6 67,7 67,8 67,9	1,45820 1,45844 1,45868 1,45892 1,45916 1,45940 1,45964 1,45988 1,46012 1,46036	1,3378 1,3385 1,3391 1,3398 1,3404 1,3411 1,3418 1,3424 1,3431 1,3437	825,6 827,2 828,8 830,4 832,0 833,7 835,3 836,9 838,5 840,1	617,1 618,0 618,9 619,8 620,7 621,6 622,5 623,4 624,3 625,2
68,0 68,1 68,2 68,3 68,4 68,5 68,6 68,7 68,8 68,9	1,46060 1,46084 1,46108 1,46132 1,46156 1,46181 1,46205 1,46229 1,46253 1,46277	1,3444 1,3450 1,3457 1,3464 1,3471 1,3478 1,3484 1,3491 1,3498 1,3505	841,7 843,4 845,1 846,7 848,4 850,1 851,8 853,5 855,1 856,8	626,1 627,0 628,0 628,9 629,8 630,8 631,7 632,6 633,5 634,5
69,0 69,1 69,2 69,3 69,4 69,5 69,6 69,7 69,8 69,9	1,46301 1,46325 1,46350 1,46374 1,46398 1,46423 1,46447 1,46471 1,46495 1,46520	1,3512 1,3518 1,3525 1,3531 1,3538 1,3544 1,3551 1,3557 1,3564 1,3570	858,5 860,1 861,7 863,3 864,9 866,6 868,2 869,8 871,4 873,0	635,4 636,3 637,2 638,0 638,9 639,8 640,7 641,6 642,4 643,3
70,0 70,1 70,2 70,3 70,4 70,5 70,6 70,7 70,8 70,9	1,46544 1,46568 1,46593 1,46618 1,46642 1,46667 1,46691 1,46715 1,46740 1,46765	1,3577 1,3583 1,3590 1,3596 1,3603 1,3609 1,3616 1,2622 1,3629 1,3635	874,6 876,2 877,8 879,4 881,0 882,7 884,3 885,9 887,5 889,1	644,2 645,1 645,9 646,8 647,7 648,6 649,4 650,3 651,2 652,1
71,0 71,1 71,2 71,3 71,4 71,5 71,6 71,7 71,8 71,9	1,46789 1,46814 1,46838 1,46863 1,46888 1,46913 1,46937 1,46962 1,46987 1,47011	1,3642 1,3649 1,3655 1,3662 1,3669 1,3676 1,3683 1,3689 1,3696 1,3703	890,7 892,4 894,1 895,7 897,4 899,1 900,8 902,5 904,1 905,8	652,9 653,8 654,7 655,6 656,5 657,4 658,3 659,2 660,1 661,0
72,0 72,1 72,2 72,3 72,4 72,5 72,6 72,7 72,8 72,9	1,47036 1,47061 1,47086 1,47110 1,47135 1,47160 1,47185 1,47210 1,47234 1,47259	1,3710 1,3717 1,3723 1,3730 1,3737 1,3744 1,3750 1,3757 1,3764 1,3771	907,5 909,2 910,8 912,5 914,2 915,9 917,5 919,2 920,9 922,5	661,9 662,8 663,7 664,6 665,5 666,4 667,3 668,2 669,0 669,9
73,0 73,1 73,2 73,3 73,4 73,5 73,6 73,7 73,8 73,9	1,47284 1,47309 1,47334 1,47359 1,47384 1,47409 1,47434 1,47459 1,47484 1,47509	1,3777 1,3784 1,3791 1,3798 1,3804 1,3811 1,3818 1,3825 1,3832 1,3838	924,2 925,9 927,6 929,2 930,9 932,6 934,3 936,0 937,6 939,3	670,8 671,7 672,6 673,5 674,4 675,2 676,1 677,0 677,9 678,8
74,0 74,1 74,2 74,3 74,4 74,5 74,6 74,7 74,8 74,9	1,47534 1,47559 1,47584 1,47609 1,47634 1,47660 1,47685 1,47710 1,47735 1,47760	1,3845 1,3852 1,3859 1,3866 1,3872 1,3879 1,3886 1,3893 1,3900 1,3906	941,0 942,7 944,4 946,0 947,7 949,4 951,1 952,8 954,4 956,1	679,7 680,5 681,4 682,3 683,2 684,0 684,9 685,8 686,7 687,5

2.3 lentelė. Cukrų kiekis vynuogių cukruje, išreikštas invertuotu cukrumi ir nustatytas refraktometru, kurio skalė sugraduota cukraus masės vnt. arba lūžio rodiklio vnt.

Sacharozė, % (m/m)	Lūžio rodiklis	Tankis	Cukrus
	20 ^°С		G/dm^3	g/kg
50,0 50,1 50,2 50,3 50,4 50,5 50,6 50,7 50,8 50,9	1,42008 1,42029 1,42050 1,42071 1,42092 1,42113 1,42135 1,42156 1,42177 1,42198	1,2342 1,2348 1,2355 1,2362 1,2367 1,2374 1,2381 1,2386 1,2391 1,2396	627,6 629,3 630,9 632,4 634,1 635,7 637,3 638,7 640,4 641,9	508,5 509,6 510,6 511,6 512,7 513,7 514,7 515,7 516,8 517,8
51,0 51,1 51,2 51,3 51,4 51,5 51,6 51,7 51,8 51,9	1,42219 1,42240 1,42261 1,42282 1,42304 1,42325 1,42347 1,42368 1,42389 1,42410	1,2401 1,2406 1,2411 1,2416 1,2421 1,2427 1,2434 1,2441 1,2447 1,2454	643,4 645,0 646,5 648,1 649,6 651,2 652,9 654,5 656,1 657,8	518,8 519,9 520,9 522,0 523,0 524,0 525,1 526,1 527,1 528,2
52,0 52,1 52,2 52,3 52,4 52,5 52,6 52,7 52,8 52,9	1,42432 1,42453 1,42475 1,42496 1,42517 1,42538 1,42560 1,42581 1,42603 1,42624	1,2461 1,2466 1,2470 1,2475 1,2480 1,2486 1,2493 1,2500 1,2506 1,2513	659,4 661,0 662,5 664,1 665,6 667,2 668,9 970,5 672,2 673,8	529,2 530,2 531,3 532,3 533,3 534,4 535,4 536,4 537,5 538,5
53,0 53,1 53,1 53,3 53,4 53,5 53,6 53,7 53,8 53,9	1,42645 1,42667 1,42689 1,42711 1,42733 1,42754 1,42776 1,42797 1,42819 1,42840	1,2520 1,2525 1,2530 1,2535 1,2540 1,2546 1,2553 1,2560 1,2566 1,2573	675,5 677,1 678,5 680,2 681,8 683,4 685,1 686,7 688,4 690,1	539,5 540,6 541,5 542,6 543,7 544,7 545,8 546,7 547,8 548,9
54,0 54,1 54,2 54,3 54,4 54,5 54,6 54,7 54,8 54,9	1,42861 1,42884 1,42906 1,42927 1,42949 1,42971 1,42993 1,43014 1,43036 1,43058	1,2580 1,2585 1,2590 1,2595 1,2600 1,2606 1,2613 1,2620 1,2625 1,2630	691,7 693,3 694,9 696,5 698,1 699,7 701,4 703,1 704,7 706,2	549,8 550,9 551,9 553,0 554,0 555,1 556,1 557,1 558,2 559,1
55,0 55,1 55,2 55,3 55,4 55,5 55,6 55,7 55,8 55,9	1,43079 1,43102 1,43124 1,43146 1,43168 1,43189 1,43211 1,43233 1,43255 1,43277	1,2635 1,2639 1,2645 1,2652 1,2659 1,2665 1,2672 1,2679 1,2685 1,2692	707,8 709,4 711,0 712,7 714,4 716,1 717,8 719,5 721,1 722,8	560,2 561,3 562,3 563,3 564,3 565,4 566,4 567,5 568,5 569,5
56,0 56,1 56,2 56,3 56,4 56,5 56,6 56,7 56,8 56,9	1,43298 1,43321 1,43343 1,43365 1,43387 1,43409 1,43431 1,43454 1,43476 1,43498	1,2699 1,2703 1,2708 1,2713 1,2718 1,2724 1,2731 1,2738 1,2744 1,2751	724,5 726,1 727,7 729,3 730,9 732,6 734,3 736,0 737,6 739,4	570,5 571,6 572,6 573,7 574,7 575,8 576,8 577,8 578,8 579,9
57,0 57,1 57,2 57,3 57,4 57,5 57,6 57,7 57,8 57,9	1,43519 1,43542 1,43564 1,43586 1,43609 1,43631 1,43653 1,43675 1,43698 1,43720	1,2758 1,2763 1,2768 1,2773 1,2778 1,2784 1,2791 1,2798 1,2804 1,2810	741,1 742,8 744,4 745,9 747,6 749,3 751,0 752,7 754,4 756,1	580,9 582,0 583,0 584,0 585,1 586,1 587,1 588,1 589,2 590,2
58,0 58,1 58,2 58,3 58,4 58,5 58,6 58,7 58,8 58,9	1,43741 1,43764 1,43784 1,43809 1,43832 1,43854 1,43877 1,43899 1,43922 1,43944	1,2818 1,2822 1,2827 1,2832 1,2837 1,2843 1,2850 1,2857 1,2863 1,2869	757,8 759,5 761,1 762,6 764,3 766,0 767,8 769,5 771,1 772,9	591,2 592,3 593,4 594,3 595,4 596,4 597,5 598,5 599,5 600,6
59,0 59,1 59,2 59,3 59,4 59,5 59,6 59,7 59,8 59,9	1,43966 1,43988 1,44011 1,44034 1,44057 1,44079 1,44102 1,44124 1,44147 1,44169	1,2876 1,2882 1,2889 1,2896 1,2902 1,2909 1,2916 1,2921 1,2926 1,2931	774,6 776,3 778,1 779,8 781,6 783,3 785,2 786,8 788,4 790,0	601,6 602,6 603,7 604,7 605,8 606,8 607,9 608,9 609,9 610,9
60,0 60,1 60,2 60,3 60,4 60,5 60,6 60,7 60,8 60,9	1,44192 1,44215 1,44238 1,44260 1,44283 1,44305 1,44328 1,44351 1,44374 1,44397	1,2936 1,2942 1,2949 1,2956 1,2962 1,2969 1,2976 1,2981 1,2986 1,2991	791,7 793,3 795,2 796,9 798,6 800,5 802,2 803,9 805,5 807,1	612,0 613,0 614,1 615,1 616,1 617,2 618,2 619,3 620,3 621,3
61,0 61,1 61,2 61,3 61,4 61,5 61,6 61,7 61,8 61,9	1,44419 1,44442 1,44465 1,44488 1,44511 1,44534 1,44557 1,44580 1,44603 1,44626	1,2996 1,3002 1,3009 1,3016 1,3022 1,3029 1,3036 1,3042 1,3042 1,3056	808,7 810,5 812,3 814,2 815,8 817,7 819,4 821,3 823,0 824,8	622,3 623,4 624,4 625,5 626,5 627,6 628,6 629,7 630,7 631,7
62,0 62,1 62,2 62,3 62,4 62,5 62,6 62,7 62,8 62,9	1,44648 1,44672 1,44695 1,44718 1,44741 1,44764 1,44787 1,44810 1,44833 1,44856	1,3062 1,3068 1,3075 1,3080 1,3085 1,3090 1,3095 1,3101 1,3108 1,3115	826,6 828,3 830,0 831,8 833,4 835,1 836,8 838,5 840,2 842,1	632,8 633,8 634,8 635,9 636,9 638,0 639,0 640,0 641,0 642,1
63,0 63,1 63,2 63,3 63,4 63,5 63,6 63,7 63,8 63,9	1,44879 1,44902 1,44926 1,44949 1,44972 1,44995 1,45019 1,45042 1,45065 1,45088	1,3121 1,3128 1,3135 1,3141 1,3148 1,3155 1,3161 1,3168 1,3175 1,3180	843,8 845,7 847,5 849,3 851,1 853,0 854,7 856,5 858,4 860,0	643,1 644,2 645,2 646,3 647,3 648,4 649,4 650,4 651,5 652,5
64,0 64,1 64,2 64,3 64,4 64,5 64,6 64,7 64,8 64,9	1,45112 1,45135 1,45158 1,45181 1,45205 1,45228 1,45252 1,45275 1,45299 1,45322	1,3185 1,3190 1,3195 1,3201 1,3208 1,3215 1,3221 1,3228 1,3235 1,3241	861,6 863,4 865,1 866,9 868,7 870,6 872,3 874,1 876,0 877,8	653,5 654,6 655,6 656,7 657,7 658,8 659,8 660,8 661,9 662,9
65,0 65,1 65,2 65,3 65,4 65,5 65,6 65,7 65,8 65,9	1,45347 1,45369 1,45393 1,45416 1,45440 1,45463 1,45487 1,45510 1,45534 1,45557	1,3248 1,3255 1,3261 1,3268 1,3275 1,3281 1,3288 1,3295 1,3301 1,3308	879,7 881,5 883,2 885,0 886,9 888,8 890,6 892,4 894,2 896,0	664,0 665,0 666,0 667,0 668,1 669,2 670,2 671,2 672,3 673,3
66,0 66,1 66,2 66,3 66,4 66,5 66,6 66,7 66,8 66,9	1,45583 1,45605 1,45629 1,45652 1,45676 1,45700 1,45724 1,45747 1,45771 1,45795	1,3315 1,3320 1,3325 1,3330 1,3335 1,3341 1,3348 1,3355 1,3361 1,3367	898,0 899,6 901,3 903,1 904,8 906,7 908,5 910,4 912,2 913,9	674,4 675,4 676,4 677,5 678,5 679,6 680,6 681,7 682,7 683,7
67,0 67,1 67,2 67,3 67,4 67,5 67,6 67,7 67,8 67,9	1,45820 1,45843 1,45867 1,45890 1,45914 1,45938 1,45962 1,45986 1,46010 1,46034	1,3374 1,3380 1,3387 1,3395 1,3400 1,3407 1,3415 1,3420 1,3427 1,3434	915,9 917,6 919,6 921,4 923,1 925,1 927,0 928,8 930,6 932,6	684,8 685,8 686,9 687,9 688,9 690,0 691,0 692,1 693,1 694,2
68,0 68,1 68,2 68,3 68,4 68,5 68,6 68,7 68,8 68,9	1,46060 1,46082 1,46106 1,46130 1,46154 1,46178 1,46202 1,46226 1,46251 1,46275	1,3440 1,3447 1,3454 1,3460 1,3466 1,3473 1,3479 1,3486 1,3493 1,3499	934,4 936,2 938,0 939,9 941,8 943,7 945,4 947,4 949,2 951,1	695,2 696,2 697,2 698,3 699,4 700,4 701,4 702,5 703,5 704,6
69,0 69,1 69,2 69,3 69,4 69,5 69,6 69,7 69,8 69,9	1,46301 1,46323 1,46347 1,46371 1,46396 1,46420 1,46444 1,46468 1,46493 1,46517	1,3506 1,3513 1,3519 1,3526 1,3533 1,3539 1,3546 1,3553 1,3560 1,3566	953,0 954,8 956,7 958,6 960,6 962,4 964,3 966,2 968,2 970,0	705,6 706,6 707,7 708,7 709,8 710,8 711,9 712,9 714,0 715,0
70,0 70,1 70,2 70,3 70,4 70,5 70,6 70,7 70,8 70,9	1,46544 1,46565 1,46590 1,46614 1,46639 1,46663 1,46688 1,46712 1,46737 1,46761	1,3573 1,3579 1,3586 1,3593 1,3599 1,3606 1,3613 1,3619 1,3626 1,3633	971,8 973,8 975,6 977,6 979,4 981,3 983,3 985,2 987,1 988,9	716,0 717,1 718,1 719,2 720,2 721,2 722,3 723,4 724,4 725,4
71,0 71,1 71,2 71,3 71,4 71,5 71,6 71,7 71,8 71,9	1,46789 1,46810 1,46835 1,46859 1,46884 1,46908 1,46933 1,46957 1,46982 1,47007	1,3639 1,3646 1,3653 1,3659 1,3665 1,3672 1,3678 1,3685 1,3692 1,3698	990,9 992,8 994,8 996,6 998,5 1000,4 1002.2 1004,2 1006,1 1008,0	726,5 727,5 728,6 729,6 730,7 731,7 732,7 733,8 734,8 735,9
72,0 72,1 72,2 72,3 72,4 72,5 72,6 72,7 72,8 72,9	1,47036 1,47056 1,47081 1,47106 1,47131 1,47155 1,47180 1,47205 1,47230 1,47254	1,3705 1,3712 1,3718 1,3725 1,3732 1,3738 1,3745 1,3752 1,3758 1,3765	1009,9 1012,0 1013,8 1015,7 1017,7 1019,5 1021,5 1023,4 1025,4 1027,3	736,9 738,0 739,0 740,0 741,1 742,1 743,2 744,2 745,3 746,3
73,0 73,1 73,2 73,3 73,4 73,5 73,6 73,7 73,8 73,9	1,47284 1,47304 1,47329 1,47354 1,47379 1,47404 1,47429 1,47454 1,47479 1,47504	1,3772 1,3778 1,3785 1,3792 1,3798 1,3805 1,3812 1,3818 1,3825 1,3832	1029,3 1031,2 1033,2 1035,1 1037,1 1039,0 1040,9 1042,8 1044,8 1046,8	747,4 748,4 749,5 750,5 751,6 752,6 753,6 754,7 755,7 756,8
74,0 74,1 74,2 74,3 74,4 74,5 74,6 74,7 74,8 74,9 75,0	1,47534 1,47554 1,47579 1,47604 1,47629 1,47654 1,47679 1,47704 1,47730 1,47755 1,47785	1,3838 1,3845 1,3852 1,3858 1,3865 1,3871 1,3878 1,3885 1,3892 1,3898 1,3905	1048,6 1050,7 1052,6 1054,6 1056,5 1058,5 1060,4 1062,3 1064,4 1066,3 1068,3	757,8 758,9 759,9 761,0 762,0 763,1 764,1 765,1 766,2 767,2 768,3

3. Etilo alkoholio koncentracijos tūrio proc. nustatymo metodai

3.1 Apibrėžimas

Etilo alkoholio koncentracija tūrio proc. - tai etilo alkoholio koncentracija, dm³, esantis 100 dm³ vyno. Šis dydis yra nustatomas 20 °C temperatūroje ir išreiškiamas procentais.

PASTABA. Etilo alkoholio homologai ir jų esteriai, jeigu tokių yra distiliate, taip pat nustatomi analizės metu;

3.2. Metodų esmė:

3.2.1. Vynas yra pašarminamas kalcio hidroksido suspensija ir distiliuojamas. Etilo alkoholio koncentracija tūrio % yra nustatomas distiliate;

3.2.2. Pamatinis metodas - distiliato tankio nustatymas piknometru;

3.2.3. Įprastiniai metodai:

3.2.3.1. Alkoholio kkoncentracija tūrio % distiliate yra nustatomas areometru;

3.2.3.2. Alkoholio koncentracija tūrio % distiliate yra nustatomas pagal santykinį tankį (densimetrija) hidrostatinėmis svarstyklėmis;

3.2.3.3. Alkoholio koncentracija tūrio % distiliate yra nustatomas refraktometru.

PASTABA. Norint alkoholio tūrio kiekį išreikšti distiliato tūrio mase, pasinaudojama 3.1, 3.2, ir 3.3, lentelėmis;

3.3. Distiliato paruošimas:

3.3.1. Reagentai

2M kalcio hidroksido suspensija, kuri gaunama atsargiai pilant 1 dm³ 60–70 °C temperatūros vanadens ant 120 g negesintų kalkių (CaO)

3.3.2. Įranga ir priemonės:

3.3.2.1. Distiliavimo aparatas, sudarytas iš 1 dm³ talpos apvaliadugnės kolbos su šlifo kaklu, 20 cm aukščio rektifikavimo kolonos ar kitos apsaugančios nuo nuostolių priemonės, kaitinimo įtaiso, kurį naudojant vynas nepridega, kondensatoriaus su siauru galu, beveik siekiančiu kolbos dugną, tačiau jo neliečiančio. Į kolbą įpilami keli kubiniai centimetrai vandens;

3.3.2.2. Distiliavimo vandens garais aparatas, sudarytas iš vandens garų generatoriaus, garų maišytuvo, rektifikavimo kolonėlės ir kondensatoriaus.

PASTABA. Gali būti naudojamas bet kuris distiliavimo aparatas, jeigu jis tenkina žemiau aprašyto bandymo reikalavimus. Penkis kartus nudistiliavus 10 tūrio % koncentracijos vandeninį alkoholio tirpalą, etilo alkoholio distiliate turi būti ne mažiau kaip 10 %, t. y. jo nuostoliai neturi viršyti 0,02 tūrio % etilo alkoholio vienos distiliacijos metu;

3.3.3. Mėginio paruošimas

Iš jaunų ir putojančių vynų pašalinamas anglies dioksidas: 250-300 cm³ vyno purtoma 0,5 dm³ talpos kolboje;

3.3.4. Analizė

Matavimo kolba pamatuojama 200 cm³ vyno ir užrašoma jo temperatūra. Vynas perpilamas į distiliavimo kolbą arba į distiliavimo vandens garais aparato garų maišytuvą. Matavimo kolba skalaujama 5 kartus imant po 5 cm³ vandens, kuris po kiekvieno karto supilamas į distiliavimo kolbą ar garų maišytuvą. Įpilama 10 cm³ 2M kalcio hidroksido ir įdedama keli gabalėliai poringos inertiškos medžiagos (pemzos, marmuro), jeigu distiliuojama tiesiai iš kolbos (be garų).

Distiliatui surinkti naudojama ta pati 200 cm³ vyno mėginio matavimo kolba. Distiliavimas tęsiamas tol, kol distiliatu užsipildo apie 75% kolbos turinio, kai distiliuojama tiesiogiai, ir 198-199 cm³, kai distiliuojama vandens garais. Matavimo kolbos turinys praskiedžiamas distiliuotu vandeniu iki žymės. Distiliato temperatūra turi būti lygi ±2 °C, analizei paimto vyno temperatūrai. Atsargiai sukamuoju judesiu distiliatas sumaišomas.

PASTABA. Vynas, kuriame ypač daug amonio jonų, pakartotinai distiliuojamas tokiu pat būdu, tik kalcio hidroksido suspensija pakeičiama 1 cm³ 10 tūrio % koncentracijos sieros rūgštimi;

3.4. Pamatinis metodas:

3.4.1. Įranga ir priemonės

Piknometrai turi būti paruošti ir sukalibruoti pagal 1 skyriaus aprašymą;

3.4.2. Analizė

Distiliato tankis nustatomas, kaip aprašyta 1.5.1. ir 1.5.2. p., ir išreiškiamas r_t;

3.4.3. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška:

3.4.3.1. 3.1 lentelėje randamas etilo alkoholio koncentracija 20 °C temperatūroje. Lentelės eilutėje prieš atitinkamą temperatūros vertę t (išmatuotoji temperatūra prilyginama artimiausiai mažesnei temperatūros vertei lentelėje) randama tankio vertė, mažiausiai viršijanti r_t. Skirtumas, kuris pateikiamas žemiau rastosios tankio vertės, vartojamas tankiui r analizės temperatūroje apskaičiuoti. Temperatūros eilutėje randamas skirtumas tarp tankio r’ vertės lentelėje (mažiausiai viršijančios r vertę) ir apskaičiuotosios tankio vertės. Gautasis skirtumas dalijamas iš skaičiaus, kuris yra tankio r’ vertės dešinėje. Dalijimo metu gauti skaičiai po kablelio parodys dešimtąsias etilo alkoholio koncentarcijos dalis, o sveikasis skaičius yra nurodytas eilutės, kurioje įrašytos tankio r’ vertės, viršuje.

PASTABA. Temperatūros pataisos prireikus daromos automatiškai;

3.4.3.2. Pakartojamumas

r = 0,10 tūrio %;

3.4.3.3. Atkuriamumas

R = 0,19 tūrio %;

3.5. Įprastiniai analizės metodai:

3.5.1. Areometrinis metodas:

3.5.1.1. Įranga ir priemonės:

3.5.1.1.1. Spiritometras, kuris turi tenkinti I arba II klasės prietaisų reikalavimus, išdėstytus „Tarptautinėse rekomendacijose“ Nr. 44 „Spiritometrai ir areometrai“, etilo alkoholiui [Tarptautinė teisinė metrologijos organizacija (International Organization Of Legal Metrology)];

3.5.1.1.2. Termometrai, kurių matavimo diapazonas nuo 0 iki 40 °C, o matavimo padalos vertė 0,1 °C ir kurie yra patikrinti 20 °C temperatūroje 0,05 °C tikslumu;

3.5.1.1.3. 36 mm vidinio skersmens ir 320 mm aukščio cilindras, vertikaliai įtvirtintas stove specialiais varžtais;

3.5.1.2. Analizė

Distiliatas supilamas į cilindrą, laikomą vertikaliojoje padėtyje. Įmerkiamas termometras ir spiritometras. Užrašoma jų temperatūra. Po 1 min., kai cilindro, termometro, spiritometro ir distiliato temperatūros susilygina, užrašoma jų temperatūra. Termometras išimamas ir po 1 min užrašomi spiritometro rodmenys. Spiritometro rodmenys užrašomi ne mažiau kaip 3 kartus (naudojamasi didinamuoju stiklu) ir pakoreguojami įvertinant faktinės temperatūros pataisą pagal 3.2 lentelę. Labai svarbu, kad skysčio temperatūra nedaug skirtųsi nuo aplinkos temperatūros (ne daugiau kaip 5 °C);

3.5.2. Densimetrinis hidrostatinių svarstyklių metodas:

3.5.2.1. Įranga ir priemonės

Hidrostatinės svarstyklės, naudojamos pagal 1 skyriaus aprašymą;

3.5.2.2. Analizė

Tankis esamoje temperatūroje nustatomas pagal 1.6.2. p;

3.5.2.3. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška

Etilo alkoholio koncentracija 20 °C temperatūroje nustatomas pagal 3.4.3 p., naudojantis 3.1 lentele, jeigu plūdė pagaminta iš karščiui atsparaus stiklo, arba 3.3 lentele, jeigu plūdė pagaminta iš paprasto stiklo;

3.5.3. Refraktometrinis metodas:

3.5.3.1. Įranga ir priemonės

Refraktometras, kuriuo galima išmatuoti lūžio rodiklį 1,330-1,346 diapazone. Pagal prietaiso rūšį matuojama arba 20 °C temperatūroje, naudojant termostatavimo įtaisą, arba aplinkos temperatūroje, kurią reikia išmatuoti termometru, kurio matavimo paklaida yra ne didesnė kaip 0,05 °C. Temperatūros pataisų lentelė turi būti kartu su prietaisu;

3.5.3.2. Analizė

Vyno distiliato lūžio rodiklis nustatomas pagal prietaiso instrukciją;

3.5.3.3. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška

Etilo alkoholio tūrio masė randama 3.4 lentelėje pagal išmatuotą lūžio rodiklį 20 °C temperatūroje;

3.1 lentelė. Tikrojo vandens ir etilo alkoholio mišinių tankio temperatūroje t, °C, nustatymas piknometru, pagamintu iš pirekso stiklo (su pataisa išstumtam orui)

t,^0C	Etilo alkoholio koncentracija, tūrio %
	0		1		2		3		4		5
0	999,64	1,50	998,14	1,44	996,70	1,40	995,30	1,35	993,95	1,30	992,65	1,24
1 2 3 4	-0,07 999,71 -0,05 999,76 -0,03 999,79 -0,02 999,81 0,00	1,51 1,51 1,51 1,51	-0,06 998,20 -0,05 998,25 -0,03 998,28 -0,02 998,30 0,00	1,44 1,45 1,45 1,46	-0,06 996,76 -0,04 996,80 -0,03 996,83 -0,01 996,84 0,00	1,40 1,40 1,41 1,40	-0,06 995,36 -0,04 995,40 -0,02 995,42 -0,02 995,44 0,00	1,35 1,35 1,35 1,36	-0,06 994,01 -0,04 994,05 -0,02 994,07 -0,01 994,08 0,01	1,30 1,30 1,30 1,30	-0,06 992,71 -0,04 992,75 -0,02 992,77 -0,01 992,78 0,02	1,24 1,25 1,25 1,26
5	999,81	1,51	998,30	1,46	996,84	1,40	995,44	1,37	994,07	1,31	992,76	1,26
6 7 8 9	0,01 999,80 0,03 999,77 0,05 999,72 0,05 999,67 0,07	1,51 1,51 1,50 1,51	0,01 998,29 0,03 998,26 0,04 998,22 0,06 998,16 0,07	1,46 1,46 1,46 1,46	0,01 996,83 0,03 996,80 0,04 996,76 0,06 996,70 0,07	1,41 1,41 1,42 1,42	0,02 995,42 0,03 995,39 0,05 995,34 0,06 995,28 0,07	1,36 1,37 1,37 1,37	0,01 994,06 0,04 994,02 0,05 993,97 0,06 993,91 0,07	1,32 1,32 1,32 1,32	0,02 992,74 0,04 992,70 0,05 992,65 0,06 992,59 0,08	1,27 1,27 1,27 1,28
10	999,60	1,51	998,09	1,46	996,63	1,42	995,21	1,37	993,84	1,33	992,51	1,28
11 12 13 14	0,09 999,51 0,10 999,41 0,11 999,30 0,12 999,18 0,13	1,51 1,50 1,50 1,50	0,09 998,00 0,09 997,91 0,11 997,80 0,12 997,68 0,14	1,46 1,46 1,46 1,46	0,09 996,54 0,09 996,45 0,11 996,34 0,12 996,22 0,14	1,41 1,42 1,42 1,43	0,08 995,13 0,10 995,03 0,11 994,92 0,13 994,79 0,13	1,38 1,38 1,38 1,38	0,09 993,75 0,10 993,65 0,11 993,54 0,13 993,41 0,13	1,33 1,34 1,34 1,34	0,09 992,42 0,11 992,31 0,11 992,20 0,13 992,07 0,14	1,29 1,29 1,30 1,30
15	999,05	1,51	997,54	1,46	996,08	1,42	994,66	1,38	993,28	1,35	991,93	1,30
16 17 18 19	0,15 998,90 0,16 998,74 0,17 998,57 0,18 998,39 0,19	1,50 1,50 1,50 1,50	0,14 997,40 0,16 997,24 0,17 997,07 0,18 996,89 0,19	1,46 1,46 1,46 1,46	0,14 995,94 0,16 995,78 0,17 995,61 0,18 995,43 0,19	1,43 1,43 1,42 1,43	0,15 994,51 0,16 994,35 0,16 994,19 0,19 994,00 0,19	1,38 1,38 1,39 1,39	0,15 993,13 0,16 992,97 0,17 992,80 0,19 992,61 0,19	1,35 1,36 1,36 1,36	0,15 991,78 0,17 991,61 0,17 991,44 0,19 991,25 0,19	1,31 1,31 1,32 1,32
20	998,20	1,50	996,70	1,46	995,24	1,43	993,81	1,39	992,42	1,36	991,06	1,33

3.1 lentelės tęsinys

t,^0C	Etilo alkoholio koncentracija, tūrio %
	6		7		8		9		10		11
0	991,41	1,19	990,22	1,14	989,08	1,10	987,98	1,05	986,93	1,00	985,93	0,95
1 2 3 4	-0,06 991,47 -0,03 991,50 -0,02 991,52 0,00 991,52 0,02	1,20 1,20 1,21 1,21	-0,05 990,27 -0,03 990,30 -0,01 990,31 0,00 990,31 0,02	1,15 1,16 1,16 1,17	-0,04 989,12 -0,02 989,14 -0,01 989,15 0,01 989,14 0,02	1,11 1,11 1,12 1,13	-0,03 988,01 -0,02 988,03 0,00 988,03 0,02 988,01 0,03	1,06 1,07 1,08 1,09	-0,02 986,95 -0,01 986,96 0,01 986,95 0,03 986,92 0,04	1,01 1,02 1,03 1,04	-0,01 985,94 0,00 985,94 0,02 985,92 0,04 985,88 0,05	0,97 0,98 1,00 1,00
5	991,50	1,21	990,29	1,17	989,12	1,14	987,98	1,10	986,88	1,05	985,83	1,01
6 7 8 9	0,03 991,47 0,04 991,43 0,05 991,38 0,07 991,31 0,08	1,22 1,23 1,24 1,24	0,04 990,25 0,05 990,20 0,06 990,14 0,07 990,07 0,09	1,18 1,19 1,19 1,20	0,05 989,07 0,06 989,01 0,06 988,95 0,08 988,87 0,09	1,14 1,15 1,16 1,17	0,05 987,93 0,07 987,86 0,07 987,79 0,09 987,70 0,10	1,10 1,11 1,12 1,13	0,05 986,83 0,08 986,75 0,08 986,67 0,10 986,57 0,11	1,06 1,07 1,08 1,09	0,06 985,77 0,09 985,68 0,09 985,59 0,11 985,48 0,12	1,03 1,03 1,05 1,06
10	991,23	1,25	989,98	1,20	988,78	1,17	987,60	1,14	986,46	1,10	985,36	1,06
11 12 13 14	0,10 991,13 0,11 991,02 0,12 990,90 0,13 990,77 0,14	1,25 1,25 1,25 1,26	0,10 989,88 0,11 989,77 0,12 989,65 0,14 989,51 0,15	1,21 1,22 1,23 1,23	0,11 988,67 0,12 988,55 0,13 988,42 0,14 988,28 0,16	1,18 1,19 1,20 1,21	0,11 987,49 0,13 987,36 0,14 987,22 0,15 987,07 0,16	1,15 1,15 1,16 1,17	0,12 986,34 0,13 986,21 0,15 986,06 0,16 985,90 0,17	1,11 1,12 1,13 1,13	0,13 985,23 0,14 985,09 0,16 984,93 0,16 984,77 0,18	1,07 1,09 1,09 1,11
15	990,63	1,27	989,36	1,24	988,12	1,21	986,91	1,18	985,73	1,14	984,59	1,12
16 17 18 19	0,16 990,47 0,17 990,30 0,18 990,12 0,19 989,93 0,20	1,27 1,28 1,28 1,29	0,16 989,20 0,18 989,02 0,18 988,84 0,20 988,64 0,20	1,25 1,25 1,26 1,26	0,17 987,95 0,18 987,77 0,19 987,58 0,20 987,38 0,21	1,21 1,22 1,23 1,23	0,17 986,74 0,19 986,55 0,20 986,35 0,20 986,15 0,22	1,19 1,19 1,20 1,21	0,18 985,55 0,19 985,36 0,21 985,15 0,21 984,94 0,23	1,15 1,16 1,17 1,10	0,19 984,40 0,20 984,20 0,22 983,98 0,22 983,76 0,24	1,13 1,14 1,14 1,16
20	989,73	1,29	988,44	1,27	987,17	1,24	985,93	1,22	984,71	1,19	983,52	1,16

3.1 lentelės tęsinys

t,^0С	Etilo alkoholio koncentracija, tūrio %
	0		1		2		3		4		5
20	998,20	1,50	996,70	1,46	995,24	1,43	993,81	1,39	992,42	1,36	991,06	1,33
21 22 23 24	0,20 998,00 0,21 997,79 0,22 997,57 0,24 997,33 0,24	1,50 1,50 1,50 1,49	0,20 996,50 0,21 996,29 0,22 996,07 0,23 995,84 0,25	1,46 1,46 1,47 1,47	0,20 995,04 0,21 994,83 0,23 994,60 0,23 994,37 0,24	1,43 1,43 1,43 1,43	0,20 993,61 0,21 993,40 0,23 993,17 0,23 992,94 0,25	1,40 1,40 1,40 1,41	0,21 992,21 0,21 992,00 0,23 991,77 0,24 991,53 0,24	1,36 1,37 1,37 1,37	0,21 990,85 0,22 990,63 0,23 990,40 0,24 990,16 0,25	1,33 1,33 1,34 1,34
25	997,09	1,50	995,59	1,46	994,43	1,44	992,69	1,40	991,29	1,38	989,91	1,35
26 27 28 29	0,25 996,84 0,26 996,58 0,27 996,31 0,28 996,03 0,28	1,50 1,50 1,50 1,50	0,25 995,34 0,26 995,08 0,27 994,81 0,28 994,53 0,29	1,47 1,47 1,47 1,47	0,26 993,87 0,26 993,61 0,27 993,34 0,28 993,06 0,29	1,43 1,44 1,44 1,45	0,25 992,44 0,27 992,17 0,27 991,90 0,29 991,61 0,29	1,41 1,41 1,42 1,41	0,26 991,03 0,27 990,76 0,28 990,48 0,28 990,20 0,30	1,38 1,38 1,38 1,39	0,26 989,65 0,27 989,38 0,28 989,10 0,29 988,81 0,30	1,35 1,35 1,36 1,36
30	995,75	1,51	994,24	1,47	992,77	1,45	991,32	1,42	989,90	1,39	988,51	1,37
31 32 33 34	0,30 995,45 0,31 995,14 0,31 994,83 0,32 994,51 0,33	1,51 1,51 1,51 1,52	0,30 993,94 0,31 993,63 0,31 993,32 0,33 992,99 0,33	1,47 1,47 1,48 1,48	0,30 992,47 0,31 992,16 0,32 991,84 0,33 991,51 0,34	1,45 1,46 1,46 1,46	0,30 991,02 0,32 990,70 0,32 990,38 0,33 990,05 0,35	1,43 1,42 1,42 1,44	0,31 989,59 0,31 989,28 0,32 988,96 0,35 988,61 0,34	1,39 1,40 1,41 1,40	0,31 988,20 0,32 987,88 0,33 987,55 0,34 987,21 0,35	1,37 1,37 1,37 1,38
35	994,18	1,52	992,66	1,49	991,17	1,47	989,70	1,43	988,27	1,41	986,86	1,38
36 37 38 39	0,34 993,84 0,35 993,49 0,36 993,13 0,36 992,77 0,37	1,53 1,53 1,53 1,54	0,35 992,31 0,35 991,96 0,36 991,60 0,37 991,23 0,37	1,49 1,50 1,50 1,50	0,35 990,82 0,36 990,46 0,36 990,10 0,37 989,73 0,38	1,47 1,46 1,47 1,47	0,35 989,35 0,35 989,00 0,37 998,63 0,37 988,26 0,39	1,43 1,44 1,44 1,45	0,35 987,92 0,36 987,56 0,37 987,19 0,38 986,81 0,38	1,41 1,41 1,41 1,41	0,35 986,51 0,36 986,15 0,37 985,78 0,38 985,40 0,39	1,38 1,39 1,39 1,39
40	992,40	1,54	990,86	1,51	989,35	1,48	987,87	1,44	986,43	1,42	985,01	1,39

3.1 lentelės tęsinys

t,^0C	Etilo alkoholio koncentracija, tūrio %
	6		7		8		9		10		11
20	989,73	1,29	988,44	1,27	987,17	1,24	985,93	1,22	984,71	1,19	983,52	1,16
21 22 23 24	0,21 989,52 0,22 989,30 0,24 989,06 0,24 988,82 0,26	1,30 1,31 1,31 1,32	0,22 988,22 0,23 987,99 0,24 987,75 0,25 987,50 0,26	1,27 1,28 1,28 1,29	0,22 986,95 0,24 986,71 0,24 986,47 0,26 986,21 0,26	1,25 1,25 1,26 1,26	0,23 985,70 0,24 985,46 0,25 985,21 0,26 984,95 0,27	1,23 1,23 1,24 1,25	0,24 984,47 0,24 984,23 0,26 983,97 0,27 983,70 0,28	1,19 1,21 1,20 1,22	0,24 983,28 0,26 983,02 0,25 982,77 0,29 982,48 0,28	1,18 1,18 1,20 1,20
25	988,56	1,32	987,24	1,29	985,95	1,27	984,68	1,26	983,42	1,22	982,20	1,21
26 27 28 29	0,26 988,30 0,27 988,03 0,29 987,74 0,29 987,45 0,31	1,32 1,33 1,33 1,34	0,26 986,98 0,28 986,70 0,29 986,41 0,30 986,11 0,31	1,31 1,31 1,31 1,32	0,28 985,67 0,28 985,39 0,29 985,10 0,31 984,79 0,31	1,27 1,28 1,29 1,29	0,28 984,40 0,29 984,11 0,30 983,81 0,31 983,50 0,32	1,26 1,27 1,28 1,28	0,28 983,14 0,30 982,84 0,31 982,53 0,31 982,22 0,32	1,24 1,24 1,25 1,26	0,30 981,90 0,30 981,60 0,32 981,28 0,32 980,96 0,33	1,22 1,23 1,23 1,24
30	987,14	1,34	985,80	1,32	984,48	1,30	983,18	1,28	981,90	1,27	980,63	1,25
31 32 33 34	0,31 986,83 0,32 986,51 0,33 986,18 0,35 985,83 0,35	1,34 1,35 1,36 1,36	0,31 985,49 0,33 985,16 0,34 984,82 0,35 984,47 0,35	1,33 1,33 1,34 1,33	0,32 984,16 0,33 983,83 0,35 983,48 0,34 983,14 0,36	1,31 1,32 1,32 1,33	0,33 982,85 0,34 982,51 0,35 982,16 0,35 981,81 0,36	1,29 1,30 1,30 1,31	0,34 981,56 0,35 981,21 0,35 980,86 0,36 980,50 0,36	1,27 1,28 1,28 1,29	0,34 980,29 0,36 979,93 0,35 979,58 0,37 979,21 0,37	1,26 1,26 1,28 1,28
35	985,48	1,36	984,12	1,34	982,78	1,33	981,45	1,31	980,14	1,30	978,84	1,29
36 37 38 39	0,35 985,13 0,37 984,76 0,37 984,39 0,38 984,01 0,39	1,37 1,37 1,37 1,38	0,36 983,76 0,37 983,39 0,37 983,02 0,39 982,63 0,39	1,34 1,35 1,36 1,35	0,36 982,42 0,38 982,04 0,38 981,66 0,38 981,28 0,40	1,34 1,33 1,34 1,35	0,37 981,08 0,37 980,71 0,39 980,32 0,39 979,93 0,39	1,31 1,33 1,32 1,33	0,37 979,77 0,39 979,38 0,38 979,00 0,40 978,60 0,40	1,31 1,31 1,32 1,32	0,38 978,46 0,39 978,07 0,39 977,68 0,40 977,28 0,41	1,29 1,30 1,31 1,32
40	983,62	1,38	982,24	1,36	980,88	1,34	979,54	1,34	978,20	1,33	976,87	1,32

3.1 lentelės tęsinys

t,^0C	Etilo alkoholio koncentracija, tūrio %
	10		11		12		13		14		15
0	986,93	1,00	986,95	0,95	984,98	0,92	984,00	0,88	983,18	0,84	982,34	0,80
1 2 3 4	-0,02 986,95 -0,01 986,96 0,01 986,95 0,03 986,92 0,04	1,01 1,02 1,03 1,04	-0,01 985,94 0,00 985,94 0,02 985,92 0,04 985,88 0,05	0,97 0,98 1,00 1,00	0,01 984,97 0,01 984,96 0,04 984,92 0,04 984,88 0,06	0,92 0,94 0,95 0,97	0,01 984,05 0,03 984,02 0,05 983,97 0,06 983,91 0,07	0,90 0,91 0,92 0,93	0,03 983,15 0,04 983,11 0,06 983,05 0,07 982,98 0,09	0,85 0,88 0,89 0,91	0,04 982,30 0,07 982,23 0,07 982,16 0,09 982,07 0,10	0,83 0,84 0,86 0,87
5	986,88	1,05	985,83	1,01	984,82	0,98	983,84	0,95	982,89	0,92	981,97	0,89
6 7 8 9	0,05 986,83 0,08 986,75 0,08 986,67 0,10 986,57 0,11	1,06 1,07 1,08 1,09	0,06 985,77 0,09 985,68 0,09 985,59 0,11 985,48 0,12	1,03 1,03 1,05 1,06	0,08 984,74 0,09 984,65 0,11 984,54 0,12 984,42 0,12	0,99 1,00 1,02 1,02	0,09 983,75 0,10 983,65 0,13 983,52 0,12 983,40 0,14	0,96 0,98 0,96 1,00	0,10 982,79 0,12 982,67 0,13 982,54 0,14 982,40 0,16	0,94 0,95 0,96 0,98	0,12 981,85 0,13 981,72 0,14 981,58 0,16 981,42 0,17	0,90 0,92 0,93 0,95
10	986,46	1,10	985,36	1,06	984,30	1,04	983,26	1,02	982,24	0,99	981,25	0,96
11 12 13 14	0,12 986,34 0,13 986,21 0,15 986,06 0,16 985,90 0,17	1,11 1,12 1,13 1,13	0,13 985,23 0,14 985,09 0,16 984,93 0,16 984,77 0,18	1,07 1,09 1,09 1,11	0,14 984,16 0,16 984,00 0,16 983,84 0,18 983,66 0,19	1,06 1,06 1,08 1,08	0,16 983,10 0,16 982,94 0,18 982,76 0,18 982,58 0,20	1,02 1,04 1,05 1,07	0,16 982,08 0,18 981,90 0,19 981,71 0,20 981,51 0,21	1,00 1,01 1,02 1,04	0,17 981,08 0,19 980,89 0,20 980,69 0,22 980,47 0,22	0,98 1,00 1,01 1,02
15	985,73	1,14	984,59	1,12	983,47	1,09	982,38	1,08	981,30	1,05	960,25	1,04
16 17 18 19	0,18 985,55 0,19 985,36 0,21 985,15 0,21 984,94 0,23	1,15 1,16 1,17 1,18	0,19 984,40 0,20 984,20 0,22 983,98 0,22 983,76 0,24	1,13 1,14 1,14 1,16	0,20 983,27 0,21 983,06 0,22 982,84 0,24 982,60 0,24	1,11 1,12 1,13 1,13	0,22 982,16 0,22 981,94 0,23 981,71 0,24 981,47 0,26	1,08 1,09 1,11 1,12	0,22 981,08 0,23 980,85 0,25 980,60 0,25 980,35 0,27	1,07 1,08 1,09 1,10	0,24 980,01 0,24 979,77 0,26 979,51 0,26 979,25 0,28	1,04 1,06 1,07 1,09
20	984,71	1,19	983,52	1,16	982,36	1,15	981,21	1,13	980,08	1,11	978,97	1,10

3.1 lentelės tęsinys

t,^0C	Etilo alkoholio koncentracija, tūrio %
	16		17		18		19		20		21
0	981,54	0,78	980,76	0,75	980,01	0,73	979,28	0,72	978,56	0,70	977,86	0,70
1 2 3 4	0,07 981,47 0,08 981,39 0,09 981,30 0,10 981,20 0,12	0,79 0,81 0,83 0,85	0,08 980,68 0,10 980,58 0,11 980,47 0,12 980,35 0,14	0,77 0,79 0,81 0,83	0,10 979,91 0,12 979,79 0,13 979,66 0,14 979,52 0,15	0,75 0,77 0,79 0,81	0,12 979,16 0,14 979,02 0,15 978,87 0,16 978,71 0,17	0,74 0,76 0,78 0,80	0,14 978,42 0,16 978,26 0,17 978,09 0,18 977,91 0,19	0,73 0,75 0,77 0,79	0,17 977,69 0,18 977,51 0,19 977,32 0,20 977,12 0,22	0,72 0,74 0,77 0,79
5	981,08	0,87	980,21	0,84	979,37	0,83	978,54	0,82	977,72	0,82	976,90	0,80
6 7 8 9	0,13 980,95 0,15 980,80 0,15 980,65 0,18 980,47 0,48	0,88 0,89 0,92 0,93	0,14 980,07 0,16 979,91 0,18 979,73 0,19 979,54 0,20	0,87 0,89 0,90 0,92	0,17 979,20 0,18 979,02 0,19 978,83 0,21 978,62 0,20	0,85 0,86 0,88 0,89	0,19 978,35 0,19 978,16 0,21 977,95 0,22 977,73 0,23	0,84 0,86 0,88 0,90	0,21 977,51 0,21 977,30 0,23 977,07 0,24 976,83 0,24	0,83 0,85 0,87 0,89	0,22 976,68 0,23 976,45 0,25 976,20 0,26 975,94 0,26	0,83 0,85 0,87 0,89
10	980,29	0,95	979,34	0,92	978,42	0,92	977,50	0,91	976,59	0,91	975,68	0,91
11 12 13 14	0,19 980,10 0,21 979,89 0,21 979,68 0,23 979,45 0,24	0,96 0,97 0,99 1,00	0,20 979,14 0,22 978,92 0,23 978,69 0,24 978,45 0,25	0,95 0,97 0,98 1,00	0,23 978,19 0,24 977,95 0,24 977“71 0,26 977,45 0,26	0,94 0,95 0,97 0,98	0,25 977,25 0,25 977,00 0,26 979,74 0,27 976,47 0,28	0,93 0,95 0,97 0,98	0,27 976,32 0,27 976,05 0,28 975,77 0,28 975,49 0,30	0,93 0,94 0,96 0,98	0,29 975,39 0,28 975,11 0,30 974,81 0,30 975,51 0,32	0,92 0,95 0,96 0,98
15	979,21	1,01	978,20	1,01	977,19	1,00	976,19	1,00	975,19	1,00	974,19	1,00
16 17 18 19	0,24 978,97 0,26 978,71 0,27 978,44 0,28 978,16 0,29	1,04 1,05 1,06 1,07	0,27 977,93 0,27 977,66 0,28 977,38 0,29 977,09 0,30	1,02 1,04 1,05 1,07	0,28 976,91 0,29 976,62 0,29 976,33 0,31 976,02 0,31	1,02 1,03 1,05 1,06	0,30 975,89 0,30 975,59 0,31 975,28 0,32 974,96 0,33	1,01 1,03 1,04 1,06	0,31 974,88 0,32 974,56 0,32 974,24 0,34 973,90 0,34	1,01 1,02 1,05 1,06	0,32 973,87 0,33 973,54 0,35 973,19 0,35 972,84 0,36	1,02 1,04 1,05 1,06
20	977,87	1,08	976,79	1,08	975,71	1,08	974,63	1,07	973,56	1,08	972,48	1,08

3.1 lentelės tęsinys

t,^0C	Etilo alkoholio koncentracija, tūrio %
	10		11		12		13		14		15
20	984,71	1,19	983,52	1,16	982,36	1,15	981,21	1,13	980,08	1,11	978,97	1,10
21 22 23 24	0,24 984,47 0,24 984,23 0,26 983,97 0,27 983,70 0,28	1,19 1,21 1,20 1,22	0,24 983,28 0,26 983,02 0,26 982,77 0,29 982,48 0,28	1,18 1,18 1,20 1,20	0,26 982,10 0,28 981,84 0,27 981,57 0,29 981,28 0,29	1,15 1,17 1,18 1,18	0,26 980,95 0,29 980,67 0,28 980,39 0,29 980,10 0,31	1,14 1,15 1,16 1,17	0,27 978,81 0,30 979,52 0,29 979,23 0,30 978,93 0,32	1,12 1,13 1,15 1,16	0,28 978,69 0,31 978,39 0,31 978,08 0,31 977,77 0,33	1,11 1,12 1,13 1,15
25	983,42	1,22	982,20	1,21	980,99	1,20	979,79	1,18	978,61	1,17	977,44	1,15
26 27 28 29	0,28 983,14 0,30 982,84 0,31 982,53 0,31 982,22 0,32	1,24 1,24 1,25 1,26	0,30 981,90 0,30 981,60 0,32 981,28 0,32 980,96 0,33	1,22 1,23 1,23 1,24	0,31 980,68 0,31 980,37 0,32 980,05 0,33 979,72 0,34	1,20 1,21 1,22 1,23	0,31 979,48 0,32 979,16 0,33 978,83 0,34 978,49 0,35	1,19 1,20 1,21 1,22	0,32 978,29 0,33 977,96 0,34 977,62 0,35 977,27 0,36	1,18 1,19 1,20 1,21	0,33 977,11 0,34 976,77 0,35 976,42 0,36 976,06 0,37	1,17 1,18 1,19 1,20
30	981,90	1,27	980,63	1,25	979,38	1,24	978,14	1,23	976,91	1,22	975,69	1,21
31 32 33 34	0,34 981,56 0,35 981,21 0,35 980,86 0,36 980,50 0,36	1,27 1,28 1,28 1,29	0,34 980,29 0,36 979,93 0,35 979,58 0,37 979,21 0,37	1,26 1,26 1,28 1,28	0,35 979,03 0,36 978,67 0,37 978,30 0,37 977,93 0,38	1,25 1,26 1,26 1,27	0,36 977,78 0,37 977,41 0,37 977,04 0,38 976,66 0,39	1,24 1,25 1,26 1,27	0,37 976,54 0,38 976,16 0,38 975,78 0,39 975,39 0,39	1,23 1,24 1,25 1,26	0,38 975,31 0,39 974,92 0,39 974,53 0,40 974,13 0,40	1,23 1,23 1,24 1,25
35	980,14	1,30	978,84	1,29	977,55	1,28	976,27	1,27	975,00	1,27	973,73	1,27
36 37 38 39	0,37 979,77 0,39 978,38 0,38 979,00 0,40 978,60 0,40	1,30 1,31 1,32 1,32	0,38 978,46 0,39 978,07 0,39 977,68 0,40 977,28 0,41	1,29 1,30 1,31 1,32	0,38 977,17 0,40 976,77 0,40 976,37 0,41 975,96 0,41	1,29 1,29 1,30 1,31	0,39 975,88 0,40 975,48 0,41 975,07 0,42 974,65 0,42	1,28 1,29 1,30 1,30	0,40 974,60 0,41 974,19 0,42 973,77 0,42 973,35 0,43	1,28 1,29 1,30 1,31	0,41 973,32 0,42 972,90 0,43 972,47 0,43 972,04 0,44	1,28 1,29 1,30 1,31
40	978,20	1,33	976,87	1,32	975,55	1,32	974,23	1,31	972,92	1,32	971,60	1,32

3.1 lentelės tęsinys

t,^0C	Etilo alkoholio koncentracija, tūrio %
	16		17		18		19		20		21
20	977,87	1,08	976,79	1,08	975,71	1,08	974,63	1,07	973,56	1,08	972,48	1,08
21 22 23 24	0,29 977,58 0,33 977,27 0,32 976,95 0,33 976,62 0,33	1,10 1,12 1,13 1,13	0,31 976,48 0,33 976,15 0,33 975,82 0,33 975,49 0,35	1,10 1,10 1,12 1,14	0,33 975,38 0,35 975,05 0,35 974,70 0,35 974,35 0,36	1,09 1,11 1,11 1,13	0,34 974,29 0,35 973,94 0,35 973,59 0,37 973,22 0,37	1,09 1,10 1,12 1,13	0,36 973,20 0,36 972,84 0,37 972,47 0,38 972,09 0,39	1,09 1,10 1,12 1,14	0,37 972,11 0,37 971,74 0,39 972,47 0,40 970,95 0,40	1,09 1,12 1,12 1,14
25	976,29	1,15	975,14	1,15	973,99	1,14	972,85	1,15	971,70	1,15	970,55	1,16
26 27 28 29	0,35 975,94 0,35 975,59 0,36 975,23 0,37 974,86 0,38	1,16 1,17 1,19 1,20	0,36 974,78 0,36 974,42 0,38 974,04 0,38 973,66 0,40	1,16 1,18 1,18 1,20	0,37 973,62 0,38 973,24 0,38 972,86 0,40 972,46 0,41	1,16 1,17 1,19 1,19	0,39 972,46 0,39 972,07 0,40 971,67 0,40 971,27 0,43	1,16 1,17 1,18 1,20	0,40 971,30 0,40 970,90 0,41 970,49 0,42 970,07 0,44	1,16 1,18 1,20 1,21	0,41 970,14 0,42 969,72 0,43 969,29 0,43 968,86 0,45	1,17 1,18 1,20 1,22
30	974,48	1,22	973,26	1,21	972,05	1,21	970,84	1,21	969,63	1,22	968,41	1,23
31 32 33 34	0,40 974,08 0,39 973,69 0,40 973,29 0,41 972,88 0,42	1,22 1,23 1,25 1,26	0,40 972,86 0,40 972,46 0,42 972,04 0,42 971,62 0,42	1,22 1,24 1,24 1,25	0,41 971,64 0,42 971,22 0,42 970,80 0,43 970,37 0,44	1,22 1,23 1,25 1,26	0,42 970,42 0,43 969,99 0,44 969,55 0,44 969,11 0,46	1,23 1,24 1,25 1,27	0,44 969,19 0,44 968,75 0,45 968,30 0,46 967,84 0,46	1,23 1,25 1,26 1,27	0,45 967,96 0,46 967,50 0,46 967,04 0,47 966,57 0,48	1,24 1,25 1,27 1,29
35	972,46	1,26	971,20	1,27	969,93	1,28	968,65	1,27	967,38	1,29	966,09	1,30
36 37 38 39	0,42 972,04 0,43 971,61 0,44 971,17 0,44 970,73 0,45	1,28 1,29 1,30 1,31	0,44 970,76 0,44 970,32 0,45 969,87 0,45 969,42 0,46	1,28 1,29 1,30 1,32	0,45 969,48 0,45 969,03 0,46 968,57 0,47 968,10 0,47	1,28 1,30 1,31 1,32	0,45 968,20 0,47 967,73 0,47 967,26 0,48 966,78 0,48	1,29 1,30 1,32 1,33	0,47 966,91 0,48 966,43 0,49 965,94 0,49 965,45 0,49	1,30 1,31 1,32 1,33	0,48 965,61 0,49 965,12 0,50 964,62 0,50 964,12 0,51	1,32 1,33 1,34 1,36
40	970,28	1,32	968,96	1,33	967,63	1,33	966,30	1,34	964,96	1,35	963,61	1,37

3.1 lentelės tęsinys

t,^0C	Etilo alkoholio koncentracija, tūrio %
	20		21		22		23		24		25
0	978,56	0,70	977,86	0,70	977,16	0,69	976,47	0,71	975,76	0,71	975,05	0,72
1 2 3 4	0,14 978,42 0,16 978,26 0,17 978,09 0,18 977,91 0,19	0,73 0,75 0,77 0,79	0,17 977,69 0,18 977,51 0,19 977,32 0,20 977,12 0,22	0,72 0,74 0,77 0,79	0,49 976,97 0,20 976,77 0,22 976,55 0,22 976,33 0,23	0,72 0,75 0,76 0,79	0,22 976,25 0,23 976,02 0,23 975,79 0,25 975,54 0,26	0,73 0,75 0,78 0,80	0,24 975,52 0,25 975,27 0,26 975,01 0,27 974,94 0,27	0,73 0,76 0,78 0,80	0,26 974,79 0,28 974,51 0,28 974,23 0,29 973,94 0,30	0,75 0,77 0,80 0,82
5	977,72	0,82	976,90	0,80	976,10	0,82	975,28	0,81	974,47	0,83	973,64	0,85
6 7 8 9	0,21 977,51 0,21 977,30 0,23 977,07 0,24 976,83 0,24	0,83 0,85 0,87 0,89	0,22 976,68 0,23 976,45 0,25 976,20 0,26 975,94 0,26	0,83 0,85 0,87 0,89	0,25 975,85 0,25 975,60 0,27 975,33 0,28 975,05 0,28	0,83 0,86 0,87 0,89	0,26 975,02 0,28 974,74 0,28 974,46 0,30 974,16 0,30	0,84 0,86 0,89 0,90	0,29 974,18 0,30 973,88 0,31 973,57 0,31 973,26 0,33	0,85 0,87 0,89 0,92	0,31 973,33 0,32 973,01 0,33 972,68 0,34 972,34 0,34	0,87 0,89 0,91 0,92
10	976,59	0,91	975,68	0,91	974,77	0,91	973,86	0,93	972,93	0,93	972,00	0,95
11 12 13 14	0,27 976,32 0,27 976,05 0,28 975,77 0,28 975,49 0,30	0,93 0,94 0,96 0,98	0,29 975,39 0,28 975,11 0,30 974,81 0,30 974,51 0,32	0,92 0,95 0,96 0,98	0,30 974,47 0,31 974,16 0,31 973,85 0,32 973,53 0,34	0,94 0,95 0,97 0,99	0,33 973,53 0,32 973,21 0,33 972,88 0,34 972,54 0,35	0,94 0,96 0,98 1,00	0,34 972,59 0,34 972,25 0,35 971,90 0,36 971,54 0,37	0,95 0,97 0,99 1,01	0,36 971,64 0,36 971,28 0,37 970,91 0,38 970,53 0,39	0,97 0,99 1,01 1,03
15	975,19	1,00	974,19	1,00	973,19	1,00	972,19	1,02	971,17	1,03	970,14	1,04
16 17 18 19	0,31 974,88 0,32 974,56 0,32 974,24 0,34 973,90 0,34	1,01 0,02 1,05 1,06	0,32 973,87 0,33 973,54 0,35 973,19 0,35 972,84 0,36	1,02 1,04 1,05 1,06	0,34 972,85 0,35 972,50 0,36 972,14 0,36 971,78 0,38	1,02 1,04 1,05 1,08	0,36 971,83 0,37 971,46 0,37 971,09 0,39 970,70 0,39	1,03 1,05 1,07 1,08	0,37 970,80 0,39 970,41 0,39 970,02 0,40 969,62 0,41	1,05 1,06 1,08 1,10	0,39 969,75 0,40 969,35 0,41 968,94 0,42 968,52 0,42	1,06 1,08 1,10 1,11
20	973,56	1,08	972,48	1,08	971,40	1,09	970,31	1,10	969,21	1,11	968,10	1,14

3.1 lentelės tęsinys

t,^0C	Etilo alkoholio koncentracija, tūrio %
	26		27		28		29		30		31
0	974,33	0,75	973,58	0,77	972,81	0,80	972,01	0,83	971,18	0,87	970,31	0,90
1 2 3 4	0,29 974,04 0,30 973,74 0,31 973,43 0,31 973,12 0,33	0,77 0,79 0,81 0,84	0,31 973,27 0,32 972,95 0,33 972,62 0,34 972,28 0,35	0,80 0,82 0,85 0,87	0,34 972,47 0,34 972,13 0,36 971,77 0,36 971,41 0,37	0,82 0,85 0,87 0,89	0,36 971,65 0,37 971,28 0,38 970,90 0,38 970,52 0,39	0,86 0,88 0,90 0,92	0,39 970,79 0,39 970,40 0,40 970,00 0,40 969,60 0,42	0,89 0,91 0,93 0,96	0,41 969,90 0,41 969,49 0,42 969,07 0,43 968,64 0,44	0,92 0,95 0,98 1,00
5	972,79	0,86	971,93	0,89	971,04	0,91	970,13	0,95	969,18	0,98	968,20	1,01
6 7 8 9	0,33 972,46 0,34 972,12 0,35 971,77 0,35 971,42 0,37	0,86 0,90 0,92 0,95	0,35 971,58 0,36 971,22 0,37 970,85 0,38 970,47 0,39	0,91 0,93 0,96 0,97	0,37 970,67 0,38 970,29 0,40 969,80 0,39 969,50 0,41	0,94 0,96 0,98 1,00	0,40 969,73 0,40 969,33 0,42 968,91 0,41 968,50 0,43	0,97 0,99 1,00 1,03	0,42 968,76 0,42 968,34 0,43 967,91 0,44 967,47 0,45	1,00 1,02 1,05 1,07	0,44 967,76 0,44 967,32 0,46 966,86 0,46 966,40 0,46	1,03 1,06 1,07 1,09
10	971,05	0,97	970,08	0,99	969,09	1,02	968,07	1,05	967,02	1,08	965,94	1,12
11 12 13 14	0,38 970,67 0,38 970,29 0,39 969,90 0,40 969,50 0,40	0,99 1,01 1,03 1,04	0,40 969,68 0,40 969,28 0,41 968,87 0,41 968,46 0,42	1,01 1,03 1,05 1,07	0,42 968,67 0,42 968,25 0,43 967,82 0,43 967,39 0,44	1,04 1,06 1,08 1,10	0,44 967,63 0,44 967,19 0,45 966,74 0,45 966,29 0,46	1,07 1,08 1,10 1,12	0,46 966,56 0,45 966,11 0,47 965,64 0,47 965,17 0,48	1,09 1,12 1,14 1,16	0,47 965,47 0,48 964,99 0,49 964,50 0,49 964,01 0,49	1,13 1,15 1,17 1,19
15	969,10	1,06	968,04	1,09	966,95	1,12	965,83	1,14	964,69	1,17	963,52	1,21
16 17 18 19	0,41 968,69 0,42 968,27 0,43 967,84 0,43 967,41 0,45	1,08 1,10 1,12 1,14	0,43 967,61 0,44 967,17 0,45 966,72 0,45 966,27 0,46	1,11 1,12 1,14 1,16	0,45 966,50 0,45 966,05 0,47 965,58 0,47 965,11 0,47	1,13 1,16 1,17 1,18	0,46 965,37 0,48 964,89 0,48 964,41 0,48 963,93 0,49	1,16 1,18 1,19 1,21	0,48 964,21 0,50 963,71 0,49 963,22 0,50 962,72 0,51	1,20 1,20 1,23 1,25	0,51 963,01 0,50 962,51 0,52 961,99 0,52 961,47 0,52	1,22 1,24 1,25 1,27
20	966,96	1,15	965,81	1,17	964,64	1,20	963,44	1,23	962,21	1,26	960,95	1,29

3.1 lentelės tęsinys

t,^0C	Etilo alkoholio koncentracija, tūrio %
	20		21		22		23		24		25
20	973,56	1,08	972,48	1,08	971,40	1,09	970,31	1,10	969,21	1,11	968,10	1,14
21 22 23 24	0,36 973,20 0,36 972,84 0,37 972,47 0,38 972,09 0,39	1,09 1,10 1,12 1,14	0,37 972,11 0,37 971,74 0,39 971,35 0,40 970,95 0,40	1,09 1,12 1,13 1,14	0,38 971,02 0,40 970,62 0,40 970,22 0,41 969,81 0,42	1,11 1,12 1,14 1,15	0,40 969,91 0,41 969,50 0,42 969,08 0,42 968,66 0,43	1,12 1,13 1,14 1,16	0,42 968,79 0,42 968,37 0,43 967,94 0,44 967,50 0,45	1,13 1,15 1,17 1,18	0,44 967,66 0,44 967,22 0,45 966,77 0,45 966,32 0,47	1,15 1,16 1,18 1,20
25	971,70	1,15	970,55	1,16	969,39	1,16	968,23	1,18	967,05	1,20	965,85	1,21
26 27 28 29	0,40 971,30 0,40 970,90 0,41 970,49 0,42 970,07 0,44	1,16 1,18 1,20 1,21	0,41 970,14 0,42 969,72 0,43 969,29 0,43 968,86 0,45	1,17 1,18 1,20 1,22	0,42 968,97 0,43 968,54 0,45 968,09 0,45 967,64 0,46	1,18 1,20 1,21 1,23	0,44 967,79 0,45 967,34 0,46 966,88 0,47 966,41 0,47	1,20 1,21 1,22 1,24	0,46 966,59 0,46 966,13 0,47 965,66 0,49 965,17 0,49	1,21 1,23 1,24 1,25	0,47 965,38 0,48 964,90 0,48 964,42 0,50 963,92 0,50	1,23 1,24 1,26 1,28
30	969,63	1,22	968,41	1,23	967,18	1,24	965,94	1,26	964,68	1,26	963,42	1,29
31 32 33 34	0,44 969,19 0,44 968,75 0,45 968,30 0,46 967,84 0,46	1,23 1,25 1,26 1,27	0,45 967,96 0,46 967,50 0,46 967,04 0,47 966,57 0,48	1,24 1,25 1,27 1,29	0,46 966,72 0,47 966,25 0,48 965,77 0,49 965,28 0,49	1,26 1,27 1,28 1,29	0,48 965,46 0,48 964,98 0,49 964,49 0,50 963,99 0,51	1,27 1,29 1,30 1,31	0,49 964,19 0,50 963,69 0,50 963,19 0,51 962,68 0,52	1,28 1,29 1,31 1,33	0,51 962,91 0,51 962,40 0,52 961,88 0,53 961,35 0,53	1,30 1,32 1,33 1,34
35	967,38	1,29	966,09	1,30	964,79	1,31	963,48	1,32	962,16	1,34	960,82	1,36
36 37 38 39	0,47 966,91 0,48 966,43 0,49 965,94 0,49 965,45 0,49	1,30 1,31 1,32 1,33	0,48 965,61 0,49 965,12 0,50 964,62 0,50 964,12 0,51	1,32 1,33 1,34 1,36	0,50 964,29 0,50 963,79 0,51 963,28 0,52 962,76 0,52	1,32 1,34 1,35 1,36	0,51 962,97 0,52 962,45 0,52 961,93 0,53 961,40 0,54	1,34 1,35 1,37 1,38	0,53 961,63 0,53 961,10 0,54 960,56 0,54 960,02 0,55	1,35 1,37 1,38 1,40	0,54 960,28 0,55 959,73 0,55 950,18 0,56 958,62 0,56	1,37 1,38 1,40 1,41
40	964,96	1,35	963,61	1,37	962,24	1,38	960,86	1,39	959,47	1,41	958,06	1,43

3.1 lentelės tęsinys

t,^0C	Etilo alkoholio koncentracija, tūrio %
	26		27		28		29		30		31
20	966,96	1,15	965,81	1,17	964,64	1,20	963,44	1,23	962,21	1,26	960,95	1,29
21 22 23 24	0,45 966,51 0,45 966,06 0,47 965,59 0,47 965,12 0,48	1,16 1,19 1,20 1,22	0,46 965,35 0,48 964,87 0,48 964,39 0,49 963,90 0,49	1,20 1,21 1,22 1,24	0,49 964,15 0,49 963,66 0,49 963,17 0,51 962,66 0,51	1,21 1,23 1,25 1,26	0,50 962,94 0,51 962,43 0,51 961,92 0,52 961,40 0,53	1,25 1,26 1,28 1,30	0,52 961,69 0,52 961,17 0,53 960,64 0,54 960,10 0,54	1,27 1,29 1,31 1,32	0,53 960,42 0,54 959,88 0,55 959,33 0,55 958,78 0,55	1,31 1,32 1,33 1,35
25	964,64	1,23	963,41	1,26	962,15	1,28	960,87	1,31	959,56	1,33	958,23	1,37
26 27 28 29	0,49 964,15 0,49 963,66 0,50 963,16 0,52 962,64 0,51	1,24 1,26 1,28 1,29	0,50 962,91 0,51 962,40 0,52 961,88 0,53 961,35 0,53	1,27 1,29 1,31 1,31	0,51 961,64 0,53 961,11 0,54 960,57 0,53 960,04 0,55	1,30 1,31 1,33 1,35	0,53 960,34 0,54 959,80 0,56 959,24 0,55 958,69 0,55	1,32 1,34 1,35 1,36	0,54 959,02 0,56 958,46 0,57 957,89 0,56 957,33 0,58	1,36 1,36 1,38 1,40	0,57 957,66 0,56 957,10 0,59 956,51 0,58 955,93 0,58	1,38 1,40 1,41 1,42
30	962,13	1,31	960,82	1,33	959,49	1,35	958,14	1,39	956,75	1,40	955,35	1,44
31 32 33 34	0,52 961,61 0,53 961,08 0,53 960,55 0,54 960,01 0,55	1,32 1,33 1,35 1,37	0,53 960,29 0,54 959,75 0,55 959,20 0,56 958,64 0,56	1,35 1,36 1,38 1,38	0,55 958,94 0,55 958,39 0,57 957,82 0,56 957,26 0,58	1,37 1,39 1,39 1,42	0,57 957,57 0,57 957,00 0,57 956,43 0,59 955,84 0,58	1,40 1,41 1,43 1,43	0,58 956,17 0,58 955,59 0,59 955,00 0,59 954,41 0,60	1,42 1,43 1,45 1,46	0,60 954,75 0,59 954,16 0,61 953,55 0,60 952,95 0,62	1,44 1,46 1,47 1,49
35	959,46	1,38	958,08	1,40	956,68	1,42	955,26	1,45	953,81	1,48	952,33	1,50
36 37 38 39	0,55 958,91 0,56 958,35 0,57 957,78 0,57 957,21 0,58	1,40 1,41 1,42 1,43	0,57 957,51 0,57 956,94 0,58 956,36 0,58 955,78 0,59	1,41 1,43 1,44 1,46	0,58 956,10 0,59 955,51 0,59 954,92 0,60 954,32 0,60	1,44 1,45 1,46 1,47	0,60 954,66 0,60 954,06 0,60 953,46 0,61 952,85 0,62	1,46 1,47 1,49 1,50	0,61 953,20 0,61 952,59 0,62 951,97 0,62 951,35 0,63	1,49 1,50 1,51 1,53	0,62 951,71 0,62 951,09 0,63 950,46 0,64 949,82 0,64	1,51 1,53 1,54 1,55
40	956,63	1,44	955,19	1,47	953,72	1,49	952,23	1,51	950,72	1,54	949,18	1,57

3.2 lentelė. Faktinės etilo alkoholio koncentracijos pataisos temperatūros įtakai įvertinti. Prie faktinės etilo alkoholio koncentracijos, išmatuotos temperatūroje t, °C, lentelėje pateiktas pataisas reikia pridėti arba iš jos atimti (spiritometras pagamintas iš paprasto stiklo)

t, ^0C		Faktinė etilo alkoholio koncentracija, t^0C
		0	1	2	3	4	5	6	7	8	9	10	11	12	13	14	15	16
0 1 2 3 4	pridėti	0,76 0,81 0,85 0,88 0,90	0,77 0,83 0,87 0,91 0,92	0,82 0,87 0,92 0,95 0,97	0,87 0,92 0,97 1,00 1,02	0,95 1,00 1,04 1,07 1,09	1,04 1,09 1,13 1,15 1,17	1,16 1,20 1,24 1,26 1,27	1,31 1,35 1,38 1,39 1,40	1,49 1,52 1,54 1,55 1,55	1,70 1,73 1,74 1,73 1,72	1,95 1,97 1,97 1,95 1,92	2,26 2,26 2,24 2,20 2,15	2,62 2,59 2,54 2,48 2,41	3,03 2,97 2,89 2,80 2,71	3,49 3,40 3,29 3,16 3,03	4,02 3,87 3,72 3,55 3,38		4,56 4,36 4,17 3,95 3,75
5		0,91	0,93	0,98	1,03	1,10	1,17	1,27	1,39	1,53	1,69	1,87	2,08	2,33	2,60	2,89	3,21		3,54
6 7 8 9		0,92 0,91 0,89 0,86	0,94 0,93 0,91 0,88	0,98 0,97 0,94 0,91	1,02 1,01 0,98 0,95	1,09 1,07 1,04 1,01	1,16 1,14 1,11 1,07	1,25 1,23 1,19 1,14	1,37 1,33 1,28 1,23	1,50 1,45 1,39 1,33	1,65 1,59 1,52 1,44	1,82 1,75 1,66 1,57	2,01 1,92 1,82 1,71	2,23 2,12 2,00 1,87	2,47 2,34 2,20 2,05	2,74 2,58 2,42 2,24	3,02 2,83 2,65 2,44		3,32 3,10 2,88 2,65
10		0,82	0,84	0,87	0,91	0,96	1,01	1,08	1,16	1,25	1,35	1,47	1,60	1,74	1,89	2,06	2,24		2,43
11 12 13 14		0,78 0,72 0,66 0,59	0,79 0,74 0,67 0,60	0,82 0,76 0,69 0,62	0,86 0,79 0,72 0,64	0,90 0,83 0,76 0,67	0,95 0,88 0,80 0,71	1,01 0,93 0,84 0,74	1,08 0,99 0,90 0,79	1,16 1,07 0,96 0,85	1,25 1,15 1,03 0,91	1,36 1,24 1,11 0,97	1,47 1,34 1,19 1,04	1,60 1,44 1,28 1,12	1,73 1,56 1,38 1,20	1,88 1,69 1,49 1,29	2,03 1,82 1,61 1,39		2,20 1,96 1,73 1,49
15		0,51	0,52	0,53	0,55	0,58	0,61	0,64	0,68	0,73	0,77	0,83	0,89	0,95	1,02	1,09	1,16		1,24
16 17 18 19		0,42 0,33 0,23 0,12	0,43 0,33 0,23 0,12	0,44 0,34 0,23 0,12	0,46 0,35 0,24 0,12	0,48 0,37 0,25 0,13	0,50 0,39 0,26 0,13	0,53 0,41 0,27 0,14	0,56 0,43 0,29 0,15	0,60 0,46 0,31 0,16	0,63 0,48 0,33 0,17	0,67 0,51 0,35 0,18	0,72 0,55 0,37 0,19	0,77 0,59 0,40 0,20	0,82 0,62 0,42 0,21	0,88 0,67 0,45 0,23	0,94 0,71 0,48 0,24		1,00 0,75 0,51 0,25

3.2 lentelės tęsinys

t, ^0C		Faktinė etilo alkoholio koncentracija, t^0C
		0	1	2	3	4	5	6	7	8	9	10	11	12	13	14	15		16
21 22 23 24	atimti		0,13 0,26 0,40 0,55	0,13 0,27 0,41 0,56	0,13 0,28 0,42 0,58	0,14 0,29 0,44 0,60	0,14 0,30 0,45 0,62	0,15 0,31 0,47 0,64	0,16 0,32 0,49 0,67	0,17 0,34 0,51 0,70	0,18 0,36 0,54 0,73	0,19 0,37 0,57 0,77	0,19 0,39 0,60 0,81	0,20 0,41 0,63 0,85	0,22 0,44 0,66 0,89	0,23 0,47 0,70 0,94	0,25 0,49 0,74 0,99	0,26 0,52 0,78 1,04
25			0,69	0,71	0,73	0,76	0,79	0,82	0,85	0,89	0,93	0,97	1,02	1,07	1,13	1,19	1,25	1,31
26 27 28 29			0,85	0,87 1,03 1,21 1,39	0,90 1,07 1,25 1,43	0,93 1,11 1,29 1,47	0,96 1,15 1,33 1,52	1,00 1,19 1,38 1,58	1,04 1,23 1,43 1,63	1,08 1,28 1,49 1,70	1,13 1,34 1,55 1,76	1,18 1,40 1,62 1,84	1,24 1,46 1,69 1,92	1,30 1,53 1,77 2,01	1,36 1,60 1,85 2,10	1,43 1,68 1,93 2,19	1,50 1,76 2,02 2,29	1,57 1,84 2,11 2,39
30				1,57	1,61	1,66	1,72	1,78	1,84	1,91	1,98	2,07	2,15	2,25	2,35	2,45	2,56	2,67
31 32 33 34				1,75 1,94	1,80 2,00 2,20 2,41	1,86 2,06 2,27 2,48	1,92 2,13 2,34 2,56	1,98 2,20 2,42 2,64	2,05 2,27 2,50 2,72	2,13 2,35 2,58 2,81	2,21 2,44 2,67 2,91	2,30 2,53 2,77 3,02	2,39 2,63 2,88 3,13	2,49 2,74 2,99 3,25	2,60 2,86 3,12 3,38	2,71 2,97 3,24 3,51	2,83 3,09 3,37 3,65	2,94 3,22 3,51 3,79
35					2,62	2,70	2,78	2,86	2,95	3,05	3,16	3,27	3,39	3,51	3,64	3,78	3,93	4,08
36 37 38 39					2,83	2,91 3,13 3,36 3,59	3,00 3,23 3,47 3,70	3,09 3,33 3,57 3,81	3,19 3,43 3,68 3,93	3,29 3,54 3,79 4,05	3,41 3,65 3,91 4,17	3,53 3,78 4,03 4,30	3,65 3,91 4,17 4,44	3,78 4,04 4,31 4,58	3,91 4,18 4,46 4,74	4,05 4,33 4,61 4,90	4,21 4,49 4,77 5,06	4,37 4,65 4,94 5,23
40						3,82	3,94	4,06	4,18	4,31	4,44	4,57	4,71	4,86	5,02	5,19	5,36	5,53

3.2 lentelės tęsinys

t, ^0C		Faktinė etilo alkoholio koncentracija, t^0C
		14	15	16	17	18	19	20	21	22	23	24	25	26	27	28	29	30
0	pridėti	3,49	4,02	4,56	5,11	5,65	6,16	6,63	7,05	7,39	7,67	7,91	8,07	8,20	8,30	8,36	8,39	8,40
1 2 3 4		3,40 3,29 3,16 3,03	3,87 3,72 3,55 3,38	4,36 4,17 3,95 3,75	4,86 4,61 4,36 4,11	5,35 5,05 4,77 4,48	5,82 5,49 5,17 4,84	6,26 5,89 5,53 5,17	6,64 6,25 5,85 5,48	6,96 6,55 6,14 5,74	7,23 6,81 6,39 5,97	7,45 7,02 6,59 6,16	7,62 7,18 6,74 6,31	7,75 7,31 6,86 6,43	7,85 7,40 6,97 6,53	7,91 7,47 7,03 6,59	7,95 7,51 7,07 6,63	7,96 7,53 7,09 6,66
5		2,89	3,21	3,54	3,86	4,20	4,52	4,83	5,11	5,35	5,56	5,74	5,89	6,00	6,10	6,16	6,20	6,23
6 7 8 9		2,74 2,58 2,42 2,24	3,02 2,83 2,65 2,44	3,32 3,10 2,88 2,65	3,61 3,36 3,11 2,86	3,91 3,63 3,35 3,07	4,21 3,90 3,59 3,28	4,49 4,15 3,81 3,48	4,74 4,38 4,02 3,67	4,96 4,58 4,21 3,84	5,16 4,77 4,38 3,99	5,33 4,92 4,52 4,12	5,47 5,05 4,64 4,23	5,58 5,15 4,74 4,32	5,67 5,24 4,81 4,39	5,73 5,30 4,87 4,45	5,77 5,34 4,92 4,50	5,80 5,37 4,95 4,53
10		2,06	2,24	2,43	2,61	2,80	2,98	3,16	3,33	3,48	3,61	3,73	3,83	3,91	3,98	4,03	4,08	4,11
11 12 13 14		1,88 1,69 1,49 1,29	2,03 1,82 1,61 1,39	2,20 1,96 1,73 1,49	2,36 2,10 1,84 1,58	2,52 2,24 1,96 1,68	2,68 2,38 2,08 1,78	2,83 2,51 2,20 1,88	2,98 2,64 2,31 1,97	3,12 2,76 2,41 2,06	3,24 2,87 2,50 2,13	3,34 2,96 2,58 2,20	3,43 3,04 2,65 2,26	3,50 3,10 2,71 2,31	3,57 3,16 2,76 2,36	3,62 3,21 2,80 2,39	3,66 3,25 2,83 2,42	3,69 3,27 2,85 2,44
15		1,09	1,16	1,24	1,32	1,40	1,48	1,56	1,64	1,71	1,77	1,83	1,88	1,92	1,96	1,98	2,01	2,03
16 17 18 19		0,88 0,67 0,45 0,23	0,94 0,71 0,48 0,24	1,00 0,75 0,51 0,25	1,06 0,80 0,53 0,27	1,12 0,84 0,56 0,28	1,19 0,89 0,59 0,30	1,25 0,94 0,62 0,31	1,31 0,98 0,65 0,33	1,36 1,02 0,68 0,34	1,41 1,05 0,70 0,35	1,46 1,09 0,72 0,36	1,50 1,12 0,74 0,37	1,53 1,14 0,76 0,38	1,56 1,17 0,78 0,39	1,58 1,18 0,79 0,40	1,60 1,20 0,80 0,40	1,62 1,21 0,81 0,41

3.2 lentelės tęsinys

t, ^0C		Faktinė etilo alkoholio koncentracija, t^0C
		14	15	16	17	18	19	20	21	22	23	24	25	26	27	28	29	30
21 22 23 24	atimti	0,23 0,47 0,70 0,94	0,25 0,49 0,74 0,99	0,26 0,52 0,78 1,04	0,28 0,55 0,82 1,10	0,29 0,57 0,86 1,15	0,30 0,60 0,90 1,20	0,31 0,62 0,93 1,25	0,33 0,65 0,97 1,29	0,34 0,67 1,01 1,34	0,35 0,70 1,04 1,39	0,35 0,72 1,07 1,43	0,37 0,74 1,10 1,46	0,38 0,75 1,12 1,50	0,38 0,76 1,15 1,53	0,39 0,78 1,17 1,55	0,39 0,79 1,18 1,57	0,40 0,80 1,19 1,59
25		1,19	1,25	1,31	1,37	1,43	1,49	1,56	1,62	1,68	1,73	1,78	1,83	1,87	1,90	1,94	1,97	1,99
26 27 28 29		1,43 1,68 1,93 2,19	1,50 1,76 2,02 2,29	1,57 1,84 2,11 2,39	1,65 1,93 2,21 2,50	1,73 2,01 2,31 2,60	1,80 2,10 2,40 2,70	1,87 2,18 2,49 2,81	1,94 2,26 2,58 2,91	2,01 2,34 2,67 3,00	2,07 2,41 2,76 3,09	2,13 2,48 2,83 3,18	2,19 2,55 2,90 3,26	2,24 2,61 2,98 3,34	2,28 2,66 3,03 3,40	2,32 2,70 3,08 3,46	2,35 2,74 3,13 3,51	2,38 2,77 3,17 3,55
30		2,45	2,56	2,67	2,78	2,90	3,01	3,12	3,23	3,34	3,44	3,53	3,62	3,70	3,77	3,84	3,90	3,95
31 32 33 34		2,71 2,97 3,24 3,51	2,83 3,09 3,37 3,65	2,94 3,22 3,51 3,79	3,07 3,36 3,65 3,94	3,19 3,49 3,79 4,09	3,31 3,62 3,92 4,23	3,43 3,74 4,06 4,37	3,55 3,87 4,20 4,52	3,67 4,00 4,33 4,66	3,78 4,11 4,45 4,79	3,88 4,22 4,57 4,91	3,98 4,33 4,68 5,03	4,07 4,43 4,79 5,15	4,15 4,51 4,88 5,25	4,22 4,59 4,97 5,34	4,28 4,66 5,04 5,42	4,33 4,72 5,10 5,49
35		3,78	3,93	4,08	4,23	4,38	4,53	4,69	4,84	4,98	5,12	5,26	5,38	5,50	5,61	5,71	5,80	5,87
36 37 38 39		4,05 4,33 4,61 4,90	4,21 4,49 4,77 5,06	4,37 4,65 4,94 5,23	4,52 4,82 5,12 5,41	4,68 4,98 5,29 5,59	4,84 5,15 5,46 5,77	5,00 5,31 5,63 5,94	5,16 5,48 5,80 6,12	5,31 5,64 5,97 6,30	5,46 5,80 6,13 6,47	5,60 5,95 6,29 6,63	5,73 6,09 6,43 6,78	5,86 6,22 6,57 6,93	5,97 6,33 6,69 7,06	6,08 6,44 6,81 7,18	6,17 6,54 6,92 7,29	6,25 6,63 7,01 7,39
40		5,19	5,36	5,53	5,71	5,90	6,08	6,26	6,44	6,62	6,80	6,97	7,13	7,28	7,41	7,54	7,66	7,76

3.3 lentelė. Tikrojo vandens ir etilo alkoholio mišinių tankio temperatūroje t, °C, nustatymas, kai matavimo prietaisai pagaminti iš paprasto stiklo (su pataisa išstumtam orui)

t, oC	Etilo alkoholio koncentracija, tūrio %
	0		1		2		3		4		5
0	999,34	1,52	997,82	1,45	996,37	1,39	994,98	1,35	993,63	1,29	992,34	1,24
1 2 3 4	-0,09 993,43 -0,06 999,49 -0,05 999,54 -0,03 999,57 -0,02	1,52 1,52 1,52 1,52	-0,09 997,91 -0,06 997,97 -0,05 998,02 -0,03 998,05 -0,02	1,45 1,40 1,46 1,46	-0,09 996,46 -0,06 996,52 -0,04 996,56 -0,03 996,59 -0,02	1,40 1,40 1,40 1,40	-0,08 995,06 -0,06 995,12 -0,04 995,16 -0,03 995,19 -0,02	1,35 1,35 1,35 1,36	-0,08 993,71 -0,06 993,77 -0,04 993,81 -0,02 993,83 -0,02	1,29 1,30 1,30 1,30	-0,08 992,42 -0,05 992,47 -0,04 992,51 -0,02 992,53 -0,01	1,25 1,25 1,26 1,26
5	999,59	1,52	998,07	1,46	996,61	1,40	995,21	1,36	993,85	1,31	992,54	1,27
6 7 8 9	0,00 999,59 0,01 999,58 0,03 999,55 0,04 999,51 0,06	1,52 1,52 1,52 1,52	0,00 998,07 0,01 998,06 0,03 998,03 0,04 997,99 0,06	1,46 1,46 1,46 1,46	0,00 996,61 0,01 996,60 0,03 996,57 0,04 996,53 0,06	1,41 1,41 1,41 1,41	0,01 995,20 0,01 995,19 0,03 995,16 0,04 995,12 0,06	1,36 1,36 1,37 1,37	0,01 993,84 0,01 993,83 0,04 993,79 0,04 993,75 0,06	1,31 1,32 1,32 1,32	0,01 992,53 0,02 992,51 0,04 992,47 0,04 992,43 0,07	1,27 1,27 1,28 1,29
10	999,45	1,52	997,93	1,46	996,47	1,41	995,06	1,37	993,69	1,33	992,36	1,29
11 12 13 14	0,07 999,38 0,09 999,29 0,09 999,20 0,11 999,09 0,12	1,51 1,51 1,51 1,51	0,06 997,87 0,09 997,78 0,09 997,69 0,11 997,58 0,12	1,46 1,46 1,46 1,46	0,06 996,41 0,09 996,32 0,09 996,23 0,11 996,12 0,12	1,42 1,42 1,42 1,42	0,07 994,99 0,09 994,90 0,09 994,81 0,11 994,70 0,12	1,37 1,37 1,38 1,38	0,07 993,62 0,09 993,53 0,10 993,43 0,11 993,32 0,12	1,33 1,33 1,33 1,34	0,07 992,29 0,09 992,20 0,10 992,10 0,12 991,98 0,12	1,29 1,30 1,30 1,30
15	998,97	1,51	997,46	1,46	996,00	1,42	994,58	1,38	993,20	1,34	991,86	1,31
16 17 18 19	0,13 998,84 0,14 998,70 0,15 998,55 0,17 998,38 0,18	1,51 1,51 1,51 1,50	0,13 997,33 0,14 997,19 0,15 997,04 0,16 996,88 0,18	1,46 1,46 1,47 1,47	0,13 995,87 0,14 995,73 0,16 995,57 0,16 995,41 0,18	1,42 1,42 1,42 1,42	0,13 994,45 0,14 994,31 0,16 994,15 0,16 993,99 0,18	1,39 1,39 1,39 1,39	0,14 993,06 0,14 992,92 0,16 992,76 0,16 992,60 0,19	1,34 1,35 1,35 1,35	0,14 991,72 0,15 991,57 0,16 991,41 0,16 991,25 0,19	1,31 1,31 1,32 1,33
20	998,20	1,50	996,70	1,47	995,23	1,42	993,81	1,40	992,41	1,35	991,06	1,33

3.3 lentelės tęsinys

t,^0C	Etilo alkoholio koncentracija, tūrio %
	6		7		8		9		10		11
0	991,10	1,18	989,92	1,15	988,77	1,09	987,68	1,05	986,63	1,00	985,63	0,96
1 2 3 4	-0,07 991,17 -0,05 991,22 -0,03 991,25 -0,02 991,27 0,00	1,20 1,21 1,21 1,22	-0,05 989,97 -0,04 990,01 -0,03 990,04 -0,01 990,05 0,00	1,15 1,16 1,16 1,17	-0,05 988,82 -0,03 988,85 -0,03 988,88 0,00 988,88 0,00	1,10 1,11 1,12 1,13	-0,04 987,72 -0,02 987,74 -0,02 987,76 0,01 987,75 0,01	1,06 1,06 1,08 1,08	-0,03 986,66 -0,02 986,68 0,00 986,68 0,01 986,67 0,02	1,01 1,02 1,03 1,04	-0,02 985,65 -0,01 985,66 0,01 985,65 0,02 985,63 0,03	0,97 0,98 0,99 1,00
5	991,27	1,22	990,05	1,17	988,88	1,14	987,74	1,09	986,65	1,05	985,60	1,02
6 7 8 9	0,01 991,26 0,02 991,24 0,05 991,19 0,05 991,14 0,07	1,23 1,23 1,23 1,24	0,02 990,03 0,02 990,01 0,05 989,96 0,06 989,90 0,07	1,18 1,19 1,20 1,20	0,03 988,85 0,03 988,82 0,06 988,76 0,06 988,70 0,08	1,14 1,15 1,16 1,16	0,03 987,71 0,04 987,67 0,07 987,60 0,06 987,54 0,09	1,10 1,11 1,11 1,13	0,04 986,61 0,05 986,56 0,07 986,49 0,08 986,41 0,10	1,07 1,08 1,09 1,09	0,06 985,54 0,06 985,48 0,08 985,40 0,08 985,32 0,11	1,02 1,04 1,05 1,06
10	991,07	1,24	989,83	1,21	988,62	1,17	987,45	1,14	986,31	1,10	985,21	1,07
11 12 13 14	0,07 991,00 0,10 990,90 0,10 990,80 0,12 990,68 0,13	1,25 1,26 1,26 1,27	0,08 989,75 0,11 989,64 0,10 989,54 0,13 989,41 0,13	1,22 1,22 1,23 1,23	0,09 988,53 0,11 988,42 0,11 988,31 0,13 988,18 0,14	1,18 1,18 1,19 1,20	0,10 987,35 0,11 987,24 0,12 987,12 0,14 986,98 0,14	1,14 1,15 1,16 1,17	0,10 986,21 0,12 986,09 0,13 985,96 0,15 985,81 0,15	1,11 1,12 1,13 1,14	0,11 985,10 0,13 984,97 0,14 984,83 0,16 984,67 0,16	1,08 1,09 1,10 1,11
15	990,55	1,27	989,28	1,24	988,04	1,20	986,84	1,18	985,66	1,15	984,51	1,12
16 17 18 19	0,14 990,41 0,15 990,26 0,17 990,09 0,17 989,92 0,19	1,28 1,28 1,28 1,29	0,15 989,13 0,15 988,98 0,17 988,81 0,18 988,63 0,20	1,24 1,25 1,26 1,26	0,15 987,89 0,16 987,73 0,18 987,55 0,18 987,37 0,21	1,22 1,22 1,23 1,24	0,17 986,67 0,17 986,50 0,18 986,32 0,19 986,13 0,22	1,18 1,18 1,19 1,20	0,17 985,49 0,17 985,32 0,19 985,13 0,20 984,93 0,22	1,16 1,17 1,17 1,18	0,18 984,33 0,18 984,15 0,19 983,96 0,21 983,75 0,23	1,13 1,14 1,15 1,16
20	989,73	1,30	988,43	1,27	987,16	1,24	985,92	1,21	984,71	1,19	983,52	1,17

3.3 lentelės tęsinys

t,^0C	Etilo alkoholio koncentracija, tūrio %
	0		1		2		3		4		5
20	998,20	1,50	996,70	1,47	995,23	1,42	993,81	1,40	992,41	1,35	991,06	1,33
21 22 23 24	0,19 998,01 0,20 987,81 0,21 997,60 0,21 997,39 0,23	1,50 1,50 1,50 1,50	0,19 996,51 0,20 996,31 0,21 996,10 0,21 995,89 0,23	1,47 1,46 1,46 1,47	0,19 995,04 0,19 994,85 0,21 994,64 0,22 994,42 0,23	1,42 1,43 1,43 1,43	0,19 993,62 0,20 993,42 0,21 993,21 0,22 992,99 0,23	1,40 1,40 1,40 1,40	0,19 992,22 0,20 992,02 0,21 991,81 0,22 991,59 0,24	1,36 1,36 1,37 1,37	0,20 990,86 0,20 990,66 0,22 990,44 0,22 990,22 0,24	1,33 1,34 1,34 1,35
25	997,16	1,50	995,66	1,47	994,19	1,43	992,76	1,41	991,35	1,37	989,98	1,35
26 27 28 29	0,23 996,93 0,25 996,68 0,25 996,43 0,26 996,17 0,27	1,50 1,50 1,50 1,51	0,23 995,43 0,25 995,18 0,25 994,93 0,27 994,66 0,27	1,47 1,47 1,48 1,48	0,23 993,96 0,25 993,71 0,26 993,45 0,27 993,18 0,27	1,44 1,44 1,44 1,44	0,24 992,52 0,25 992,27 0,26 992,01 0,27 991,74 0,28	1,41 1,41 1,41 1,41	0,24 991,11 0,25 990,86 0,26 990,60 0,27 990,33 0,28	1,37 1,38 1,38 1,39	0,24 989,74 0,26 989,48 0,26 989,22 0,28 988,94 0,28	1,35 1,35 1,36 1,36
30	995,90	1,51	994,39	1,48	992,91	1,45	991,46	1,41	990,05	1,39	988,66	1,37
31 32 33 34	0,29 995,61 0,29 995,32 0,30 995,02 0,30 994,72 0,32	1,51 1,51 1,52 1,53	0,29 994,10 0,29 993,81 0,31 993,50 0,31 993,19 0,32	1,48 1,48 1,48 1,48	0,29 992,62 0,29 992,33 0,31 992,02 0,31 991,71 0,32	1,45 1,45 1,45 1,45	0,29 991,17 0,29 990,88 0,31 990,57 0,31 990,26 0,33	1,42 1,42 1,43 1,43	0,30 989,75 0,30 989,45 0,31 989,14 0,31 988,83 0,33	1,39 1,40 1,40 1,41	0,30 988,36 0,31 988,05 0,31 987,74 0,32 987,42 0,33	1,37 1,37 1,37 1,38
35	994,40	1,53	992,87	1,48	991,39	1,46	989,93	1,43	988,50	1,41	987,09	1,38
36 37 38 39	0,32 994,08 0,33 993,75 0,34 993,41 0,35 993,06 0,35	1,53 1,54 1,54 1,54	0,32 992,55 0,34 992,21 0,34 991,87 0,35 991,52 0,36	1,49 1,49 1,50 1,51	0,33 991,06 0,34 990,72 0,35 990,37 0,36 990,01 0,36	1,46 1,46 1,47 1,47	0,33 989,60 0,34 989,26 0,36 988,90 0,36 988,54 0,37	1,43 1,44 1,44 1,44	0,33 988,17 0,35 987,82 0,36 987,46 0,36 987,10 0,38	1,41 1,41 1,41 1,41	0,33 986,76 0,35 986,41 0,36 986,05 0,37 985,68 0,38	1,39 1,39 1,39 1,39
40	992,71	1,55	991,16	1,51	989,65	1,48	988,17	1,45	986,72	1,42	985,30	1,39

3.3 lentelės tęsinys

t,^0C	Etilo alkoholio koncentracija, tūrio %
	6		7		8		9		10		11
20	989,73	1,30	988,43	1,27	987,16	1,24	985,92	1,21	984,71	1,19	983,52	1,17
21 22 23 24	0,20 989,53 0,21 989,32 0,22 989,10 0,23 988,87 0,24	1,31 1,31 1,31 1,31	0,21 988,22 0,21 988,01 0,22 987,79 0,23 987,56 0,25	1,27 1,28 1,29 1,29	0,21 986,95 0,22 986,73 0,23 986,50 0,23 986,27 0,25	1,25 1,25 1,26 1,27	0,22 985,70 0,22 985,48 0,24 985,24 0,24 985,00 0,25	1,22 1,23 1,23 1,24	0,23 984,48 0,23 984,25 0,24 984,01 0,25 983,76 0,26	1,19 1,20 1,21 1,22	0,23 983,29 0,24 983,05 0,25 982,80 0,26 982,54 0,27	1,17 1,18 1,19 1,20
25	988,63	1,32	987,31	1,29	986,02	1,27	984,75	1,25	983,50	1,23	982,27	1,21
26 27 28 29	0,24 988,39 0,26 988,13 0,27 987,86 0,28 987,58 0,28	1,33 1,33 1,34 1,34	0,25 987,06 0,26 986,80 0,28 986,52 0,28 986,24 0,29	1,30 1,31 1,31 1,32	0,26 985,76 0,27 985,49 0,28 985,21 0,29 984,92 0,29	1,28 1,29 1,29 1,29	0,27 984,48 0,28 984,20 0,28 983,92 0,29 983,63 0,30	1,25 1,26 1,27 1,28	0,27 983,23 0,29 982,94 0,29 982,65 0,30 982,35 0,31	1,24 1,24 1,25 1,26	0,28 981,99 0,29 981,70 0,30 981,40 0,31 981,09 0,32	1,22 1,23 1,23 1,24
30	987,29	1,34	985,95	1,32	984,63	1,30	983,33	1,29	982,04	1,27	980,77	1,25
31 32 33 34	0,30 986,99 0,31 986,68 0,31 986,37 0,33 986,04 0,33	1,35 1,36 1,36 1,36	0,31 985,64 0,31 985,33 0,32 985,01 0,33 984,68 0,33	1,33 1,33 1,34 1,34	0,31 984,31 0,31 984,00 0,33 983,67 0,33 983,34 0,33	1,30 1,31 1,31 1,32	0,32 983,01 0,32 982,69 0,33 982,36 0,34 982,02 0,34	1,29 1,30 1,31 1,31	0,32 981,72 0,33 981,39 0,34 981,05 0,34 980,71 0,34	1,27 1,28 1,28 1,29	0,32 980,45 0,34 980,11 0,34 979,77 0,35 979,42 0,35	1,26 1,26 1,27 1,28
35	985,71	1,36	984,35	1,34	983,01	1,33	981,68	1,31	980,37	1,30	979,07	1,29
36 37 38 39	0,34 985,37 0,35 985,02 0,36 984,66 0,37 984,29 0,38	1,36 1,37 1,37 1,37	0,34 984,01 0,35 983,65 0,36 983,29 0,37 982,92 0,38	1,35 1,35 1,36 1,36	0,35 982,66 0,36 982,30 0,37 981,93 0,37 981,56 0,38	1,33 1,33 1,34 1,34	0,35 981,33 0,36 980,97 0,38 980,59 0,38 980,22 0,39	1,32 1,32 1,32 1,33	0,36 980,01 0,36 979,65 0,38 979,27 0,38 978,89 0,39	1,31 1,32 1,32 1,33	0,37 978,70 0,37 978,33 0,38 977,95 0,39 977,56 0,39	1,29 1,30 1,31 1,31
40	983,91	1,37	982,54	1,36	981,18	1,35	979,83	1,33	978,50	1,33	977,17	1,32

3.3 lentelės tęsinys

t,^0C	Etilo alkoholio koncentracija, tūrio %
	10		11		12		13		14		15
0	986,63	1,00	985,63	0,96	984,67	0,92	983,75	0,87	982,88	0,84	982,04	0,81
1 2 3 4	-0,03 986,66 -0,02 986,68 0,00 986,68 0,01 986,67 0,02	1,01 1,02 1,03 1,04	-0,02 985,65 -0,01 985,66 0,01 985,65 0,02 985,63 0,03	0,97 0,98 0,99 1,00	-0,01 984,68 0,00 984,68 0,02 984,66 0,03 984,63 0,05	0,93 0,94 0,96 0,97	0,00 983,75 0,01 983,74 0,04 983,70 0,04 983,66 0,06	0,89 0,91 0,92 0,93	0,02 982,86 0,03 982,83 0,05 982,78 0,05 982,73 0,08	0,86 0,87 0,88 0,90	0,04 982,00 0,04 981,96 0,06 981,90 0,07 981,83 0,09	0,82 0,84 0,86 0,87
5	986,65	1,05	985,60	1,02	984,58	0,98	983,60	0,95	982,65	0,91	981,74	0,89
6 7 8 9	0,04 986,61 0,05 986,56 0,07 986,49 0,08 986,41 0,10	1,07 1,08 1,09 1,09	0,06 985,54 0,06 985,48 0,08 985,40 0,08 985,32 0,11	1,02 1,04 1,05 1,06	0,06 984,52 0,08 984,44 0,09 984,35 0,09 984,26 0,12	0,99 1,00 1,01 1,03	0,07 983,53 0,09 983,44 0,10 983,34 0,11 983,23 0,13	0,96 0,97 0,98 1,00	0,08 982,57 0,10 982,47 0,11 982,36 0,13 982,23 0,14	0,93 0,95 0,96 0,97	0,10 981,64 0,12 981,52 0,12 981,40 0,14 981,26 0,16	0,90 0,92 0,94 0,95
10	986,31	1,10	985,21	1,07	984,14	1,04	983,10	1,01	982,09	0,99	981,10	0,96
11 12 13 14	0,10 986,21 0,12 986,09 0,13 985,96 0,15 985,81 0,15	1,11 1,12 1,13 1,14	0,11 985,10 0,13 984,97 0,14 984,83 0,16 984,67 0,16	1,08 1,09 1,10 1,11	0,12 984,02 0,14 983,88 0,15 983,73 0,17 983,56 0,17	1,05 1,06 1,07 1,08	0,13 982,97 0,15 982,82 0,16 982,66 0,18 982,48 0,18	1,03 1,04 1,05 1,06	0,15 981,94 0,16 981,78 0,17 981,61 0,19 981,42 0,19	1,00 1,01 1,03 1,04	0,16 980,94 0,17 980,77 0,19 980,58 0,20 980,38 0,20	0,97 0,99 1,00 1,02
15	985,66	1,15	984,51	1,12	983,39	1,09	982,30	1,07	981,23	1,05	980,18	1,04
16 17 18 19	0,17 985,49 0,17 985,32 0,19 985,13 0,20 984,93 0,22	1,16 1,17 1,17 1,18	0,18 984,33 0,18 984,15 0,19 983,96 0,21 983,75 0,23	1,13 1,14 1,15 1,16	0,19 983,20 0,19 983,01 0,20 982,81 0,22 982,59 0,24	1,10 1,11 1,13 1,14	0,20 982,10 0,20 981,90 0,22 981,68 0,23 981,45 0,24	1,08 1,09 1,11 1,12	0,21 981,02 0,21 980,81 0,24 980,57 0,24 980,33 0,25	1,06 1,08 1,09 1,10	0,22 979,96 0,23 979,73 0,25 979,48 0,25 979,23 0,26	1,05 1,06 1,07 1,08
20	984,71	1,19	983,52	1,17	982,35	1,14	981,21	1,13	980,08	1,11	978,97	1,10

3.3 lentelės tęsinys

t,^0C	Etilo alkoholio koncentracija, tūrio %
	16		17		18		19		20		21
0	981,23	0,77	980,46	0,75	979,71	0,73	978,98	0,72	978,26	0,70	977,56	0,70
1 2 3 4	0,05 981,18 0,06 981,12 0,08 981,04 0,08 980,96 0,11	0,79 0,81 0,83 0,85	0,07 980,39 0,08 980,31 0,10 980,21 0,10 980,11 0,13	0,77 0,79 0,81 0,83	0,09 979,62 0,10 979,52 0,12 979,40 0,12 979,28 0,14	0,75 0,77 0,79 0,81	0,11 978,87 0,12 978,75 0,14 978,61 0,14 978,47 0,16	0,74 0,76 0,78 0,80	0,13 978,13 0,14 977,99 0,16 977,83 0,16 977,67 0,18	0,72 0,75 0,77 0,79	0,15 977,41 0,17 977,24 0,18 977,06 0,18 976,88 0,20	0,72 0,74 0,76 0,79
5	980,85	0,87	979,98	0,84	979,14	0,83	978,31	0,82	977,49	0,81	976,68	0,81
6 7 8 9	0,11 980,74 0,14 980,60 0,14 980,46 0,15 980,31 0,17	0,89 0,90 0,92 0,93	0,13 979,85 0,15 979,70 0,16 979,54 0,16 979,38 0,18	0,86 0,88 0,90 0,92	0,15 978,99 0,17 978,82 0,18 978,64 0,18 978,48 0,19	0,85 0,87 0,88 0,90	0,17 978,14 0,19 977,95 0,19 977,76 0,20 977,56 0,21	0,84 0,85 0,87 0,89	0,19 977,30 0,20 977,10 0,21 976,89 0,22 976,67 0,23	0,83 0,85 0,87 0,89	0,21 976,47 0,22 976,25 0,23 976,02 0,24 975,78 0,25	0,83 0,85 0,87 0,89
10	980,14	0,94	979,20	0,93	978,27	0,92	977,35	0,91	976,44	0,91	975,53	0,91
11 12 13 14	0,17 979,97 0,19 979,78 0,20 979,58 0,22 979,36 0,22	0,96 0,98 0,99 1,00	0,19 979,01 0,21 978,80 0,21 978,59 0,23 978,36 0,24	0,95 0,96 0,98 0,99	0,21 978,06 0,22 977,84 0,23 977,61 0,24 977,37 0,26	0,94 0,96 0,97 0,99	0,23 977,12 0,24 976,88 0,24 976,64 0,26 976,38 0,27	0,93 0,95 0,97 0,98	0,25 976,19 0,26 975,93 0,26 975,67 0,27 975,40 0,28	0,93 0,94 0,96 0,98	0,27 975,26 0,27 974,99 0,28 974,71 0,29 974,42 0,30	0,92 0,94 0,96 0,98
15	979,14	1,02	978,12	1,01	977,11	1,00	976,11	0,99	975,12	1,00	974,12	1,00
16 17 18 19	0,23 978,91 0,24 978,67 0,26 978,41 0,26 978,15 0,28	1,04 1,05 1,06 1,07	0,25 977,87 0,25 977,62 0,27 977,35 0,27 977,08 0,29	1,02 1,04 1,05 1,07	0,26 976,85 0,27 976,58 0,28 976,30 0,29 976,01 0,30	1,02 1,04 1,05 1,06	0,28 975,83 0,29 975,54 0,29 975,25 0,30 974,94 0,31	1,01 1,02 1,04 1,05	0,30 974,82 0,30 974,52 0,31 974,21 0,32 973,89 0,33	1,01 1,02 1,04 1,06	0,31 973,81 0,31 973,50 0,33 973,17 0,34 972,83 0,35	1,02 1,04 1,05 1,06
20	977,87	1,08	976,79	1,08	975,71	1,08	974,63	1,07	973,56	1,08	972,48	1,08

3.3 lentelės tęsinys

t,^0C	Etilo alkoholio koncentracija, tūrio %
	10		11		12		13		14		15
20	984,71	1,19	983,52	1,17	982,35	1,14	981,21	1,13	980,08	1,11	978,97	1,10
21 22 23 24	0,23 984,48 0,23 984,25 0,24 984,01 0,25 983,76 0,26	1,19 1,20 1,21 1,22	0,23 983,29 0,24 983,05 0,25 982,80 0,26 982,54 0,27	1,17 1,18 1,19 1,20	0,23 982,12 0,25 981,97 0,26 981,61 0,27 981,34 0,28	1,16 1,17 1,18 1,19	0,25 980,96 0,26 980,70 0,27 980,43 0,28 980,15 0,29	1,14 1,15 1,16 1,17	0,26 979,82 0,27 979,55 0,28 979,27 0,29 978,98 0,30	1,13 1,14 1,15 1,16	0,28 978,69 0,28 978,41 0,29 978,12 0,30 977,82 0,31	1,11 1,12 1,13 1,14
25	983,50	1,23	982,27	1,21	981,06	1,20	979,86	1,18	978,68	1,17	977,51	1,16
26 27 28 29	0,27 983,23 0,29 982,94 0,29 982,65 0,30 982,35 0,31	1,24 1,24 1,25 1,26	0,28 981,99 0,29 981,70 0,30 981,40 0,31 981,09 0,32	1,22 1,23 1,23 1,24	0,29 980,77 0,30 980,47 0,30 980,17 0,32 979,85 0,33	1,20 1,21 1,22 1,23	0,29 979,57 0,31 979,26 0,31 978,95 0,33 978,62 0,34	1,19 1,20 1,21 1,22	0,30 978,38 0,32 978,06 0,32 977,74 0,34 977,40 0,35	1,18 1,19 1,20 1,21	0,31 977,20 0,33 976,87 0,33 976,54 0,35 976,19 0,36	1,17 1,18 1,20 1,21
30	982,04	1,27	980,77	1,25	979,52	1,24	978,28	1,23	977,05	1,22	975,83	1,21
31 32 33 34	0,32 981,72 0,33 981,39 0,34 981,05 0,34 980,71 0,34	1,27 1,28 1,28 1,29	0,32 980,45 0,34 980,11 0,34 979,77 0,35 979,42 0,35	1,26 1,26 1,27 1,28	0,33 979,19 0,34 978,85 0,35 978,50 0,36 978,14 0,36	1,25 1,26 1,26 1,27	0,34 977,94 0,35 977,59 0,35 977,24 0,37 976,87 0,37	1,24 1,25 1,26 1,27	0,35 976,70 0,36 976,34 0,36 975,78 0,38 975,60 0,38	1,23 1,24 1,25 1,26	0,36 975,47 0,37 975,10 0,37 974,73 0,39 974,34 0,39	1,22 1,23 1,25 1,26
35	980,37	1,30	979,07	1,29	977,78	1,28	976,50	1,28	975,22	1,27	973,95	1,27
36 37 38 39	0,36 980,01 0,36 979,65 0,38 979,27 0,38 978,89 0,39	1,31 1,32 1,32 1,33	0,37 978,70 0,37 978,33 0,38 977,95 0,39 977,56 0,39	1,29 1,30 1,31 1,31	0,37 977,41 0,38 977,03 0,39 976,64 0,39 976,25 0,40	1,29 1,30 1,30 1,31	0,38 976,12 0,39 975,73 0,39 975,34 0,40 974,94 0,41	1,28 1,29 1,30 1,31	0,38 974,84 0,40 974,44 0,40 974,04 0,41 973,63 0,42	1,28 1,29 1,30 1,31	0,39 973,56 0,41 973,15 0,41 972,74 0,42 972,32 0,42	1,28 1,29 1,30 1,31
40	978,50	1,33	977,17	1,32	975,85	1,32	974,53	1,32	973,21	1,31	971,90	1,32

3.3 lentelės tęsinys

t,^0C	Etilo alkoholio koncentracija, tūrio %
	16		17		18		19		20		21
20	977,87	1,08	976,79	1,08	975,71	1,08	974,63	1,07	973,56	1,08	972,48	1,08
21 22 23 24	0,29 977,58 0,29 977,29 0,30 976,99 0,31 976,68 0,32	1,10 1,12 1,13 1,14	0,31 976,48 0,31 976,17 0,31 975,86 0,32 975,54 0,33	1,09 1,10 1,12 1,13	0,32 975,39 0,32 975,07 0,33 974,74 0,33 974,41 0,35	1,09 1,10 1,11 1,13	0,33 974,30 0,33 973,97 0,34 973,63 0,35 973,28 0,36	1,09 1,10 1,12 1,13	0,35 973,21 0,35 972,86 0,35 972,51 0,36 972,15 0,38	1,09 1,10 1,12 1,14	0,36 972,12 0,36 971,76 0,37 971,39 0,38 971,01 0,39	1,09 1,11 1,13 1,14
25	976,36	1,15	975,21	1,15	974,06	1,14	972,92	1,15	971,77	1,15	970,62	1,15
26 27 28 29	0,33 976,03 0,34 975,69 0,35 975,34 0,36 974,98 0,37	1,16 1,18 1,19 1,20	0,34 974,87 0,36 974,51 0,36 974,15 0,37 973,78 0,38	1,16 1,17 1,19 1,20	0,35 973,71 0,37 973,34 0,38 972,96 0,38 972,58 0,38	1,16 1,17 1,18 1,19	0,37 972,55 0,38 972,17 0,39 971,78 0,39 971,39 0,40	1,16 1,17 1,18 1,19	0,38 971,39 0,39 921,00 0,40 970,60 0,40 970,20 0,42	1,16 1,18 1,19 1,21	0,39 970,23 0,41 969,82 0,41 969,41 0,42 968,99 0,43	1,17 1,18 1,20 1,21
30	974,62	1,21	973,41	1,21	972,20	1,21	970,99	1,21	969,78	1,22	968,56	1,23
31 32 33 34	0,37 974,25 0,35 973,87 0,39 973,48 0,40 973,08 0,40	1,22 1,23 1,24 1,25	0,38 973,03 0,39 972,64 0,40 972,24 0,41 971,83 0,41	1,22 1,23 1,24 1,25	0,39 971,81 0,40 971,41 0,41 971,00 0,42 970,58 0,43	1,22 1,24 1,25 1,26	0,40 970,59 0,42 970,17 0,42 969,75 0,43 969,32 0,44	1,23 1,24 1,25 1,27	0,42 969,36 0,43 968,93 0,43 968,50 0,45 968,05 0,45	1,23 1,25 1,27 1,27	0,43 968,13 0,45 967,68 0,45 967,23 0,45 966,78 0,47	1,24 1,26 1,27 1,29
35	972,68	1,26	971,42	1,27	970,15	1,27	968,88	1,28	967,60	1,29	966,31	1,30
36 37 38 39	0,40 972,28 0,42 971,86 0,42 971,44 0,43 971,01 0,43	1,28 1,29 1,30 1,31	0,42 971,00 0,43 970,57 0,43 970,14 0,44 969,70 0,45	1,28 1,29 1,30 1,31	0,43 969,72 0,44 969,28 0,44 968,84 0,45 968,39 0,47	1,28 1,29 1,31 1,32	0,44 968,44 0,45 967,99 0,46 967,58 0,46 967,07 0,48	1,29 1,30 1,31 1,33	0,45 967,15 0,46 966,69 0,47 966,22 0,48 965,74 0,49	1,31 1,32 1,33 1,34	0,47 965,84 0,47 965,37 0,48 964,89 0,49 964,40 0,50	1,31 1,32 1,34 1,36
40	970,58	1,33	969,25	1,33	967,92	1,33	966,59	1,34	965,25	1,35	963,90	1,37

3.3 lentelės tęsinys

t,^0C	Etilo alkoholio koncentracija, tūrio %
	20		21		22		23		24		25
0	978,26	0,70	977,56	0,70	976,86	0,69	976,17	0,70	975,47	0,72	974,75	0,72
1 2 3 4	0,13 978,13 0,14 977,99 0,16 977,83 0,16 977,67 0,18	0,72 0,75 0,77 0,79	0,15 977,41 0,17 977,24 0,18 977,06 0,18 976,88 0,20	0,72 0,74 0,76 0,79	0,17 976,69 0,19 976,50 0,20 976,30 0,21 976,09 0,22	0,72 0,74 0,77 0,79	0,20 975,97 0,21 975,76 0,23 975,53 0,23 975,30 0,24	0,72 0,75 0,77 0,79	0,22 975,25 0,24 975,01 0,25 974,76 0,25 974,51 0,26	0,74 0,76 0,78 0,81	0,24 974,51 0,26 974,25 0,27 973,98 0,28 973,70 0,28	0,75 0,78 0,80 0,82
5	977,49	0,81	976,68	0,81	975,87	0,81	975,06	0,81	974,25	0,83	973,42	0,84
6 7 8 9	0,19 977,30 0,20 976,10 0,21 976,89 0,22 976,67 0,23	0,83 0,85 0,87 0,89	0,21 976,47 0,22 976,25 0,23 976,02 0,24 975,78 0,25	0,83 0,85 0,87 0,89	0,23 975,64 0,24 975,40 0,25 975,15 0,26 974,89 0,27	0,83 0,85 0,87 0,89	0,25 974,81 0,26 974,55 0,27 974,28 0,28 974,00 0,29	0,84 0,86 0,88 0,90	0,27 973,97 0,28 973,69 0,29 973,40 0,30 973,10 0,31	0,85 0,87 0,89 0,91	0,30 973,12 0,30 972,82 0,31 972,51 0,32 972,19 0,33	0,87 0,89 0,91 0,93
10	976,44	0,91	975,53	0,91	974,62	0,91	973,71	0,92	972,79	0,93	971,86	0,95
11 12 13 14	0,25 976,11 0,26 975,93 0,26 975,67 0,27 975,40 0,28	0,93 0,94 0,96 0,98	0,27 975,26 0,27 974,99 0,28 974,71 0,29 974,42 0,30	0,92 0,94 0,96 0,98	0,28 974,34 0,29 974,05 0,30 973,75 0,31 973,44 0,32	0,93 0,95 0,97 0,99	0,30 973,41 0,31 973,10 0,32 972,78 0,33 972,45 0,33	0,94 0,96 0,98 1,00	0,32 972,47 0,33 972,14 0,34 971,80 0,35 971,45 0,35	0,95 0,97 0,99 1,01	0,34 971,52 0,35 971,17 0,36 970,81 0,37 970,44 0,37	0,97 0,99 1,01 1,02
15	975,12	1,00	974,12	1,00	973,12	1,00	972,12	1,02	971,10	1,03	970,07	1,04
16 17 18 19	0,30 974,82 0,30 974,52 0,31 974,21 0,32 973,89 0,33	1,01 1,02 1,04 1,06	0,31 973,81 0,31 973,50 0,33 973,17 0,34 972,83 0,35	1,02 1,04 1,05 1,06	0,33 972,79 0,33 972,46 0,34 972,12 0,35 971,77 0,37	1,02 1,04 1,06 1,07	0,35 971,77 0,35 971,42 0,36 971,06 0,36 970,70 0,39	1,03 1,05 1,07 1,09	0,36 970,74 0,37 970,37 0,38 969,99 0,38 969,61 0,40	1,05 1,06 1,08 1,10	0,38 969,69 0,38 969,31 0,40 968,91 0,40 968,51 0,41	1,06 1,08 1,10 1,11
20	973,56	1,08	972,48	1,08	971,40	1,09	970,31	1,10	969,21	1,11	968,10	1,13

3.3 lentelės tęsinys

t,^0C	Etilo alkoholio koncentracija, tūrio %
	26		27		28		29		30		31
0	974,03	0,74	973,29	0,77	972,52	0,80	971,72	0,83	970,89	0,87	970,02	0,90
1 2 3 4	0,27 973,76 0,29 973,47 0,29 973,18 0,30 972,88 0,30	0,77 0,79 0,82 0,84	0,30 972,99 0,31 972,68 0,32 972,36 0,32 972,04 0,33	0,79 0,82 0,84 0,86	0,32 972,20 0,34 971,86 0,34 971,52 0,34 971,18 0,35	0,83 0,85 0,87 0,89	0,35 971,37 0,36 971,01 0,36 970,65 0,36 970,29 0,38	0,85 0,87 0,89 0,92	0,37 970,52 0,38 970,14 0,38 969,76 0,39 969,37 0,40	0,89 0,92 0,94 0,96	0,39 969,63 0,41 960,22 0,40 968,82 0,42 968,40 0,41	0,93 0,96 0,98 1,00
5	972,58	0,86	971,71	0,88	970,83	0,92	969,91	0,94	968,97	0,95	967,99	1,02
6 7 8 9	0,33 972,25 0,32 971,93 0,33 971,60 0,34 971,26 0,35	0,88 0,91 0,93 0,95	0,34 971,37 0,35 971,02 0,35 970,67 0,36 970,31 0,37	0,91 0,93 0,95 0,98	0,37 970,46 0,37 970,09 0,37 969,72 0,39 969,33 0,39	0,94 0,96 0,98 1,00	0,39 969,52 0,39 969,13 0,39 968,74 0,41 968,33 0,41	0,96 0,98 1,01 1,03	0,41 968,56 0,41 968,15 0,42 967,73 0,43 967,30 0,43	1,00 1,02 1,04 1,06	0,43 967,56 0,43 967,13 0,44 966,69 0,45 966,24 0,45	1,04 1,06 1,08 1,09
10	970,91	0,97	969,94	1,00	968,94	1,02	967,92	1,05	966,87	1,08	965,79	1,11
11 12 13 14	0,36 970,55 0,37 970,18 0,38 969,80 0,38 969,42 0,39	0,99 1,01 1,02 1,04	0,38 969,56 0,39 969,17 0,39 968,78 0,40 968,38 0,41	1,02 1,03 1,05 1,07	0,40 968,54 0,40 968,14 0,41 967,73 0,42 967,31 0,43	1,04 1,06 1,08 1,10	0,42 967,50 0,42 967,08 0,43 966,65 0,44 966,21 0,45	1,07 1,09 1,11 1,12	0,44 966,43 0,44 965,99 0,45 965,54 0,45 965,09 0,47	1,09 1,11 1,13 1,15	0,45 965,34 0,46 964,88 0,47 964,41 0,47 963,94 0,49	1,13 1,15 1,17 1,19
15	969,03	1,06	967,97	1,09	966,88	1,12	965,76	1,14	964,62	1,17	963,45	1,20
16 17 18 19	0,40 968,63 0,40 968,23 0,42 967,81 0,42 967,39 0,42	1,08 1,10 1,11 1,13	0,42 967,55 0,42 967,13 0,43 966,70 0,44 966,26 0,45	1,11 1,12 1,14 1,16	0,44 966,44 0,43 966,01 0,45 965,56 0,46 965,10 0,46	1,13 1,15 1,17 1,18	0,45 965,31 0,45 964,86 0,47 964,39 0,47 963,92 0,48	1,16 1,18 1,19 1,21	0,47 964,15 0,47 963,68 0,48 963,20 0,49 962,71 0,50	1,19 1,21 1,23 1,24	0,49 962,96 0,49 962,47 0,50 961,97 0,50 961,47 0,52	1,22 1,24 1,26 1,28
20	966,97	1,14	965,81	1,17	964,64	1,20	963,44	1,23	962,21	1,26	960,95	1,29

3.3 lentelės tęsinys

t,^0C	Etilo alkoholio koncentracija, tūrio %
	20		21		22		23		24		25
20	973,56	1,08	972,48	1,08	971,40	1,09	970,31	1,10	969,21	1,11	968,10	1,13
21 22 23 24	0,35 973,21 0,35 972,86 0,35 972,51 0,36 972,15 0,38	1,09 1,10 1,12 1,14	0,36 972,12 0,36 971,76 0,37 971,39 0,38 971,01 0,39	1,09 1,11 1,13 1,14	0,37 971,03 0,38 970,65 0,39 970,26 0,39 969,87 0,40	1,11 1,12 1,13 1,15	0,39 969,92 0,39 969,53 0,40 969,13 0,41 968,72 0,42	1,11 1,13 1,15 1,16	0,40 968,81 0,41 968,40 0,42 967,98 0,42 967,56 0,44	1,13 1,15 1,16 1,18	0,42 967,68 0,43 967,25 0,43 966,82 0,44 966,38 0,45	1,15 1,16 1,18 1,20
25	971,77	1,15	970,62	1,15	969,47	1,17	968,30	1,18	967,12	1,19	965,93	1,21
26 27 28 29	0,38 971,39 0,39 971,00 0,40 970,60 0,40 970,20 0,42	1,16 1,18 1,19 1,21	0,39 970,23 0,41 969,82 0,41 969,41 0,42 968,99 0,43	1,17 1,18 1,20 1,21	0,41 969,06 0,42 968,64 0,43 968,21 0,43 967,78 0,45	1,18 1,20 1,21 1,23	0,42 967,88 0,44 967,44 0,44 967,00 0,45 966,55 0,46	1,20 1,21 1,23 1,24	0,44 966,68 0,45 966,23 0,46 965,77 0,46 965,31 0,47	1,21 1,22 1,24 1,26	0,46 965,47 0,46 965,01 0,48 964,53 0,48 964,05 0,48	1,23 1,25 1,26 1,27
30	969,78	1,22	968,56	1,23	967,33	1,24	966,09	1,25	964,84	1,27	963,57	1,29
31 32 33 34	0,42 969,36 0,43 968,93 0,43 968,50 0,45 968,05 0,45	1,23 1,25 1,27 1,27	0,43 968,13 0,45 967,68 0,45 967,23 0,45 966,78 0,47	1,24 1,25 1,27 1,29	0,44 966,89 0,46 966,43 0,47 965,96 0,47 965,49 0,48	1,25 1,27 1,28 1,30	0,45 965,64 0,48 965,16 0,48 964,68 0,49 964,19 0,49	1,27 1,28 1,30 1,31	0,47 964,37 0,49 963,88 0,50 963,38 0,50 962,88 0,50	1,29 1,30 1,31 1,32	0,49 963,08 0,50 962,58 0,51 962,07 0,51 961,56 0,52	1,31 1,32 1,33 1,34
35	967,60	1,29	996,31	1,30	965,01	1,31	963,70	1,32	962,38	1,34	961,04	1,36
36 37 38 39	0,45 967,15 0,46 966,69 0,47 966,22 0,48 965,74 0,49	1,31 1,32 1,33 1,34	0,47 965,84 0,47 965,37 0,48 964,89 0,49 964,40 0,50	1,31 1,32 1,34 1,36	0,48 964,53 0,48 964,05 0,50 963,55 0,51 963,04 0,51	1,32 1,34 1,35 1,36	0,49 963,21 0,50 962,71 0,51 962,20 0,52 961,68 0,53	1,34 1,36 1,37 1,38	0,51 961,87 0,52 961,35 0,52 960,83 0,53 960,30 0,54	1,36 1,37 1,39 1,40	0,53 960,51 0,53 959,98 0,54 959,44 0,54 958,90 0,55	1,37 1,39 1,40 1,42
40	965,25	1,35	963,90	1,37	962,53	1,38	961,15	1,39	959,76	1,41	958,35	1,43

3.3 lentelės tęsinys

t,^0C	Etilo alkoholio koncentracija, tūrio %
	26		27		28		29		30		31
20	966,97	1,16	965,81	1,17	964,64	1,20	963,44	1,23	962,21	1,26	960,95	1,29
21 22 23 24	0,44 966,53 0,44 966,09 0,45 965,64 0,46 965,18 0,46	1,17 1,19 1,20 1,22	0,45 965,36 0,46 964,90 0,46 964,44 0,48 963,96 0,48	1,19 1,21 1,23 1,24	0,47 964,17 0,48 963,69 0,48 963,21 0,49 962,72 0,50	1,22 1,23 1,25 1,27	0,49 962,95 0,49 962,46 0,50 961,96 0,51 961,45 0,51	1,24 1,26 1,28 1,29	0,50 961,71 0,51 961,20 0,52 960,68 0,53 960,16 0,53	1,28 1,29 1,30 1,32	0,52 960,43 0,52 959,91 0,53 959,38 0,54 958,84 0,54	1,31 1,32 1,33 1,34
25	964,72	1,24	963,48	1,26	962,22	1,28	960,94	1,31	959,63	1,33	958,30	1,36
26 27 28 29	0,48 964,24 0,48 963,76 0,49 963,27 0,49 962,78 0,50	1,25 1,27 1,28 1,29	0,49 962,99 0,50 962,49 0,50 961,99 0,50 961,49 0,52	1,27 1,28 1,30 1,32	0,50 961,72 0,51 961,21 0,52 960,69 0,52 960,17 0,53	1,30 1,31 1,32 1,34	0,52 960,42 0,52 959,90 0,53 959,37 0,54 958,83 0,54	1,32 1,33 1,35 1,36	0,53 959,10 0,53 958,57 0,55 958,02 0,55 957,47 0,56	1,35 1,37 1,38 1,39	0,55 957,75 0,55 957,20 0,56 956,64 0,56 956,08 0,58	1,38 1,40 1,41 1,43
30	962,28	1,31	960,97	1,33	959,64	1,35	958,29	1,38	956,91	1,41	955,50	1,44
31 32 33 34	0,51 961,77 0,51 961,26 0,52 960,74 0,52 960,22 0,54	1,32 1,33 1,35 1,37	0,52 960,45 0,52 959,93 0,54 959,39 0,54 958,85 0,55	1,34 1,36 1,37 1,38	0,53 959,11 0,54 958,57 0,55 958,02 0,55 957,47 0,57	1,37 1,39 1,40 1,41	0,55 957,74 0,56 957,18 0,56 956,62 0,56 956,06 0,58	1,39 1,40 1,42 1,44	0,56 956,35 0,57 955,78 0,58 955,20 0,58 954,62 0,59	1,43 1,44 1,45 1,47	0,58 954,92 0,58 954,34 0,59 953,75 0,60 953,15 0,60	1,45 1,47 1,48 1,49
35	959,68	1,38	958,30	1,40	956,90	1,42	955,48	1,45	954,03	1,48	952,55	1,50
36 37 38 39	0,54 959,14 0,55 958,59 0,55 958,04 0,56 957,48 0,56	1,39 1,40 1,42 1,43	0,55 957,75 0,56 957,19 0,57 956,62 0,57 956,05 0,58	1,42 1,43 1,44 1,45	0,57 956,33 0,57 955,76 0,58 955,18 0,58 954,60 0,60	1,44 1,45 1,46 1,48	0,59 954,89 0,58 954,31 0,59 953,72 0,60 953,12 0,61	1,46 1,48 1,49 1,50	0,60 953,43 0,60 952,83 0,60 952,23 0,61 951,62 0,62	1,49 1,50 1,51 1,52	0,61 951,94 0,61 951,33 0,61 950,72 0,62 950,10 0,64	1,51 1,52 1,54 1,55
40	956,92	1,45	955,47	1,47	954,00	1,49	952,51	1,51	951,00	1,54	949,49	1,56

3.4 lentelė. Grynų vandens ir etilo alkoholio tirpalų ir vyno distiliatų lūžio rodiklių 20 °C temperatūroje santykiai su etilo alkoholio koncentracija, tūrio %, 20 °C temperatūroje

Lūžio rodiklis 20 ^0С	Etilo alkoholio koncentracija 20 ^0С				Lūžio rodiklis 20 ^0С	Etilo alkoholio koncentracija 20 ^0С
	vandens ir alkoholio mišiniuose		distiliatuose			vandens ir alkoholio mišiniuose		distiliatuose
1,33628 1,33642 1,33656 1,33670 1,33685 1,33699 1,33713 1,33727 1,33742 1,33756 1,33770 1,33784 1,33799 1,33813 1,33827 1,33841 1,33856 1,33870 1,33884 1,33898 1,33912 1,33926 1,33940 1,33955 1,33969 1,33983 1,33997 1,34011 1,34025 1,34039 1,34053 1,34067 1,34081 1,34096 1,34110 1,34124 1,34138 1,34152 1,34166 1,34180 1,34194 1,34208	6,54 6,79 7,05 7,30 7,58 7,83 8,09 8,34 8,62 8,87 9,12 9,36 9,63 9,87 10,12 10,35 10,61 10,86 11,10 11,33 11,47 11,81 12,05 12,30 12,53 12,76 13,00 13,23 13,47 13,70 13,93 14,16 14,41 14,66 14,89 15,13 15,36 15,59 15,83 16,06 16,29 16,52	0,25 0,26 0,25 0,28 0,25 0,26 0,25 0,28 0,25 0,25 0,24 0,27 0,24 0,25 0,23 0,26 0,25 0,24 0,23 0,24 0,24 0,24 0,25 0,23 0,23 0,24 0,23 0,24 0,23 0,23 0,23 0,25 0,25 0,23 0,24 0,23 0,23 0,24 0,23 0,23 0,23 0,24	6,48 6,74 7,00 7,27 7,54 7,79 8,05 8,30 8,56 8,81 9,06 9,30 9,55 9,81 10,05 10,29 10,54 10,78 11,02 11,26 11,50 11,74 11,98 12,22 12,46 12,69 12,92 13,15 13,40 13,62 13,86 14,09 14,32 14,57 14,81 15,06 15,28 15,50 15,74 15,96 16,19 16,41	0,26 0,26 0,27 0,27 0,25 0,26 0,25 0,26 0,25 0,25 0,24 0,25 0,26 0,24 0,24 0,25 0,24 0,24 0,24 0,24 0,24 0,24 0,24 0,24 0,23 0,23 0,23 0,25 0,22 0,24 0,23 0,23 0,25 0,24 0,25 0,22 0,22 0,24 0,22 0,23 0,22 0,24	1,34222 1,34236 1,34250 1,34264 1,34278 1,34291 1,34305 1,34319 1,34333 1,34347 1,34361 1,34375 1,34389 1,34403 1,34417 1,34431 1,34445 1,34458 1,34472 1,34486 1,34500 1,34513 1,34527 1,34541 1,34555 1,34568 1,34582 1,34596 1,34610 1,34623 1,34637 1,34651 1,34665 1,34678 1,34692 1,34706 1,34720 1,34733 1,34747 1,34760 1,34774 1,34788	16,76 16,99 17,22 17,44 17,68 17,89 18,12 18,36 18,59 18,82 19,05 19,28 19,51 19,75 19,98 20,22 20,44 20,65 20,89 21,11 21,34 21,55 21,78 22,00 22,23 22,44 22,67 22,90 23,13 23,33 23,57 23,81 24,04 24,26 24,48 24,72 24,95 25,16 25,40 25,62 25,86 26,10	0,23 0,23 0,22 0,24 0,21 0,23 0,24 0,23 0,23 0,23 0,23 0,23 0,24 0,23 0,24 0,22 0,21 0,24 0,22 0,23 0,21 0,23 0,22 0,23 0,21 0,23 0,23 0,23 0,20 0,24 0,24 0,23 0,22 0,22 0,24 0,23 0,21 0,24 0,22 0,24 0,24 0,22	16,65 16,88 17,12 17,34 17,56 17,78 18,01 18,23 18,46 18,70 18,92 19,17 19,40 19,62 19,86 20,09 20,33 20,54 20,76 20,99 21,21 21,44 21,65 21,87 22,10 22,31 22,54 22,75 22,96 23,17 23,40 23,61 23,85 24,09 24,31 24,56 24,78 25,00 25,23 25,45 25,70 25,93	0,23 0,24 0,22 0,22 0,22 0,23 0,22 0,23 0,24 0,22 0,25 0,23 0,22 0,24 0,23 0,24 0,21 0,22 0,23 0,22 0,23 0,21 0,22 0,23 0,21 0,23 0,21 0,21 0,21 0,23 0,21 0,24 0,24 0,22 0,25 0,22 0,22 0,23 0,22 0,25 0,23 0,22

4. Bendrojo sausojo ekstrakto kiekio nustatymo metodai

4.1. Apibrėžimas:

4.1.1. Bendrasis ekstraktas – tai visų ištirpusių vyne nelakiųjų medžiagų kiekių suma, įskaitant angliavandenius, glicerolį, nelakiąsias rūgštis, azoto junginius, raugines ir spalvines medžiagas, aukštesniuosius alkoholius ir mineralines medžiagas. Paruošimo sąlygos ekstrakto sudėtį turėtų paveikti kiek įmanoma mažiau;

4.1.2. Becukris ekstraktas – tai ekstraktas, kuris gaunamas iš bendrojo ekstrakto kiekio atėmus bendrąjį cukrų kiekį;

4.1.3. Sumažintasis ekstraktas - tai ekstraktas, kuris gaunamas iš bendrojo ekstrakto kiekio atėmus cukrų kiekį, didesnį negu 1 g/dm³, kalio sulfato kiekį, didesnį negu 1 g/dm³, manitolio kiekį (jeigu jo yra), taip pat visų cheminių medžiagų, įdėtų į vyną jo perdirbimo metu, kiekius;

4.1.4. Liekamasis ekstraktas - tai ekstraktas, kuris gaunamas iš sumažintojo ekstrakto kiekio atėmus nutitruojamų rūgščių kiekį, išreikštą vyno rūgšties kiekiu.

4.2. Metodų esmė:

4.2.1. Pamatinis metodas

Liekanos, gautos išgarinus vyną, pasvėrimas. Vynas yra užpilamas ant spirale sulankstyto filtro popieriaus ir pučiant 20-25 mm gyvs. st. slėgio sausą orą išdžiovinamas 70 °C temperatūroje;

4.2.2. Įprastinis (densimetrinis) metodas

Misos bendrojo ekstrakto kiekis apskaičiuojamas netiesiogiai pagal jos tankį, o vyno - pagal jo ir distiliato tankius. Šio ekstrakto kiekis yra išreiškiamas sacharozės kuri, ištirpinta 1 dm³ vandens, sudaro tokio pat tankio tirpalą kaip misa arba vynas, iš kurio pašalintas alkoholis, kiekiu;

4.3. Pamatinis metodas:

4.3.1. Įranga ir priemonės:

4.3.1.1. Džiovinimo kamera

Tai - aliuminis cilindro indas, kurio vidinis skersmuo 27 cm, aukštis 6 cm, su aliuminio dangčiu; indas ir jo dangtis šildomi elektra; 70 ºC temperatūra reguliuojama 1 ºC tikslumu. Metalinis vamzdelis (vidinis skersmuo 25 mm) sujungia džiovinimo kamerą su vakuumo siurbliu, kurio našumas ne mažesnis kaip 50 dm³/h. Oras, iš kurio iš anksto pašalintas vanduo (barbotuojant per koncentruotą 98 proc. sulfato rūgštį) įpučiamas į džiovinimo kamerą cirkuliacijos prietaisu. Šis prietaisas užtikrina, kad oras būtų pašildomas ir tolygiai pasiskirstytų džiovinimo kameros vidiniame paviršiuje. Oro suvartojama (procesas reguliuojamas čiaupu su sukliu), 30-40 dm³/h, liekamasis slėgis džiovinimo kameroje 25 mm gyvs. st. Galima naudoti bet kurias džiovinimo kameras, jeigu jos atitinka 4.3.1.1 p. aprašytus reikalavimus;

4.3.1.2. Biuksai

Biuksai iš nerūdijančio plieno (vidinis skersmuo 60 mm, aukštis 25 mm) su sandariai užsidarančiais aliuminio dangteliais. Į kiekvieną biuksą dedama po 4-4,5 g filtro popieriaus, sukarpyto į sulankstytas 22 mm aukščio juosteles. Šis popierius turi būti 8 h apdorotas druskos rūgšties tirpalu (2g/dm³), penkis kartus nuplautas vandeniu ir išdžiovintas ore;

4.3.1.3. Įrangos ir prietaisų patikrinimas

Biuksų hermetiškumo patikrinimas. Po atvėsinimo eksikatoriuje su sulfato rūgštimi biuksas su išdžiovintu filtro popieriumi ir uždengtas dangčiu paliekamas laboratorijoje kambario temperatūroje. Jo masė neturi padidėti daugiau nei 1 mg/h.

Išdžiovinimo laipsnio patikrinimas. 100 g sacharozės tirpalo turi būti 100 ±1 g/dm³ ekstrakto.

Pieno rūgšties tirpale turi būti ne mažiau kaip 9,5 g/dm³ ekstrakto.

Pastariesiems dviem reikalavimams patenkinti sutrumpinamas ar prailginamas džiovinimo laikas ir sumažinamas ar padidinamas pučiamo sauso oro kiekis.

PASTABA. Pieno rūgšties tirpalas turi būti paruoštas taip: 10 cm³ pieno rūgšties ištirpinama 100 cm³ vandens. Šis tirpalas, įpiltas į biuksą, 4 h kaitinamas verdančio vandens vonioje. Kai tūris yra mažesnis kaip 50 cm³, įpilama distiliuoto vandens. Liekana praskiedžiama iki 1 dm³ ir 10 cm³ šio tirpalo pieno rūgšties titruojama 0,1 M šarmo tirpalu. Tirpalo koncentracija sureguliuojama iki 10 g/dm³;

4.3.2. Analizė:

4.3.2.1. Biukso pasvėrimas

Biuksas su popieriumi dedamas į džiovinimo kamerą 1 h. Išjungiamas vakuumo siurblys, biuksas uždengiamas dangteliu iškart po to, kai džiovinimo kamera atidaroma. Atvėsintas eksikatoriuje biuksas pasveriamas 0,1 mg tikslumu. Tuščio biukso masė pažymima p₀, g;

4.3.2.2. Matavimas

Į pasvertą biuksą įpilama 10 cm³ misos arba vyno, kuriuos filtro popierius turi visiškai sugerti. Biuksas 2 h (arba laikui, nustatytam kontrolinio bandymo metu) dedamas į džiovinimo kamerą, po to pasveriamas pagal 4.3.2.1 p. reikalavimus ir užrašoma jo masė p, g.

PASTABA. Tiriant misą arba labai saldų vyną, siūloma sverti paimtą mėginį;

4.3.3. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška

Bendrojo ekstrakto kiekis, g/dm³, apskaičiuojamas pagal formulę (p-p₀)´100. Tiriant misą arba labai saldų vyną, paimtas mėginys pasveriamas, o bendrojo ekstrakto kiekis, g/dm³, apskaičiuojamas pagal formulę:

(p–p₀)´ρ₂₀/P´1000;

čia P – paimto mėginio masė, g; ρ₂₀ – misos arba vyno tūrio masė, g/cm³;

4.3.4. Rezultatų išraiška

Bendrojo ekstrakto kiekis išreiškiamas g/dm³ vieno skaičiaus po kablelio tikslumu;

4.4. Įprastinis metodas:

4.4.1. Analizė

Nustatomas misos arba vyno tankis (20/20). Vyno be etilo alkoholio tankis d_r nustatomas pagal formulę:

d_r=d_v–d_a+1,000;

čia d_v – vyno tankis (20/20) (su pataisa, taikoma lakiosioms rūgštims); d_a – vyno distiliato tankis (20/20);

d_r=1,00180´(ρ_v -ρ_a)+1,000;

čia ρ_v – vyno tūrio masė 20 ºC temperatūroje (su pataisa, taikoma lakiosioms rūgštims); ρ_a – vyno distiliato tūrio masė 20 ºC temperatūroje, surasta 4.1 lentelėje;

4.4.2. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška

4.1 lentelėje randamas bendrojo ekstrakto kiekis, g/dm³ pagal misos arba bealkoholio vyno tankį (20 ºC/20 ºC). Bendrojo ekstrakto kiekis išreiškiamas g/dm³ vieno skaičiaus po kablelio tikslumu.

4.1 lentelė. Ekstrakto kiekio apskaičiavimo duomenys, g/dm³

Tankis, 2 sk. po kablelio	3-čiasis skaičius po kablelio
	0	1	2	3	4	5	6	7	8	9
1,00	0	2,6	5,1	7,7	10,3	12,9	15,4	18,0	20,6	23,2
1,01	25,8	28,4	31,0	33,6	36,2	38,8	41,3	43,9	46,5	49,1
1,02	51,7	54,3	56,9	59,5	62,1	64,7	67,3	69,9	72,5	75,1
1,03	77,7	80,3	82,9	85,5	88,1	90,7	93,3	95,9	98,5	101,1
1,04	103,7	106,3	109,0	111,6	114,2	116,8	119,4	122,0	124,6	127,2
1,05	129,8	132,4	135,0	137,6	140,3	142,9	145,5	148,1	150,7	153,3
1,06	155,9	158,6	161,2	163,8	166,4	169,0	171,6	174,3	176,9	179,5
1,07	182,1	184,8	187,4	190,0	192,6	195,2	197,8	200,5	203,1	205,8
1,08	208,4	211,0	213,6	216,2	218,9	221,5	224,1	226,8	229,4	232,0
1,09	234,7	237,3	239,9	242,5	245,2	247,8	250,4	253,1	255,7	258,4
1,10	261,0	263,6	266,3	268,9	271,5	274,2	276,8	279,5	282,1	284,8
1,11	287,4	290,0	292,7	295,3	298,0	300,6	303,3	305,9	308,6	311,2
1,12	313,9	316,5	319,2	321,8	324,5	327,1	329,8	332,4	335,1	337,8
1,13	340,4	343,0	345,7	348,3	351,0	353,7	356,3	359,0	361,6	364,3
1,14	366,9	369,6	372,3	375,0	377,6	380,3	382,9	385,6	388,3	390,9
1,15	393,6	396,2	398,9	401,6	404,3	406,9	409,6	412,3	415,0	417,6
1,16	420,3	423,0	425,7	428,3	431,0	433,7	436,4	439,0	441,7	444,4
1,17	447,1	449,8	452,4	455,2	457,8	460,5	463,2	465,9	468,6	471,3
1,18	473,9	476,6	479,3	482,0	484,7	487,4	490,1	492,8	495,5	498,2
1,19	500,9	503,5	506,2	508,9	511,6	514,3	517,0	519,7	522,4	525,1
1,20	527,8	-	-	-	-	-	-	-	-	-

4-tasis sk. po kablelio	Ekstrakto kiekis, g/dm^3	4-tasis sk. po kablelio	Ekstrakto kiekis, g/dm^3	4-tasis sk. po kablelio	Ekstrakto kiekis, g/dm^3
1	0,3	4	1,0	7	1,8
2	0,5	5	1,3	8	2,1
3	0,8	6	1,6	9	2,3

5. Redukuojančiųjų cukrų kiekio nustatymo metodai

5.1. Įvadas

Gliukozė ir fruktozė (invertuotasis cukrus) yra pagrindiniai vynuogių ir vyno sacharidai. Kai kurių rūšių vynuogėse yra nemažai ir sacharozės. Cukrų analizė vyne yra viena iš svarbiausių, kadangi nuo jų kiekio priklauso vyno rūšis ir skonis. Paprastai vynuogėse ir vyne yra nustatomas invertuotojo cukraus kiekis. Kartais reikia nustatyti atskirai gliukozės, fruktozės ir sacharozės kiekius. Gliukozė, fruktozė ir jų mišinys priklauso redukuojančiųjų cukrų rūšiai. Šie cukrūs pasižymi redukuojančiu poveikiu šarminiame vario tirpale. Gliukozė - vynuogių cukrus, C₆H₁₂O₆, molekulinė masė 180,16. Tai - bespalviai saldaus skonio kristalai, kurių lydymosi temperatūra 146,5 °C, gerai tirpsta vandenyje, prastai tirpsta etilo alkoholyje ir netirpsta dietilo eteryje. Vynuogėse yra D-gliukozės, kuri būna optiškai aktyvi. D-Gliukozė yra atspari deguonies poveikiui neutraliuose ir silpno rūgštingumo tirpaluose, tačiau skyla šarminiuose tirpaluose. Gliukozė dalyvauja daugelyje medžiagų apykaitos procesų kaip reduktorius. Ji oksiduojama į gliukono rūgštį, redukuojama į sorbitolį. Gliukozės ir fruktozės santykis sunokusiose vynuogėse svyruoja nuo 0,7 iki 1,5. Mielės gliukozę lengvai fermentuoja į etilo alkoholį. Gliukozė yra maždaug tris kartus mažiau saldi negu fruktozė.

D-Gliukozės kiekis sausame stalo vyne būna nuo 0,2 iki 1 g/dm³. Bakterijos gali skaldyti gliukozę ir susidaro pieno bei acto rūgštys. Išlaikant vyno medžiagas su mielėmis, jose padidėja gliukano kiekis, kuris susidaro iš D-gliukozės. Norint kokybiškai nustatyti gliukozę, ji oksiduojama į cukraus rūgštį, kurią galima aptikti pagal sunkiai tirpstančios kalio druskos susidarymą. Gliukozės kiekis nustatomas chromatografijos būdu.

Fruktozė - vaisių cukrus, C₆H₁₂O₆, molekulinė masė 180,16, lydymosi temperatūra 102-104 °C. Ji labai higroskopiška ir ištirpsta vandenyje. Susidaro tirštas sirupas, kuris palyginti neblogai tirpsta karštame etanolyje. Fruktozė - reduktorius. Ji neatspari kaitinimui, rūgščių ir bazių poveikiui, greitai skyla. Silpnai rūgštinėje terpėje iš fruktozės susidaro glikolio ir oksisviesto rūgštys. Fruktozei redukuojantis, susidaro L-manitolis ir L-sorbitolis. Vynuogių sultyse randama iki 100 mg/dm³ fruktozės, sausajame vyne - iki 1-2 g/dm³. Fruktozė turi įtakos vyno skonio susidarymui: esant etilo alkoholio, saldaus skonio pojūtį ji sustiprina, o fenolinių junginių - susilpnina. Norint kokybiškai nustatyti fruktozę, kai esama kitų junginių, ji nusodinama į sunkiai tirpstantį junginį su kalio oksido hidratu. Kai esama gliukozės, fruktozė nustatoma pagal reakciją su Felingo tirpalu.

Sacharozė - runkelių ir cukranendrių cukrus, neredukuojantysis sacharidas. Tai - bespalviai kristalai, gerai tirpstantys vandenyje bei vandens ir etilo alkoholio mišiniuose, molekulinė masė 342,0296, lydymosi temperatūra 185-186 °C. Didelis sacharozės kiekis (iki 5%) yra būdingas V. labrusca ir V. rotundifolia vynuogių rūšims. Esant b-fruktofuranozidazės, sacharozė fermentuojamoje misoje greitai invertuojasi (0,6-3 g/dm³ per parą); Veikiant vyne esančioms rūgštims, inversija vyksta daug lėčiau. Vynuose sacharozės būna tik pėdsakai. Sacharozė plačiai vartojama specialiųjų rūšių vyno gamyboje. Pagal kai kurių Europos valstybių įstatymus, esant nepalankioms sąlygoms, sacharozės galima pridėti į misą. Sacharozei kokybiškai nustatyti naudojamas specifinis testas su diazouracilu. Sacharozės kiekis nustatomas densimetrijos, refraktometrijos, poliarimetrijos ir kitais metodais. Pridėtos sacharozės kiekis misoje, koncentruotuose sultyse, vyno cukruje ir vyne nustatomas branduolinio magnetinio rezonanso metodu;

5.2. Apibrėžimas

Redukuojantieji cukrūs - tai cukrūs, turintys ketono arba aldehido grupę ir nustatomi pagal šių grupių gebą redukuoti šarminius vario oksido tirpalus;

5.3. Metodų esmė:

5.3.1. Skaidrinimas:

5.3.1.1. Pamatinis metodas

Neutralizuotas vynas, iš kurio pašalintas alkoholis, perleidžiamas per kolonėlę su acetatine anijonitine derva ir paskui nuskaidrinamas švino acetatu;

5.3.1.2. Įprastinis metodas

Vynas apdorojamas vienu iš reagentų: švino acetatu, cinko (II) geležies rodanidu;

5.3.2. Matavimas

Universalusis metodas: po vyno ar misos reakcijos su žinomu kiekiu šarminio vario tirpalo, dvivalenčio vario jonų perteklius nustatomas jodometriškai;

5.4. Skaidrinimas

Skystyje, kuriame bus nustatomi cukrūs, jų turi būti nuo 0,5 iki 5 g/dm³. Jeigu vynas yra sausas, skaidrinimo metu reikia vengti jį praskiesti; jeigu vynas saldus, jį būtina praskiesti, kad cukrų kiekis būtų 5.1 lentelėje nurodytose ribose;

5.1. lentelė. Vyno praskiedimas cukrų analizei

Pavadinimas	Cukrų kiekis, g/dm^3	Tankis	Numatoma praskiesti
Misa ir mistelė	>125	>1,038	1
Saldus vynas (spirituotas ir nespirituotas)	25-125	1,005-1,038	4
Pusiau saldus vynas	5-25	0,997-1,005	20
Sausas vynas	<5	<0,997	neskiedžiama

5.4.1. Pamatinis metodas:

5.4.1.1. Įranga ir priemonės:

5.4.1.1.1. Anijonitinė derva [Dowex rūšies 3, (20-50) meš arba ekvivalenti];

5.4.1.1.2. 50 cm³ biuretė;

5.4.1.1.3. Kolonėlė su jonitine derva. Ruošiant kolonėlę, ant biuretės dugno dedamas nedidelis stiklo vatos tamponas su 15 cm³ anijonitinės dervos. Pirmiausia derva regeneruojama du kartus. Tuo tikslu paeiliui leidžiami 1 M druskos rūgšties ir natrio hidroksido tirpalai. Derva praplaunama 50 cm³ distiliuoto vandens ir perkeliama į cilindro indą, pripilama 50 cm³ 4 M acto rūgšties tirpalo. Kolonėlė praskalaujama distiliuotu vandeniu, kol ištekantis vanduo pasidaro neutralus. Dervai regeneruoti per kolonėlę perleidžiama 150 cm³ 2 M natrio hidroksido tirpalo: taip pašalinamos rūgštys ir didesnė dalis dervoje absorbuotų dažančiųjų medžiagų. Tada praskalaujama 100 cm³ vandens, perleidžiama 100 cm³ 4 M acto rūgšties ir išplaunama distiliuotu vandeniu, kol bus neutrali reakcija;

5.4.1.2. Reagentai ir tirpalai:

5.4.1.2.1. Kalcio karbonatas, CaCO₃;

5.4.1.2.2. Švino acetato tirpalas (sotus): 250 g švino acetato, Pb(CH₃COO)₂´3H₂O, pasveriama 500 cm³ matavimo kolboje, purtant ištirpinama karštame vandenyje ir praskiedžiama iki žymės;

5.4.1.3. Analizė

Sausasis vynas. 50 cm³ vyno supilama į 10-12 cm skersmens cilindro indą, įpilama 0,5 (n-0,5) cm³ 1 M natrio hidroksido tirpalo (0,1 M natrio hidroksido tirpalo kiekis, suvartotas bendrajam vyno rūgštingumui nustatyti, pažymimas L), ir išgarinama verdančio vandens vonioje pučiant karštą orą, kol pasilieka maždaug 20 cm³ skysčio. Šis skystis leidžiamas per kolonėlę su acetatine anijonitine derva 3 cm³ per 2 min greičiu. Eliuatas surenkamas į 100 cm³ talpos matavimo kolbą. Cilindras (6 kartus) ir kolonėlė praskalaujama 10 cm³ distiliuoto vandens. Purtant įpilama 2,5 cm³ sočiojo švino acetato tirpalo ir įdedama 0,5 g kalcio karbonato; kelis kartus supurtoma ir paliekama 15 min, iki brūkšnio įpilama distiliuoto vandens. Nufiltruojama. 1 cm³ filtrato bus tolygus 0,5 cm³ vyno.

Misa, mistelė, saldus ir pusiau saldus vynas.

Misa ir mistelė skiedžiama 10 kartų ir analizuojama 10 cm³ gauto tirpalo.

Spirituotas ir nespirituotas saldus vynas, kurio tankis 1,005 iki 1,038, skiedžiamas 5 kartus ir analizuojama 50 cm³ gauto tirpalo.

Pusiau saldaus vyno, kurio tankis 0,997 – 1,005, analizei imama 2 cm³ neskiesto vyno.

Pamatuotas skysčio kiekis leidžiamas per kolonėlę su acetatine anijonitine derva 1,5 cm³/min. greičiu.

Eliuatas surenkamas į 100 cm³ talpos matavimo kolbą. Kolonėlę 6 kartus praskalaujama 10 cm³ distiliuoto vandens. Purtant įpilama 1 cm³ sočiojo švino acetato tirpalo ir įdedama 0,5 g kalcio karbonato; kelis kartus supurtoma ir paliekama 15 min, iki brūkšnio pripilama distiliuoto vandens. Nufiltruojama. 1 cm³ gauto filtrato bus tolygus 0,01 cm³ misos (I), 0,04 cm³ saldaus vyno (II) ir 0,2 cm³ pusiau saldaus vyno (III);

5.4.2. Įprastinis metodas:

5.4.2.1. Skaidrinimas švino acetatu:

5.4.2.1.1. Reagentai ir tirpalai

Kalcio karbonatas, CaCO₃; švino acetato tirpalas (sotus), paruošiamas, kaip nurodyta 5.4.1.2.2 p;

5.4.2.1.2. Analizė

Sausas vynas. 50 cm³ vyno supilama į 100 cm³ talpos matavimo kolbą ir įpilama 0,5 (n-0,5) cm³ 1 M natrio hidroksido tirpalo; čia n - 0,1 M natrio hidroksido tirpalo kiekis, suvartotas bendrajam vyno rūgštingumui nustatyti 10 cm³ vyno. Maišant įpilama 2,5 cm³ sočiojo švino acetato tirpalo ir 0,5 g kalcio karbonato; kelis kartus supurtoma ir paliekama 15 min, iki brūkšnio pripilama distiliuoto vandens. Nufiltruojama. 1 cm³ gauto filtrato bus tolygus 0,5 cm³ vyno.

Misa, mistelė, saldus ir pusiau saldus vynas. Į 100 cm³ talpos matavimo kolbą supilama:

- 10 cm³ misos ar mistelės, skiestos 10 kartų;

- 20 cm³ spirituoto ir nespirituoto saldaus vyno, kurio tankis 1,005 – 1,038, skiesto 5 kartus;

- 20 cm³ neskiesto pusiau saldaus vyno, kurio tankis 0,997 – 1,005.

Įpilama maždaug 60 cm³ vandens ir 0,5, 1 arba 2 cm³ sočiojo švino acetato tirpalo, 0,5 g kalcio karbonato ir paliekama 15 min periodiškai supurtant. Pripilama iki brūkšnio distiliuoto vandens. Nufiltruojama. 1 cm³ gauto filtrato bus tolygus 0,01 cm³ misos (I), 0,04 cm³ saldaus vyno (II) ir 0,2 cm³ pusiau saldaus vyno (III);

5.4.2.2. Skaidrinimas cinko geležies rodanidu:

Šis būdas taikomas tik baltajam vynui, neryškios spalvos vynui ir saldžiai misai;

5.4.2.2.1. Reagentai ir tirpalai

I tirpalas (kalio heksacianoferoato, raudonosios kraujo druskos): pasveriama 150 g K₄Fe(CN)₆´3H₂O 1 dm³ matavimo kolboje ir praskiedžiama distiliuotu vandeniui iki brūkšnio; II tirpalas (cinko sulfato): pasveriama 300 g ZnSO₄´7H₂O 1 dm³ talpos matavimo kolboje ir praskiedžiama iki brūkšnio distiliuotu vandeniu;

5.4.2.2.2. Analizė

Į 100 cm³ matavimo kolbą supilama:

- 10 cm³ misos, skiestos 10 kartų;

- 20 cm³ spirituoto ir nespirituoto saldaus vyno, kurio tankis 1,005 – 1,038, skiesto 5 kartus;

- 20 cm³ neskiesto pusiau saldaus vyno, kurio tankis 0,997 – 1,005;

- 50 cm³ neskiesto sauso vyno.

Įpilama 5 cm³ I ir 5 cm³ II tirpalo ir sumaišoma. Praskiedžiama vandeniu iki brūkšnio ir paliekama 10 min. Nufiltruojama. 1 cm³ gauto filtrato bus tolygus 0,01 cm³ misos (I), 0,04 cm³ saldaus vyno (II), 0,2 cm³ pusiau saldaus vyno (III) ir 0,50 cm³ sauso vyno (IV);

5.5. Analizė:

5.5.1. Reagentai ir tirpalai:

5.5.1.1. Šarminis vario tirpalas: 25 g vario sulfato, CuSO₄´5H₂O, ištirpinama 100 cm³ vandens; 50 g citrinų rūgšties, C₆H₈O₇´H₂O, ištirpinama 300 cm³ vandens; 388 g natrio karbonato, Na₂CO₃´10H₂O, ištirpinama 300-400 cm³ karšto vandens. Citrinų rūgšties ir natrio karbonato tirpalai sumaišomi1 dm³ talpos matavimo kolboje. Į gautą tirpalą supilamas vario sulfato tirpalas ir iki brūkšnio pripilama vandens;

5.5.1.2. 30 % kalio jodido tirpalas, KI: 100 cm³ talpos matavimo kolboje pasveriama 30 g KI ir praskiedžiama distiliuotu vandeniu iki brūkšnio. Tirpalas laikomas inde iš tamsaus stiklo;

5.5.1.3. 25 % sieros rūgšties tirpalas: į 100 cm³ talpos matavimo kolbą įpilama maždaug 40 cm³ vandens, po to 25 g grynos H₂SO₄ (r₂₀ = 1,84 g/cm³) atvėsinama ir praskiedžiama distiliuotu vandeniu iki brūkšnio;

5.5.1.4. Krakmolo tirpalas: 5 g tirpiojo krakmolo ištirpinama 500 cm³ vandens. Tirpalas pakaitinamas iki virimo ir maišant pavirinamas 10 min. Jame ištirpinama 200 g natrio chlorido. Į kolbą su atvėsusiu tirpalu iki 1 dm³ pripilama distiliuoto vandens;

5.5.1.5. 0,1 M natrio tiosulfato tirpalas;

5.5.1.6. Invertuotojo cukraus tirpalas: į 200 cm³ talpos matavimo kolbą supilama 4,75 g sausos sacharozės, apie 100 cm³ distiliuoto vandens ir 5 cm³ koncentruotos druskos rūgšties. Kolba pamerkiama į 60 °C temperatūros vandens vonią, palaukiama kol temperatūra kolbos viduje pasiekia 50 °C ir laikoma šioje temperatūroje 15 min. Ištraukta iš vandens vonios kolba paliekama 30 min pastovėti. Paskui šalto vandens vonioje atvėsinamas kolbos turinys. Paruoštas tirpalas perpilamas į 1 dm³ talpos kolbą ir iki brūkšnio pripilama distiliuoto vandens. Šį tirpalą galima laikyti vieną mėnesį. Prieš vartojimą tirpalas (jame esančių rūgščių koncentracija yra maždaug 0,06 M) neutralizuojamas natrio šarmu. Invertuotojo cukraus tirpalas vartojamas kaip palyginamasis;

5.5.2. Analizė

Į 300 cm³ talpos kūgio kolbą įpilama 25 cm³ šarminio vario tirpalo, 15 cm³ vandens ir 10 cm³ paruošto analizei vyno arba misos. Šiame tirpale neturi būti daugiau kaip 60 mg invertuotojo cukraus. Į kolbą įmetami keli gabalėliai pemzos. Prie kolbos pritvirtinamas stiklinis grįžtamasis kondensatorius. Kolbos turinys per 2 min užvirinamas,10 min pavirinimas ir atvėsinamas po šalto vandens srove. Į atvėsusį tirpalą įpilama 10 cm³ kalio jodido, 25 cm³ sieros rūgšties ir 2 cm³ krakmolo tirpalų. Paruoštas tirpalas titruojamas natrio tiosulfato tirpalu. Suvartotas kiekis pažymimas n, cm³.

Tuo pat metu analizuojamas tuščiasis mėginys. Jis ruošiama taip kaip ir tiriamasis, tik vietoje 25 cm³ vyno tirpalo 10+15 imama 25 cm³ distiliuoto vandens. Tuščiajam mėginiui titruoti suvartotas natrio tiosulfato kiekis pažymimas n’, cm³;

5.5.3. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška:

5.5.3.1. Cukraus kiekis, išreikštas invertuotojo cukraus kiekiu, tiriamajame mėginyje randamas iš 5.2 lentelės pagal skirtumą n’–n.

5.2. lentelė. Redukuojančiųjų cukrų kiekio priklausomybė nuo 0,1 M Na₂S₂O₃ tirpalų, vartotų tiriamajam ir tuščiajam mėginiui titruoti, skirtumo (n’–n)

Na2S2O3, cm^3	Redukuojančiųjų cukrų kiekis, mg	Skirtumas	Na2S2O3, cm^3	Redukuojančiųjų cukrų kiekis, mg	Skirtumas
1	2,4	2,4	13	33,0	2,7
2	4,8	2,4	14	35,7	2,8
3	7,2	2,5	15	38,5	2,8
4	9,7	2,5	16	41,3	2,9
5	12,2	2,5	17	44,2	2,9
6	14,7	2,6	18	47,2	2,9
7	17,2	2,6	19	50,0	3,0
8	19,8	2,6	20	53,0	3,0
9	22,4	2,6	21	56,0	3,1
10	25,0	2,6	22	59,1	3,1
11	27,6	2,7	23	62,2
12	30,3	2,7

Invertuotojo cukraus kiekis vyne išreiškiamas g/dm³ atsižvelgiant į vyno praskiedimą ir paimtą mėginio kiekį;

5.5.3.2. Pakartojamumas

r = 0,015´x_I; čia x_I - invertuotojo cukraus koncentracija mėginyje, g/dm³;

5.5.3.3. Atkuriamumas

R = 0,058´x_i.

6. Sacharozės kiekio nustatymo metodai

6.1. Metodų esmė

Kokybinis nustatymo metodas - plonasluoksnė chromatografija. Sacharozė nuo kitų cukrų atskiriama plonasluoksnės chromatografijos būdu ant plokštelės su celiulioze, kaip ryškalą naudojant 105 °C temperatūros karbamido ir druskos rūgšties reagentą.

Kiekybinis nustatymo metodas - didelio slėgio skysčių chromatografija. Sacharozė atskiriama nuo vyno polihidroksilių alkoholių silicio kolonėlėje su alkilaminu ir jos kiekis išmatuojamas refraktometriniu detektoriumi. Sacharozės kiekis nustatomas lyginant su etalonu, kuris analizuojamas tomis pačiomis sąlygomis;

6.2. Kokybinė analizė plonasluoksnės chromatografijos būdu:

6.2.1. Įranga, priemonės ir reagentai:

6.2.1.1. Chromatografijos plokštelės, padengtos plonu celiuliozės sluoksniu;

6.2.1.2. Chromatografijos kamera;

6.2.1.3. Mikrošvirkštas arba mikropipetė;

6.2.1.4. Termostatas, kurio temperatūra reguliuojama 105±2 °C;

6.2.1.5. Aktyvintos anglys spalvinėms medžiagoms pašalinti;

6.2.1.6. Judrioji fazė: metilenchloridas, acto rūgštis (r₂₀ = 1,05 g/cm³), etanolis, metanolis ir vanduo (50:25:9:6:10);

6.2.1.7. Ryškalas: 5 g karbamido, 20 cm³ 2 M druskos rūgšties, 100 cm³ etanolio;

6.2.1.8. Etaloninis tirpalas: 35 g gliukozės, 35 g fruktozės, 0,5 g sacharozės, praskiestos iki 1 dm³ vandeniu;

6.2.2. Analizė:

6.2.2.1. Mėginio paruošimas

Jeigu misos ar vyno spalva yra labai ryški, spalvinės medžiagos šalinamos, apdorojant aktyvintomis anglimis;

6.2.2.2. Chromatogramos gavimas

Ant plokštelės 2,5 cm atstumu nuo jos krašto užlašinama po 10 ml mėginio ir etaloninio tirpalo. Chromatografiniam atskyrimui vykti plokštelė dedama į kamerą, prisotintą judriosios fazės garų, ir paliekama, kol skystis pakyla iki 1 cm nuo viršutinio krašto lygio, paskui išimama ir išdžiovinama karšto oro srove. Judriosios fazės pakilimo procesas kartojamas 2 kartus ir kiekvieną kartą plokštelė išdžiovinama. Ant plokštelės tolygiai užpurškiama 15 cm³ ryškalo ir ji įdedama į 105 °C temperatūrą palaikantį termostatą 5 min;

6.2.3. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška

Sacharozė ir fruktozė išryškėja tamsiai mėlynomis dėmėmis baltame fone; gliukozė sudaro žalsvą dėmę, kuri yra mažiau ryški;

6.3. Kiekybinė analizė didelio slėgio skysčių chromatografijos būdu:

6.3.1. Įranga ir prietaisai:

6.3.1.1. Didelio slėgio skysčių chromatografas su 10 ml talpos kilpos čiurkšliniu siurbliu, lūžio rodiklio diferencialiniu arba interferometriniu detektoriumi, silicio kolonėle su alkilamino sluoksniu (ilgis 25 cm, vidinis skersmuo 4 mm), ir termoizoliavimo arba termostatavimo įrenginiu (30°C) ir savirašiu. Judriosios fazės sunaudojama 1 cm³/min;

6.3.1.2. Filtravimo įrenginys su membrana (0,45 mm);

6.3.2. Reagentai ir tirpalai:

6.3.2.1. Bidistiliuotas vanduo;

6.3.2.2. Chromatografijai tinkamas acetonitrilas;

6.3.2.3. Judrioji fazė: per membraninį filtrą (0,45 mm) nufiltruotas acetonitrilo ir vandens [80: 20 (t/t)] mišinys. Prieš naudojimą iš šios fazės pašalinamos dujos;

6.3.2.4. Etaloninis tirpalas: 1,2 g/dm³ sacharozės tirpalas vandenyje. Jis taip pat nufiltruojamas per membraninį filtrą;

6.4. Analizė:

6.4.1. Mėginio paruošimas

Vynas ar misa nufiltruojama per membraninį filtrą (0,45 mm);

6.4.2. Analizė

Į chromatografą paeiliui sulašinama 10 ml etaloninio tirpalo ir 10 ml tiriamojo tirpalo. Užrašoma chromatograma. Sacharozės sulaikymo kolonėlėje laikas - maždaug 10 min;

6.4.3. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška

Skaičiavimuose naudojamasi dviejų etaloninio ir tiriamojo tirpalo matavimų vidurkiu. Sacharozės kiekis apskaičiuojamas g/dm³. Sacharozės kiekis vyne ar misoje išreiškiamas g/dm³ vieno ženklo po kablelio tikslumu.

7. Gliukozės ir fruktozės kiekio nustatymo metodai

7.1. Apibrėžimas

Gliukozės ir fruktozės kiekiai nustatomi atskirai fermentinės analizės metodu turint vieną tikslą - apskaičiuoti gliukozės ir fruktozės santykį;

7.2. Metodo esmė

Gliukozė ir fruktozė yra fosforinamos adenozintrifosfatu (ATP) fermentinės reakcijos, kurią katalizuoja heksokinazė (HK), metu ir susidaro ant gliukozo-6-fosfatas (G6P) ir fruktozo-6-fosfatas (F6P):

Iš pradžių G6P, veikiant nikotinamidadenindinukleotido fosfatui (NADP) ir esant fermento gliukozo-6-fosfatdehidrogenazės (G6DG), oksiduojasi į gliukonat-6-fosfatą. Redukuotojo NADPH kiekis yra proporcingas G6P kiekiui ir gliukozės kiekiui:

Redukuotas ir NADP yra nustatomas pagal jo 340 nm bangos ilgio šviesos absorbciją. Pasibaigus šiai reakcijai, F6P, veikiamas fosfogliukoizomerazės (PGI), yra paverčiamas į G6P:

Gautasis G6P vėl reaguoja su NADP ir susidaro gliukonat-6-fosfatas bei redukuotasis NADPH, kuris nustatomas analogiškai pagal jo absorbciją;

7.3. Įranga ir priemonės:

7.3.1. Spektrofotometras, kuriuo galima išmatuoti 340 nm šviesos bangos ilgio absorbciją. Jeigu matuojamos absoliučiosios vertės, t. y. nenaudojant etaloninių tirpalų, o pagal NADPH ekstinkcijos koeficientą kaip etaloną, prietaisų bangų ilgio skalės ir absorbcijos geba turi būti patikrinta. Tokio prietaiso neturint, gali būti naudojamas neištisinio spektro fotometras, kuriuo galima matuoti esant 334 arba 365 nm bangos ilgiui;

7.3.2. 1 cm sluoksnio storio kiuvetės arba vienkartinio naudojimo kiuvetės;

7.3.3. 0,05, 0,01 ir 0,2 cm³ pipetės;

7.4. Reagentai ir tirpalai:

7.4.1. Buferinis tirpalas 1 (0,3 M trietanolaminas, pH 7,6, Mg²⁺ 4´10^-3 M): 11,2 g trietanolamino hidrochlorido ir 0,2 g magnio sulfato (su septyniomis molekulėmis vandens) ištirpinama 150 cm³ bidistiliuoto vandens. Į gautą tirpalą įpilama apie 4 cm³ 5 M natrio hidroksido tirpalo, kol tirpalo pH 7,6. Į kolbą iki 200 cm³ pripilama bidistiliuoto vandens. Šį tirpalą galima laikyti 4 savaites +4 °C temperatūroje;

7.4.2. Nikotinamidadenindinukleotido fosfato tirpalas 2 (maždaug 11,5´10^-3 M): 50 mg dinatrio nikotinamidadenindinukleotido fosfato ištirpinama 5 cm³ bidistiliuoto vandens. Šį tirpalą galima laikyti 4 savaites +4 °C temperatūroje;

7.4.3. Adenozin-5’-trifosfato tirpalas 3 (maždaug 81´10^-3 M): 250 mg dinatrio adenozin-5’-trifosfato ir 250 mg natrio bikarbonato ištirpinama 5 cm³ bidistiliuoto vandens. Šį tirpalą galima laikyti 4 savaites +4 °C temperatūroje;

7.4.4. Heksokinazės ir gliukozės-6-fosfatdehidrogenazės tirpalas 4: sumaišoma 0,5 cm³ heksokinazės (280 U/cm³) ir 0,5 cm³ gliukozės-6-fosfatdehidrogenazės (1mg/cm³ baltymų). Šį tirpalą galima laikyti 1 metus +4 °C temperatūroje;

7.4.5. Fosfogliukozoizomerazės (2 mg/cm³ baltymo, t. y. 700 U/cm³) tirpalas 5: suspensija vartojama nepraskiesta. Ją galima laikyti 1 metus +4 °C temperatūroje;

7.5. Analizė:

7.5.1. Tiriamojo tirpalo paruošimas

Priklausomai nuo gliukozės ir fruktozės kiekio 1 dm³ vyno skiedžiama, kaip nurodyta 7.1 lentelėje;

7.1 lentelė. Vyno praskiedimo koeficientai

Cukraus kiekis matuojant 334 ir 340 nm, g/dm^3	Cukraus kiekis matuojant 365 nm, g/dm^3	Praskiedimas vandeniu	Praskiedimo koeficientas F
iki 0,4	0,8	-	-
iki 4,0	8,0	1+9	10
iki 10,0	20,0	1+24	25
iki 20,0	40,0	1+49	50
iki 40,0	90,0	1+99	100
Daugiau nei 40,0	80,0	1+999	1000

7.5.2. Matavimas

Dvi 1 cm sluoksnio storio kiuvetės užpildomos žemiau nurodytais tirpalais:

Tirpalas                                 Palyginamasis tirpalas         Tiriamasis tirpalas

Tirpalas 1, cm³                                    2,50                                2,50

Tirpalas 2, cm³                                    0,10                                0,10

Tirpalas 3, cm³                                    0,10                                0,10

Tiriamasis Mėginys, cm³                               –                                  0,20

Distiliuotas vanduo, cm³                     0,20                                  –

Kiuvečių turinys išmaišomas ir po 3 min užrašomos tirpalų absorbcijos A₁. Reakcijai pradėti į kiekvieną kiuvetę įpilama po 0,02 cm³ tirpalo 4 (7.4.4. p.). Kiuvečių turinys išmaišomas, išlaikoma 15 min ir išmatuojamos tirpalų absorbcijos A₂. Reakcijos pabaiga patikrinama po 2 min.

Išmatavus absorbcijas A₂, į kiekvieną kiuvetę nedelsiant įpilama po 0,02 cm³ tirpalo 5 (7.5.5. p.). Kiuvečių turinys išmaišomas ir po 10 min išmatuojamos absorbcijos A₃. Reakcijos pabaiga patikrinama po 2 min.

Nustatomi palyginamojo ir tiriamojo tirpalų absorbcijų skirtumai: A₂-A₁ gliukozei ir A₃-A₂ fruktozei.

Apskaičiuojami palyginamojo tirpalo (DA_p) ir tiriamojo tirpalo (DA₀) absorbcijų skirtumai ir nustatoma: gliukozei - DA_g = DA₀ - DA_p ir fruktozei - DA_f = DA₀ - DA_p.

PASTABA. Laikas, reikalingas fermentų veiklai, gali skirtis priklausomai nuo fermentų partijos. Čia nurodytas orientacinis laikas. Rekomenduojama kiekvienai partijai laiką nustatyti atskirai;

7.6. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška:

7.6.1. Apskaičiavimas

Koncentracija C, g/dm³, apskaičiuojama pagal formulę:

V´M

C = _________________ ´DA;

e ´d´u´1000

čia V – reagento kiekis, cm³; u - tiriamojo mėginio kiekis, cm³; M – nustatomųjų medžiagų molekulinė masė; d – kiuvetės sluoksnio storis, cm; e – NADP absorbcijos koeficientas, 340 nm bangos ilgiui e =6,3 (mmol^-1´l×cm^-1). V = 2,92 nustatant gliukozę ir V = 2,94 nustatant fruktozę; v = 0,20 cm³, PM=180, d=1.

Gaunama: C = 0,417´DA_g gliukozei ir C = 0,420´DA_f fruktozei.

Jeigu tiriamasis tirpalas buvo praskiestas, rezultatas dauginamas iš koeficiento F.

PASTABA. Jeigu absorbcija buvo matuojama esant 334 ar 365 nm bangos ilgiui, tai:

334 nm: e = 6,2 (mmol^-1´l cm^-1), gliukozei C = 0,425´DA_g, fruktozei C = 0,428´DA_f;

365 nm: e = 3,4 (mmol^-1´l cm^-1), gliukozei C = 0,773´DA_g, fruktozei C = 0,778´DA_f;

7.6.2. Pakartojamumas

r = 0,056´x_i, čia x_i tiriamojo tirpalo koncentracija, g/dm³;

7.6.3. Atkuriamumas

R = 0,12+0,076´x_i.

8. Cukraus priedo vynuogių misoje, koncentruotoje vynuogių misoje, rektifikuotoje koncentruotoje vynuogių misoje ir vyne nustatymas deuterio branduolinio magnetinio rezonanso metodu

8.1. Apibrėžimas

Deuteris, esantis vynuogių misos cukruose ir vandenyje, po fermentavimo pasiskirsto vyno etilo alkoholio I, II ir III bei vandens IV molekulėse:

CH₂DCH₂OH                   CH₃CHDOH                      CH₃CH₂OD                        HOD

I                                     II                                         III                                IV

8.1 lentelė. Skirtingos kilmės cukraus priedų sukelti izotopų santykio pokyčiai vyno molekulėse

Paramentrai Vynas	(D / H)I	(D / H)H		R
Natūralus
Su cukraus priedu:
– runkelių cukrumi
– cukranendrių cukrumi
– kukurūzų cukrumi

Prieš misos fermentavimą pridėjus skirtingos kilmės cukraus (sausasis cukrinimas), deuterio pasiskirstymas vyno molekulėse pasikeičia. Palyginti su to paties regiono natūralaus vyno, į kurį nebuvo pridėta prieš fermentavimą cukraus, rodikliais, skirtingos kilmės cukraus priedai sukelia 8.1 lentelėje parodytus izotopų santykio pokyčius.

(D/H)_I - izotopų santykis I molekulėje; (D/H)_II - izotopų santykis II molekulėje; - izotopų santykis vyne esančiose vandens molekulėse; R = 2 (D/H)_II /(D/H)_I išreiškia santykinį deuterio pasiskirstymą I ir II molekulėse; R yra matuojamas tiesiogiai pagal signalų h-intensyvumus: R = 3h_II / h_I.

(D/H)_I daugiausia apibūdina augalo, iš kurio išskirtas cukrus, rūšį ir kai kuriais atvejais geografinę auginimo vietą (vandenį, kuris buvo naudojamas fotosintezei).

(D/H)_II apibūdina vynuogių auginimo vietos klimatą (lietaus vandenį ir oro sąlygas), ir – kiek mažiau – cukraus koncentraciją neperdirbtoje misoje.

 apibūdina gamybos vietos klimatą ir cukraus kiekį neperdirbtoje misoje;

8.2. Metodo esmė

Parametrai R, (D/H)_I ir (D/H)_H) nustatomi pagal deuterio branduolių magnetinį rezonansą etilo alkoholyje, kuris išskiriamas iš vyno ar iš misos, koncentruotos misos ar rektifikuotos koncentruotos misos fermentavimo produktų, gautų nurodytomis sąlygomis. Šie parametrai gali būti papildyti nustatant vandens, išskirto iš vyno, izotopų santykį ir ¹³C/¹²C santykį etilo alkoholyje. Jeigu duomenų banko nėra, mėginiai atrenkami žemiau nurodytais būdais.

Vynų atveju - kartu su tiriamaisiais mėginiais, kurie yra atrenkami gamybos regionuose, turi būti atrenkami mažiausiai trys tos pačios kilmės (geografinė vietovė ir vynuogių derlius) natūralūs palyginamieji mėginiai; toks mėginių atrinkimas turi būti kartojamas tris kartus.

Misų, koncentruotų misų ir rektifikuotų koncentruotų misų atveju - turi būti atrenkami mažiausiai trys tos pačios kilmės (geografinės vietovės ir vynuogių derliaus) palyginamieji natūralios misos mėginiai;

8.3. Mėginio paruošimas:

8.3.1. Vyne esančio etilo alkoholio ir vandens išskyrimas

PASTABA. Etilo alkoholį išskirti galima bet kokiu metodu tik, su sąlyga, jei į išskirtą distiliatą, kuriame yra 92–93 masės % etanolio (95 tūrio %), įeina nuo 98 iki 98,5 % viso vyne esančio alkoholio;

8.3.1.1. Įranga, priemonės ir reagentai

Aparatas etilo alkoholiui išskirti (8.1 pav.), sudarytas iš elektra kaitinamo gaubto su įtampos reguliatoriumi; 1 dm³ talpos apvaliadugnės kolbos su šlifo sujungimu; kadžio tipo kolonėlės su besisukančia teflono juosta; 125 cm³ talpos kūginės kolbos su šlifo sujungimais; 125 ir 60 cm³ talpos butelių su plastmasiniais kamščiais.

Reagentai vandeniui nustatyti Karlo Fišerio metodu (pvz., Merck 9241 ir 9243);

8.3.1.2. Analizė:

8.3.1.2.1. Nustatomas etilo alkoholio koncentracija vyne, tūrio %, (t^v) 0,05 % tikslumu;

8.3.1.2.2. Etilo alkoholio išskyrimas

Įpilama vienalyčio mėginio (500 cm³ vyno), kuriame yra t^v etilo alkoholio, į distiliavimo aparato, kurio flegmos skaičius yra apie 0,9, kolbą. Distiliatui surinkti padedama iš anksto pasverta 125 cm³ talpos kūgio kolba su šlifo sujungimu. Skysčio, kurio virimo temperatūra 78,0-78,2 °C, surenkama maždaug 40-60 cm³. Jeigu temperatūra viršija 78,5 °C, distiliato surinkimas nutraukiamas 5 min.

Kai temperatūra nukrinta iki 78 °C, distiliatas vėl pradedamas rinkti ir renkamas tol, kol jo temperatūra pakyla iki 78,5 °C. Šis veiksmas kartojamas tol, kol, nutraukus distiliato rinkimą ir palikus tekėti skystį uždaru ratu, temperatūra pradeda pastoviai didėti. Visas distiliavimas trunka apytiksliai 5 h. Tokia procedūra sudaro sąlygas išskirti į distiliatą, kuriame yra 92 ir 93 masės % etilo alkoholio (95 tūrio %), nuo 98 iki 98,5 % bendrojo vyne esančio etilo alkoholio. Taip pasiekiama tokia etilo alkoholio koncentracija, kuriai nustatytos 8.4 skirsnyje aprašytos BMR spektro gavimo sąlygos. Surinktas etilo alkoholis pasveriamas.

Vienalytis 60 cm³ tūrio distiliacijos likutis laikomas 60 cm³ talpos kolboje ir tai yra vyne esantis vanduo. Jei reikia, jame galima nustatyti deuterio izotopų santykį.

PASTABA. Jei spektrometras turi 10 mm zondą (žr. 8.4 p.), pakanka vienalyčio 300 cm³ vyno mėginio;

8.3.1.2.3. Nustatomas etilo alkoholio kiekis distiliate masės %: tuo tikslu Karlo Fišerio metodu nustatomas vandens kiekis (p’, g) maždaug 0,5 cm³ distiliato, kurio masė p yra tiksliai išmatuota. Etilo alkoholio koncentracija masės % apskaičiuojama pagal formulę:

=[(p–p’)/p]´100.

8.1 pav. Etilo alkoholio išskyrimo aparatas

8.3.2. Misos, koncentruotos misos ir rektifikuotos misos fermentavimas:

8.3.2.1. Įranga, priemonės ir reagentai:

8.3.2.1.1. Vyno rūgštis;

8.3.2.1.2. Bacto Yeast Nitrogen azoto šaltinis mielėms be aminorūgščių DIFCO;

8.3.2.1.3. Aktyvios sausosios mielės (Saccharomyces cerevisiae). Jei misos vandens izotopų santykis yra žinomas, tai mieles prieš dedant į misą 15 min galima aktyvinti minimaliame šilto nedistiliuoto vandens kiekyje (1 g 50 cm³); naudojamo vandens izotopų santykis turi būti artimas misoje esančio vandens izotopų santykiui. Jei misos vandens izotopų santykis nėra žinomas, geriau naudoti šviežias arba iš anksto neaktyvintas mieles;

8.3.2.1.4. 1,5 dm³ talpos fermentavimo indas su įtaisu, sudarančiu sąlygas atlikti procesą be sąlyčio su oru ir sukondensuoti alkoholio garus, kadangi negalima leisti, kad fermentavimo metu išgaruotų bent truputis etilo alkoholio. Fermentavimo metu etilo alkoholiu turi būti paverčiama ne mažiau kaip 98 % cukraus;

8.3.2.2. Analizė:

8.3.2.2.1. Misa

Šviežia misa. Supilama 1 dm³ misos į fermentavimo indą. Misoje esančių fermentuojamų cukrų koncentracija turi būti nustatyta iš anksto. Dedama 1 g aktyvintų sausųjų mielių. Į indą įstatomas sandarinimo įtaisas. Fermentavimas turi vykti esant maždaug 20 °C temperatūrai tol, kol sunaudojamas visas cukrus. Nustačius fermentavimo produkto alkoholio koncentraciją tūrio % ir apskaičiavus surauginto cukraus kiekį, skystis centrifuguojamas ir distiliuojamas siekiant išskirti etilo alkoholį.

Misa, kurios fermentavimas sustabdytas įdėjus sieros dioksido. Pašalinamas sulfitas iš maždaug 1,2 dm³ misos. Tuo tikslu misa supilama į kolbą su grįžtamuoju kondensatoriumi ir, šildant 70-80 °C temperatūros vandens vonioje, į misą leidžiami azoto burbuliukai tol, kol bendrasis sieros dioksido kiekis misoje bus mažesnis už 200 mg/dm³. Būtina užtikrinti, kad kondensatoriaus šaldymas būtų efektyvus ir kad išgaravus didesniam vandens kiekiui nepadidėtų misos koncentracija. Supilama 1 dm³ desulfituotos misos į fermentavimo indą ir toliau viskas daroma taip kaip su šviežia misa.

PASTABA. Jei misai sulfituoti buvo naudojamas kalio pirosulfitas, tai prieš pašalinant sulfitą į misą reikia papildomai įpilti 0,25 cm³ sulfato rūgšties (r₂₀ = 1,84 g/cm³) 1 g pirosulfito, suvartoto 1 dm³ misos;

8.3.2.2.2. Koncentruota misa

Į fermentavimo indą įpilama V cm³ koncentruotos misos, kurioje yra tam tikras žinomas cukraus kiekis (maždaug 170 g). Į misą įpilama vandens, kad susidarytų 1 dm³ tirpalo, t. y. 1000–V cm³. Vartojamas įprasto vandens šaltinio vanduo, kuriame yra toks pat izotopų santykis kaip ir natūralios palyginamosios misos mėginiuose. Dedama 1 g sausųjų mielių (8.3.2.1.3. p.) ir 3 g Bacto Yeast Nitrogen azoto šaltinio mielėms be aminorūgščių DIFCO. Sumaišoma ir toliau daroma taip, kaip aprašyta aukščiau;

8.3.2.2.3. Rektifikuota koncentruota misa

Viskas daroma taip, kaip aprašyta 8.3.2.2.2 p. Įpilama vandens, kad susidarytų 1 dm³ tirpalo, t. y. 1000–V cm³. Vartojamas įprasto vandens šaltinio vanduo, kuriame yra toks pat izotopų santykis kaip ir natūralios palyginamosios misos mėginiuose, tačiau jame dar ištirpinama 3 g vyno rūgšties.

PASTABA. Pasiliekama po 50 cm³ misos, desulfituotos misos, koncentruotos misos ar rektifikuotos koncentruotos misos, kuri prireikus galėtų būti panaudota vandeniui išskirti ir jo izotopų santykiui  nustatyti. Misoje esantį vandenį galima išskirti tradiciniu aceotropinio distiliavimo su toluenu būdu;

8.3.3. Alkoholio mėginio paruošimas BMR analizei:

8.3.3.1. Reagentai

N, N-tetrametilkarbamidas (TMK): vartojamas etaloninio TMK mėginys su nustatytu ir kontroliuojamu izotopų santykiu D/H. Tokį mėginį galima gauti iš Generalinio mokslų, tyrimų ir plėtros direktorato, Bendrijos Etalonų biuras, 200 rue de la Loi, B-1049, Briuselis (DG for Science, Research and Development, Community Bureau of References, 200 rue de la Loi, B-1049, Brussels);

8.3.3.2. Analizė

15 mm skersmens BMR zondas: į iš anksto pasvertą kolbą įpilama 7 cm³ alkoholio, kuris išskirtas, kaip nurodyta 8.3.1.2 p., ir pasveriama 0,1 mg tikslumu (m_A). Tada įpilama 3 cm³ vidinio etalono (TMK) ir pasveriama 0,1 mg tikslumu (m_st). Plakant sumaišoma.

10 mm skersmens BMR zondas: pakanka 3,2 cm³ alkoholio ir 1,3 cm³ TMK.

Atsižvelgiant į spektrometro ir zondo tipus (žr. 8.4 skirsnį), dedamas atitinkamas kiekis heksafluorbenzeno (8.2 lent.), kuris naudojamas kaip lauko dažnio stabilizavimo (sinchronizavimo) medžiaga;

8.2 lentelė. Į zondus dedamo heksafluorbenzeno kiekis

Spektrometras	Heksafluorbenzeno kiekis, mcm^3
	10 mm zondas	15 mm zondas
7,05 T	150	200
9,40 T	35	50

8.3.4. Vandens mėginio paruošimas BMR analizei, jeigu reikia nustatyti jo izotopų santykį:

8.3.4.1. Reagentai

N, N-tetrametilkarbamidas (TMK): žr. 8.3.3.1 p;

8.3.4.2. Analizė

Į pasvertą kolbą įpilama 3 cm³ vandens, kuris buvo gautas, kaip nurodyta 8.3.1.2 ar 8.3.2 (pastaba) p., ir pasveriama 0,1 mg tikslumu (m’_E). Tada įpilama 4 cm³ vidinio etalono (TMK) ir pasveriama 0,1 mg tikslumu (m’_st). Plakant sumaišoma.

PASTABA. Jei laboratorija turi masių spektrometrą, juo taip pat galima matuoti izotopų santykį; tada mažiau būtų naudojamas BMR spektrometras, kadangi kiekvienai analizuojamų vynų serijai reikia etalonizuoti santykį T_IV (8.5.2p.);

8.4. Alkoholio ir vandens ²H BMR spektrų užrašymas. Izotopo parametrų nustatymas:

8.4.1. Įranga ir priemonės:

8.4.1.1. BMR spektrometras su specialiu deuterio zondu, kuris nustatytas laukui B_o būdingu dažniu n_o (pvz., jei B_o = 7,05´T, tai n_o = 46,05 MHz, ir jei B_o = 9,4´T, tai n_o = 61,4 MHz); su protonų atskyrimo kanalu (B₂) bei lauko dažnio stabilizavimo (sinchronizavimo) kanalu, nustatytu fluoro dažniui.

Skiriamoji geba, išmatuota spektrui, transformuotam nenaudojant eksponentinio daugiklio (t. y. LB = 0; 8.2 pav., b.), ir išreikšta etanolio molekulėje esančių metilo ir metileno grupių signalų bei TMK esančios metilo grupės signalo puse aukščio, turi būti mažesnė už 0,5 Hz. Metilo grupės signalo jautrumas, išmatuotas 95 tūrio % (93,5 masės %) etilo alkoholyje naudojant eksponentinį daugiklį (LB = 2; 8.2 pav., a.), turi būti didesnis arba lygus 150. Tokiomis sąlygomis signalo aukščio matavimo pasikliautinasis intervalas su 97,5 % tikimybe (vienpusis bandymas) ir 10 spektro pakartojimų yra 0,35 %;

8.4.1.2. Automatinis mėginių keitiklis (galėtų būti);

8.4.1.3. Duomenų apdorojimo programinė įranga;

8.4.1.4. 15 mm ar 10 mm mėginių ampulės pagal spektrometro charakteristikas;

8.4.2. Spektrometro reguliavimas ir patikrinimas:

8.4.2.1. Reguliavimas

Vienalytiškumas ir jautrumas sureguliuojamas pagal gamintojo pateiktas instrukcijas;

8.4.2.2. Reguliavimo teisingumo patikrinimas

Naudojami etilo alkoholio etalonai, kurie pažymėti raidėmis C (iš cukranendrių gautas etilo alkoholis), V (vyno etilo alkoholis) ir B (iš cukrinių runkelių cukraus gautas etilo alkoholis) bei turi skirtingus izotopų kiekius, tačiau yra tiksliai etalonuoti. Šiuos etalonus teikia Bendrijos Etalonų biuras.

Pagal 8.4.3 p. nustatomas šių alkoholio etalonų izotopų vertės ir pažymimos C_mat, V_mat ir B_mat (žr. 8.5.3 p.). Palyginamos su atitinkamomis etaloninėmis vertėmis, pažymėtomis C_st, B_st ir V_st, ir užrašytomis viršutiniame indekse (žr. 8.5.3 p.). Standartinis pasikartojamumo nuokrypis, gautas 10 kartų pakartojus kiekvieno spektro užrašymą ir apskaičiavus vidurkį, santykiui R turi būti mažesnis negu 0,01, o (D/H)_I ir (D / H)_II – mažiau negu 0,3 milijonosios dalies.

Įvairių izotopinių parametrų [R, (D / H)_I ir (D / H)_II)] vidutinės vertės neturi nukrypti nuo atitinkamų standartinių tų parametrų pasikartojamumo normų, kurias tiems trims alkoholio etalonams nustato Bendrijos Etalonų biuras. Jei gauti rezultatai neatitinka normų, reguliavimą reikia pakartoti;

8.4.3. BMR spektrų gavimo sąlygos

Į 15 mm ar 10 mm ampulę įpilamas etilo alkoholio mėginys, paruoštas kaip 8.3.3 p. (ar vandens mėginys, paruoštas kaip 8.3.4 p.). Ampulė įstatomas į zondą.

BMR spektro gavimo sąlygos yra tokios:

- zondo temperatūra turi būti pastovi (pvz., 302 °K);

- nustatymo laikas 1200 Hz spektro pločiui yra mažiausiai 6,8 s (atminties blokas 16 Kb), t. y. apie 20 milijonųjų dalių (m. d.) esant 61,4 MHz arba 27 milijonosios dalys esant 46,1 MHz;

- impulsas 90°;

- nustatymo laiko koregavimas: jo vertė turi būti tokio pat laipsnio kaip ir pauzės laiko;

- parabolinis detektavimas: jei tai etilo alkoholis - nustatomas ofsetas 01 tarp -OD ir -CHD etalono signalų, o jei vanduo – tarp HOD ir TMK etalono signalų;

- iš protonų spektro nustatoma atskyrimo išėjimo signalo 02 vertė, kuri matuojama toje pačioje ampulėje su skaidymo rite. Signalo atskyrimas yra geras, kai 02 yra CH₃- ir -CH₂- grupių dažnio intervalo viduryje. Naudojamas plataus dažnio diapazono atskyrimo režimas.

Kiekvienam spektrui atliekami keli kaupimai NS, kurių pakaktų norint gauti signalo ir fono santykį, nurodytą 8.4.1p. ir šis NS kaupimų ciklas pakartojamas NE = 10 kartų. NS vertės priklauso nuo spektrometro ir zondo tipų (žr. 8.4 p.). Galimų variantų pavyzdžiai pateikti 8.3 lentelėje.

8.3 lentelė. Kaupimų kiekio pavyzdžiai

Spektrometras	10 mm zondas	15 mm zondas
7,05 T	NS = 304	NS = 200
9,40 T	NS = 200	NS = 128

8.2 pav. Vyne esančio metilo alkoholio su vidiniu standartu (N, N-tetrametilkarbamidas (TMK)) ²H AMR spektras (a); etilo alkoholio ²H spektras, išmatuotas tokiomis pat sąlygomis kaip ir a paveikslėlyje, tačiau be eksponentinės daugybos (LB = 0) (b)

8.5. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška:

8.5.1. Etilo alkoholis

Kiekvienam iš 10 gautų spektrų (žr. etilo alkoholio BMR spektrą 8.2 pav., a.) apskaičiuojama:

-R=3h_II /h_I =3´[II signalo aukštis (CH₃CHDOH) / I signalo aukštis (CH₂DCH₂OH)];

- (D/H)_I =1,5866´T_I´(m_st / m_A)´[(D/H)_st / ];

- (D/H)_II =2,3799´T_II´(m_st / m_A)´[(D/H)_st / ];

kai:

- T_I = I signalo aukštis (CH₂DCH₂OH) / vidinio etalono (TMK) signalo aukštis;

- T_II = II signalo aukštis (CH₃CHDOH) / vidinio etalono (TMK) signalo aukštis;

čia m_st ir m_A žr. 8.3.3.2 p.;  žr. 8.3.1.2.3 p.; (D/H)_st - vidinio etalono (TMK) izotopų santykis, nurodytas ant buteliuko, kurį tiekia Bendrijos Etalonų biuras.

Smailių aukščių naudojimas, o ne pločio, kas mažina tikslumą, remiasi prielaida, kad smailės pusaukščio pločiai yra vienodi, ir tai yra pagrįstas aproksimavimas, jei taikytinas 8.2 pav., b;

8.5.2. Vanduo

Kai su BMR nustatomas vandens ir TMK mišinio vandens izotopų santykis, naudojama tokia priklausomybė:

= 0,9306´T_IV´(m’_st / m’_E)´(D/H)_st

kai T_IV = vandens, išskirto iš vyno signalo (HOD) plotas / vidinio etalono (TMK) signalo plotas;

čia m’_st ir m’_E žr. 3.4.2 p.; (D/H)_st - vidinio etalono (TMK) izotopų santykis, nurodytas ant buteliuko, kurį tiekia Bendrijos Etalonų biuras;

8.5.3. Kiekvienam izotopų parametrui apskaičiuojamas 10 rezultatų vidurkis bei patikimumo intervalas. Kompiuterinė įranga (pvz., SNIF – NMR), suderinta su spektrometro skaičiavimo įranga ir priemonėmis, leidžia atlikti tokius skaičiavimus tiesiogiai bandymų metu.

PASTABA. Jei sureguliavus spektrometrą tarp alkoholio etalonų (8.4.2.2 p.) izotopų rodiklių vidutinių verčių ir verčių, kurias nustatė Bendrijos Etalonų biuras norminio nuokrypio tikslumu, pastebima sistemiška paklaida, galima atlikti patikslinimą ir surasti tikrąją kurio nors mėginio X vertę.

Interpoliacija atliekama naudojantis etaloninių mėginių vertėmis, kurios yra artimos mėginio X vertei.

Sakykim, kad yra išmatuotoji vertė, o - patikslinamoji vertė. Taigi gaunama:

= + a [-],

čia a = - ] / - ].

PAVYZDYS. Etaloniniai mėginiai, kuriuos tiekia ir etalonuoja Bendrijos Etalonų biuras: = 102,0 milijonosios dalys; = 91,95 milijonosios dalies. Etaloniniai mėginiai, kurie yra išmatuoti laboratorijoje: = 102,8 milijonosios dalies; = 93,0 milijonosios dalys. Abejotino tikslumo nepatikslintas mėginys: = 100,2; Apskaičiuojama: a = 1,0255 ir = 99,3 milijonosios dalies;

8.6. Rezultatų apskaičiavimasir išraiška:

Palyginama įtariamo mėginio santykio R^X vertė su palyginamųjų vynų R santykiais. Jei R^X skiriasi daugiau negu per du standartinius nuokrypius nuo palyginamojo vyno vidutinės vertės R^T, galima daryti prielaidą, kad gaminant vyną dėta ne vynuogių kilmės cukraus;

8.6.1. Cukraus, gauto iš cukrinių runkelių ir cukranendrių, ar kukurūzų gliukozės priedo nustatymas:

8.6.1.1. Vynas

R^X vertė yra didesnė už R^I: daroma prielaida, kad buvo įdėta cukrinių runkelių cukraus.

R^X vertė yra mažesnė už R^I: daroma prielaida, kad buvo įdėta cukranendrių ar kukurūzų cukraus.

Pažymima, kad  ir  vertės yra didesnės.

Patikrinama :

- jei manoma, kad buvo įdėta cukraus, gauto iš cukrinių runkelių, įtariamo mėginio vertė yra mažesnė už vidutinę  palyginamųjų mėginių vertę daugiau nei per vieno standartinio nuokrypio vertę;

- jei manoma, kad buvo įdėta cukraus, gauto iš cukranendrių ar kukurūzų, vertė yra didesnė už vertę daugiau nei per vieno standartinio nuokrypio vertę.

Apskaičiuojama cukraus priedo vertė E, kuri yra išreiškiama etilo alkoholio tūrio %:

Pridėjus cukraus, gauto iš cukrinių runkelių:

E % tūr. = t^V´[– ] / [ – ],

čia      = cukrinių runkelių alkoholio aptikimo I izotopų santykis;= 92,5 ^[1]; t^V = tiriamo vyno (X) tūrinė etilo alkoholio koncentracija.

Pridėjus cukraus, gauto iš cukranendrių ar kukurūzų:

E % tūr. = t^V´[–] / [ – ];

čia = cukraus iš cukranendrių ar kukurūzų aptikimo I izotopų santykis;= 110,5 (žr. tą pačią išnašą); t^V = tiriamo vyno (X) tūrinė etilo alkoholio koncentracija;

8.6.1.2. Misa, koncentruota misa ir rektifikuota koncentruota misa

Alkoholio, kuris buvo išskirtas kaip nurodyta 8.3.1 p. iš fermentuoto produkto, gauto (8.3.2 p.) iš misos, koncentruotos ir rektifikuotos koncentruotos misos, izotopų parametrų vertės yra nustatomos remiantis instrukcijomis, pateiktomis 8.6 p. „Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška“ (8.6.1.1p.), ir lyginamos su alkoholiu, kuris buvo išskirtasis misų fermentuoto produkto.

Cukraus priedo vertė („sodrinimas“) E, tūrio %, išreiškia alkoholio kiekį, kuris susidaro fermentuojant cukraus priedą. Žinant, kad prieš koncentruotų misų ir rektifikuotų misų fermentavimą produktas galėjo būti skiedžiamas, bei įvertinamo, kad iš 16,83 g cukraus susidaro 1 tūrio % alkoholio, apskaičiuojamas cukraus kiekis, kuris buvo įdėtas į 1 dm³ misos, koncentruotos misos ar rektifikuotos koncentruotos misos;

8.6.2. Cukraus, gauto iš cukrinių runkelių ir cukranendrių, ar kukurūzų gliukozės mišinių priedo nustatymas.

Šiuo atveju izotopų santykiai (D/H)_I ir R pasikeičia mažiau negu įdėjus tik vienos rūšies cukraus. (D/H)_II vertė padidėja taip pat kaip ir . Norint patikrinti, ar buvo įdėta tokių cukraus priedų, reikia masių spektroskopijos metodu nustatyti etilo alkoholio ¹³C/¹²C santykį: šis santykis, pridėjus cukraus, padidėja.

9. Pelenų kiekio nustatymo metodas

9.1. Apibrėžimas

Pelenų kiekis, arba peleningumas, yra visų produktų kiekis, kuris lieka sudeginus likutį, gautą išgarinus vyną. Sudeginama taip, kad visi katijonai (išskyrus amonio katijonus) pavirsta karbonatais ar kitomis bevandenėmis neorganinėmis druskomis;

9.2. Metodo esmė

Vyno ekstraktas yra sudeginamas 500–550 °C temperatūroje, kol organinės medžiagos visiškai sudega (oksiduojasi);

9.3. Įranga ir priemonės:

9.3.1. Verdančio vandens vonia.;

9.3.2. Analizinės 0,1 mg tikslumo svarstyklės;

9.3.3. Kaitintuvė ar infraraudonųjų spindulių garintuvas;

9.3.4. Elektrinė mufelinė krosnis su temperatūros reguliatoriumi;

9.3.5. Eksikatorius;

9.3.6. Plokščiadugnė platininė lėkštė, kurios skersmuo 70 mm, aukštis 25 mm;

9.4. Analizė

Į iš anksto pasvertą platininę lėkštę (pradinė masė p_o, g) pipete įpilama 20 cm³ vyno. Jis išgarinamas verdančio vandens vonioje, o gautos nuosėdos pakaitinamos ant kaitintuvės, įkaitusios iki 200 °C temperatūros, ar po infraraudonųjų spindulių garintuvu, kol prasideda anglėjimas. Kai nesiskiria jokie garai, lėkštė dedama į elektrinę mufelinę krosnį, kurios temperatūra yra 525±25 °C. Po 15 min lėkštė išimama iš krosnies, įpilama 5 cm³ vandens, vanduo išgarinamas vandens vonioje ar po infraraudonųjų spindulių garintuvu ir vėl nuosėdos 10 min kaitinamos 525 °C temperatūroje. Jei apanglėjusios dalelės iki galo nesudegė (oksidavosi), procedūra kartojama - dar kartą sudrėkinamos dalelės, išgarinamas vanduo ir sudeginama. Į vynų, kuriuose yra daug cukraus, ekstraktą prieš pirmąjį deginimą patartina įlašinti kelis lašus gryno augalinio aliejaus, kuris apsaugo nuo lėkštelėje esančių medžiagų išsitaškymo. Atvėsinta eksikatoriuje lėkštė pasveriama ir užrašoma jos masė (p₁, g). Pelenų kiekis 20 cm³ mėginio bus:

p=(p₁–p₀), g;

9.5. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška

Pelenų kiekis P apskaičiuojamas pagal formulę P=50´p ir išreiškiamas g/dm³ dviejų skaičių po kablelio tikslumu.

10. Pelenų šarmingumo nustatymo metodas

10.1. Apibrėžimas

Pelenų šarmingumas – tai su organinėmis vyno rūgštimis susijungusių katijonų kiekių suma, išskyrus amonio jonus;

10.2. Metodo esmė

Pelenai ištirpinami žinomame (pertekliniame) karšto etalonizuoto rūgšties tirpalo kiekyje: perteklius nustatomas titruojant, kur indikatorius yra metiloranžinis;

10.3. Įranga, priemonės ir reagentai:

10.3.1. Verdančio vandens vonia;

10.3.2. 0,05 M sieros rūgšties (H₂SO₄) tirpalas;

10.3.3. 0,1 M natrio hidroksido (NaOH) tirpalas;

10.3.4. 0,1 % metiloranžinio tirpalas vandenyje;

10.4. Analizė

Į platininę lėkštelę su pelenais, gautais sudeginus 20 cm³ vyno, įpilama 10 cm³ 0,05 M sieros rūgšties tirpalo. Lėkštelė palaikoma verdančio vandens vonioje apie 15 min. Kad nuosėdos greičiau ištirptų, jos pamaišomos stikline lazdele. Įlašinami du lašai metiloranžinio tirpalo ir titruojamas sieros rūgšties perteklius 0,1 M natrio hidroksidu tol, kol indikatoriaus spalva tampa geltona;

10.5. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška

Pelenų šarmingumas išreiškiamas mekv/dm³ vieno skaičiaus po kablelio tikslumu ir apskaičiuojamas pagal formulę A=5´(10–n); čia n – panaudoto 0,1 M natrio hidroksido kiekis, cm³.

11. Chloridų nustatymo metodas

11.1. Metodo esmė

Chloridai vyne nustatomi tiesiogiai potenciometrijos būdu, naudojant Ag/AgCl elektrodą;

11.2. Įranga ir priemonės:

11.2.1. pH-metras su milivoltmetru, sugraduotas mažiausiai kas 2 mV;

11.2.2. Magnetinis maišiklis;

11.2.3. Ag/AgCl elektrodas su sočiojo kalio nitrato tirpalo elektrolitu;

11.2.4. Mikrobiuretė, sugraduota kas 0,01 cm³;

11.2.5. Sekundmatis;

11.3. Reagentai:

11.3.1. Etaloninis chlorido tirpalas: į 1 dm³ talpos matavimo kolbą įpilama vandens ir jame ištirpinama 2,1027 g kalio chlorido (KCl, su ne didesniu kaip 0,005 % bromo priemaišų kiekiu), kuris buvo džiovintas eksikatoriuje 7 dienas, ir praskiedžiama iki žymės. 1 cm³ šio tirpalo yra 1 mg Cl^-;

11.3.2. Sidabro nitrato titravimo tirpalas: į 1 dm³ talpos matavimo kolbą įpilama 10 tūrio % koncentracijos etilo alkoholio tirpalo ir jame ištirpinama 4,7912 g sidabro nitrato (AgNO₃), praskiedžiama iki žymės. 1 cm³ šio tirpalo ekvivalentus 1 mg Cl^-;

11.3.3. Ne mažesnės kaip 65 % koncentracijos azoto rūgštis (HNO₃, gryna, r₂₀ = 1,40 g/cm³);

11.4. Analizė:

11.4.1. Supilama 5,0 cm³ etaloninio chlorido tirpalo į 150 cm³ cilindro indą, kuris yra padėtas ant magnetinio maišiklio. Paskui tirpalas praskiedžiamas vandeniu, kad susidarytų apie 100 cm³ tirpalo, ir parūgštinamas 1,0 cm³ azoto rūgšties. Panardinamas elektrodas ir lengvai maišant tirpalas titruojamas iš mikrobiuretės sidabro nitrato tirpalu. Pirmi 4 cm³ sulašinami dalimis po 1,00 cm³ ir užrašomos atitinkamos potencialo vertės milivoltais, 2 cm³ – dalimis po 0,20 cm³. Galiausiai lašinama po 1 cm³, kol bendras įlašinto tirpalo kiekis pasiekia 10 cm³. Po kiekvieno įlašinimo palaukiama apytiksliai 30 s ir tada užsirašomos vertės. Pagal gautus rezultatus ant milimetrinio popieriaus nubraižoma įtampos priklausomybės nuo suvartoto titruoti tirpalo kiekio kreivė: vienoje ašyje atidedamos gautas potencialo vertės (mV), kitoje – atitinkami titruoti suvartoto tirpalo kiekiai (cm³). Gautoje kreivėje nustatomas ekvivalentinio taško potencialas;

11.4.2. Supilama 5 cm³ etaloninio chlorido tirpalo į 150 cm³ cilindro indą, kuriame jau yra įpilta 95 cm³ vandens ir 1 cm³ azoto rūgšties. Įmerkiama elektrodas ir lengvai maišant titruojama, kol pasiekiamas ekvivalentinio taško potencialas. Ši procedūra kartojama tol, kol gauti rezultatai pasidaro pakankamai panašūs. Toks patikrinamasis nustatymas atliekamas prieš kiekvieną chloridų analizę tiriamųjų mėginių serijoje;

11.4.3. Supilama 50 cm³ analizei skirto vyno į 150 cm³ cilindro indą. Įpilama 50 cm³ distiliuoto vandens bei 1 cm³ azoto rūgšties ir titruojama, kaip aprašyta 11.4.2 p;

11.5. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška:

11.5.1. Apskaičiavimas

Jei n yra titruoti suvartoto sidabro nitrato tirpalo kiekis, cm³, tai chloridų kiekis tiriamajame skystyje bus:

20´n,                                     išreiškiant Cl kiekiu, mg/dm³;

0,5633´n,                              išreiškiant Cl kiekiu, mekv/dm³;

32,9´n,                                  išreiškiant natrio chlorido kiekiu, mg/dm³;

11.5.2. Pakartojamumas

r = 1,2 mg/dm³ Cl; r = 0,03 mekv/dm³ Cl; r = 2,0 mg/dm³ NaCl;

11.5.3. Atkuriamumas

R = 4,1 mg/dm³ Cl; R = 0,12 mekv/dm³ Cl; R = 6,8 mg/dm³ NaCl;

11.6. Tikslesnis nustatymo metodas

Taikant šį metodą, remiamasi išbaigto titravimo kalibravimo kreive, kuri gaunama, kai mėginio analizė atliekama titruojant sidabro nitrato tirpalu:

11.6.1. Supilama 50 cm³ vyno į 150 cm³ cilindro indą. Paskui įpilama 50 cm³ distiliuoto vandens ir 1 cm³ azoto rūgšties. Titruojama sidabro nitrato tirpalu. Lašinama dozuojant po 0,5 cm³ ir užrašoma atitinkama potencialo vertė, mV. Atlikus pirmą titravimo procedūrą, nustatoma, kiek apytiksliai reikia sidabro nitrato tirpalo;

11.6.2. Vėl pradedama titruoti tokiomis pat sąlygomis. Lašinama dozuojant po 0,5 cm³ titravimo tirpalo, kol bendras to kiekis tampa 1,5–2 cm³ mažesnis už tą, kuris buvo nustatytas pagal 11.6.1 p. Paskui pilama dalimis po 0,2 cm³ titravimo tirpalo, kol potencialas ima viršyti ekvivalentinio taško potencialo vertę, kuri nustatoma apytiksliai, pirmiausia pilant po 0,2 cm³, pakui po 0,5 cm³ tirpalo. Galutinis ekvivalentinio potencialo taškas bei tikslus titruoti suvartoto sidabro nitrato kiekis nustatomas iš kalibravimo kreivę arba pagal formulę:

V=V’+DV_i´[(DDE₁/(DDE₁+DDE₂)];

čia V – titravimo tirpalo kiekis ekvivalentiniame taške, cm³; V’ – titravimo tirpalo kiekis prieš didžiausią potencialo pokytį, cm³; DV_I – pastovus dalimis pilamo titravimo tirpalo, t. y. 0,2 cm³; DDE₁ – antrasis potencialų skirtumas prieš didžiausią potencialo pokytį; DDE₂ – antrasis potencialų skirtumas po didžiausio potencialo pokyčio.

PAVYZDYS.

AgNO3 titravimo tirpalo kiekis	E įtampa, mV	Skirtumas, DE	Antrasis skirtumas, DD E
0	204
0,2	208	4
0,4	212	4	0
0,6	218	6	2
0,8	224	6	0
1,0	230	6	0
1,2	238	8	2
1,4	250	12	4
1,6	272	22	10
1,8	316	44	22
2,0	350	34	10
2,2	376	26	8
2,4	396	20	6

Šiame pavyzdyje ekvivalentinis taškas yra tarp 1,6 ir 1,8 cm³, kadangi šiame intervale įvyksta didžiausias potencialo pokytis (DE = 44mV). Sidabro nitrato titravimo tirpalo kiekis, suvartojamas chloridams nustatyti mėginyje, yra: V=1,6+0,2´[(22/(22+10)]=1,74 cm³.

12. Sulfatų nustatymo metodai

12.1. Metodo esmė:

12.1.1. Pamatinis metodas – bario sulfato nusodinimas ir svėrimas

Bario fosfatas, nusodintas tokiomis pat sąlygomis, yra pašalinamas plaunant susidariusias nuosėdas druskos rūgštimi. Tuo atveju, jei misoje ar vyne yra didelis kiekis sieros dioksido, pirmiausia rekomenduojama pašalinti sulfitus, virinant mėginį hermetiškame inde;

12.1.2. Greitasis metodas

Vynai klasifikuojami į kelias kategorijas vadinamuoju ribų metodu, kurio esmė - bario sulfato nusodinimas naudojant titruotą bario jonų tirpalą;

12.2. Pamatinis metodas:

12.2.1. Reagentai

2 M druskos rūgšties tirpalas; bario chlorido tirpalas: 200 g/dm³ BaCl₂´2H₂O;

12.2.2. Analizė:

12.2.2.1. Bendroji analizės metodika

Į 50 cm³ centrifugos mėgintuvėlį įpilama 40 cm³ analizuojamo mėginio, 2 cm³ 2 M druskos rūgšties ir 2 cm³ bario chlorido tirpalo; turinys sumaišomas stikline lazdele, nuo jos skystis nuplaunamas nedideliu kiekiu distiliuoto vandens ir paliekama pastovėti 5 min. Tada centrifuguojama 5 min, paskui centrifugatas atsargiai nupilamas.

Išplaunamos bario sulfato nuosėdos: įpilama 10 cm³ 2 M druskos rūgšties, nuosėdos išmaišomos (gaunama suspensija) ir centrifuguojama 5 min. Tada atsargiai nupilamas centrifugatas. Plovimo procedūra kartojama du kartus tokiomis pat sąlygomis, kiekvieną kartą panaudojant po 15 cm³ distiliuoto vandens.

Visos nuosėdos distiliuotu vandeniu kokybiškai nuplaunamos į pasvertą platininį tiglį ir išgarinamos verdančio vandens vonioje, kad liktų sausos. Išdžiovintos nuosėdos kelis kartus trumpai pakaitinamos dujinio degiklio liepsnoje, kol pasidaro baltos. Nuosėdos atvėsinamos eksikatoriuje ir pasveriamos. Užrašoma gauto bario sulfato masė m, mg;

12.2.2.2. Specialioji analizės metodika sulfituotai misai ir vynui, kuriuose yra didelis sieros dioksido kiekis.

Pirmiausia pašalinamas sieros dioksidas: į 500 cm³ talpos kūgio kolbą, turinčią dalijamąjį piltuvą su čiaupu ir išleidimo atšaka, įpilama 25 cm³ vandens ir 1 cm³ grynos druskos rūgšties: r₂₀=1,15–1,18 g/cm³. Tirpalas užvirinamas, kad iš jo išeitų oras, ir per dalijamąjį piltuvą įpilama 100 cm³ vyno. Toliau virinama, kol skysčio kiekis kolboje sumažėja iki maždaug 75 cm³, atvėsinama ir skystis supilamas į 100 cm³ talpos matavimo kolbą. Iki žymės pripilama vandens. Sulfatai 40 cm³ gauto mėginio nustatomi pagal 12.2.2.1 p. aprašytą metodiką;

12.2.3. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška:

12.2.3.1. Apskaičiavimas

Sulfatų kiekis apskaičiuojamas pagal formulę: 18,67´m; jis išreiškiamas sveikuoju kalio sulfato (K₂SO₄) miligramų skaičiumi 1 dm³ mėginio;

12.2.3.2. Pakartojamumas

Iki 1000 mg/dm³ - r = 27 mg/ dm³; maždaug 1500 mg/dm³ - r = 41 mg/ dm³;

12.2.3.3. Atkuriamumas

Iki 1000 mg/dm³ - R = 51 mg/dm³; maždaug 1500 mg/dm³ - R = 81 mg/ dm³;

12.1 lentelė. Kalio sulfato kiekio įvertinimas pagal filtruoto vyno mėginio reakciją su titruotu bario jonų tirpalu

Mėgintuvėlio Nr.	Vyno kiekis, cm^3	Bario chlorido kiekis, cm^3	Filtruotas vynas +
			Skiesta sulfato rūgštis	Bario chlorido tirpalas
1	10	3,5	Drumstas	Skaidrus
			(mažiau negu 0,7 g/dm^3 K2SO4)
			Skaidrus	Drumstas
			(daugiau negu 0,7 g/dm^3 K2SO4)
2	10	5	Drumstas	Skaidrus
			(mažiau negu 1 g/dm^3 K2SO4)
			Skaidrus	Drumstas
			(daugiau negu 1 g/dm^3 K2SO4)
3	10	10	Drumstas	Skaidrus
			(mažiau negu 2 g/dm^3 K2SO4)
			Skaidrus	Drumstas
			(daugiau negu 2 g/dm^3 K2SO4)

12.3. Greitasis analizės metodas:

12.3.1. Reagentai:

12.3.1.1. Bario chlorido titravimo tirpalas: ištirpinama 2,804 g bario chlorido (BaCl₂´2H₂O) ir 10 cm³ druskos rūgšties, (HCl, r₂₀ = 1,15–1,18 g/cm³), nemažame kiekyje vandens, kad susidarytų 1 dm³ tirpalo. 1 cm³ šio tirpalo nusodina sulfatų jonų kiekį, kuris atitinka 2 mg kalio sulfato;

12.3.1.2. Sieros rūgštis (H₂SO₄, r₂₀ = 1,84 g/cm³), skiesta santykiu 1:10 (m/v);

12.3.2. Analizė

Į tris mėgintuvėlius įpilama po 10 cm³ misos ar vyno: į mėgintuvėlį Nr. 1 įpilama 3,5 cm³ bario chlorido tirpalo, į Nr. 2 – 5 cm³ ir į Nr. 3 – 10 cm³. Viskas suplakama ir užvirinama. Paliekama 1-2 h pastovėti. Kiekviename mėgintuvėlyje susidaręs skystis dekantuojamas, filtruojamas ir padalijamas į dvi dalis. Į vieną dalį įlašinami keli praskiestos sieros rūgšties lašai, į kitą – keli bario chlorido tirpalo lašai. Apžiūrimas kiekvienas mėgintuvėlis ir pasižymima, ar skystis skaidrus ar drumstas. Šių stebėjimų paaiškinimas pateiktas 12.1 lentelėje.

13. Bendrojo rūgščių kiekio (bendrojo rūgštingumo) nustatymo metodas

13.1. Apibrėžimas

Vyno arba misos bendrasis rūgštingumas - tai titruojamų rūgščių kiekių suma, kai misos arba vyno pH, pridėjus šarmo tirpalo, tampa lygus 7. Anglies dioksidas į bendrąjį rūgštingumą neįskaitomas;

13.2. Metodo esmė

Potenciometrinis titravimas arba titravimas lyginant su etaloniniu tirpalu; reakcijos pabaigos indikatorius - bromtimolio mėlynasis;

13.3. Įranga ir priemonės:

13.3.1. Vandens siurblys;

13.3.2. 500 cm³ talpos kolba filtruoti vakuume;

13.3.3. 12 cm skersmens cilindro stiklinės;

13.3.4. Potenciometras su pH vienetų skale ir elektrodai; stiklinis elektrodas laikomas distiliuotame vandenyje; kalomelio elektrodas laikomas koncentruotame kalcio chlorido tirpale;

13.4. Reagentai ir tirpalai:

13.4.1. Buferinis tirpalas, kurio pH 7:

– kalio dihidrofosfatas KH₂PO₄, g                       107,3

– 1 M natrio hidroksido tirpalas, cm³                         500

– vanduo, cm³                                                                         iki 1000

Galima naudoti taip pat etaloninį komercinį tirpalą, kurio pH 7;

13.4.2. 0,1 M natrio hidroksido tirpalas;

13.4.3. 4 g/dm³ bromtimolio mėlynojo tirpalas:

– bromtimolio mėlynasis, g                                   4

– 96 % rektifikuotas etilo alkoholis, cm³                  200

Po ištirpinimo įpilama: 200 cm³ vandens be anglies dioksido, 7,5 cm³ 1 M natrio hidroksido tirpalo, kol susidaro mėlynai žalia spalva (pH 7), ir praskiedžiama iki 1000 cm³ vandeniu;

13.5. Analizė:

13.5.1. Mėginio paruošimas

Anglies dioksido pašalinimas: įpilama apie 50 cm³ vyno į kolbą filtruoti vakuume; purtoma ir tuo pat metu sudaromas vakuumas vandens siurbliu. Purtoma 1-2 min.; Ruošiant rektifikuotos koncentruotos misos mėginį, 200 g tiksliai pasvertos misos įpilama į 500 cm³ matavimo kolbą, praskiedžiama vandeniu iki žymės ir homogenozuojama.

13.5.2. Potenciometrinis titravimas:

13.5.2.1. pH–metro kalibravimas: kalibruojama 20 ºC temperatūroje pagal prietaiso instrukciją, naudojant buferinį tirpalą, kurio pH 7 20 ºC temperatūroje;

13.5.2.2. Analizė

Į cilindro stiklinę įpilama 10 cm³ vyno, paruošto, kaip nurodyta 13.4.1 p., įpilama apie 10 cm³ distiliuoto vandens, paskui iš biuretės titruojama 0,1 M natrio hidroksido tirpalu, kol pH tapa lygus 7 20 ºC temperatūroje. Šarmo tirpalas pilamas lėtai, nuolat purtant. Pažymimas titruoti suvartotas 0,1 M NaOH kiekis, cm³, n;

13.5.3. Titravimas su indikatoriumi - bromtimolio mėlynuoju:

13.5.3.1. Paruošiamasis titravimas

Paruošiamas palyginamasis tirpalas: į cilindro stiklinę įpilama 25 cm³ distiliuoto vandens, 1 cm³ bromtimolio mėlynojo ir 10 cm³ vyno, paruošto, kaip nurodyta 13.4.1 p. Pilamas 0,1 M natrio hidroksido tirpalas, kol susidaro mėlynai žalia spalva, ir 5 cm³ buferinio tirpalo, kurio pH 7;

13.5.3.2. Matavimas

Į cilindro stiklinę įpilama 30 cm³ virinto distiliuoto vandens, 1 cm³ bromtimolio mėlynojo ir 10 cm³ vyno, paruošto, kaip nurodyta 13.4.1 p. Titruojama 0,1 M natrio hidroksido tirpalu, kol spalva pasidaro identiška palyginamojo tirpalo spalvai (13.5.3.1 p.). Pažymimas titruoti suvartotas 0,1 M natrio hidroksido tirpalo kiekis, cm³, n;

13.6. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška:

13.6.1. Apskaičiavimas

13.6.1.1. Vynas

Bendrasis rūgštingumas, išreikštas mgekv/dm³ (vieno ženklo po kablelio tikslumu): A=10´n.

Bendrasis rūgštingumas, išreikštas vyno rūgšties g/dm³ (dviejų ženklų po kablelio tikslumu): A’=0,075´A.

Bendrasis rūgštingumas, išreikštas sulfato rūgšties g/dm³ (dviejų ženklų po kablelio tikslumu): A’=0,049´A;

13.6.1.2. Rektifikuota koncentruota misa

Bendrasis rūgštingumas, išreikštas mgekv/dm³ rektifikuotos koncentruotos misos: a–5n.

Bendrasis rūgštingumas, išreikštas mgekv/dm³ bendrųjų cukrų: A=(500´n)/P, čia P–% bendrųjų cukrų koncentracija (m/m). Jis užrašomas vieno ženklo po kablelio tikslumu.

13.6.2. Pakartojamumas

Titravimo su indikatoriumi atveju (13.5.3): r = 0,9 mgekv/dm³; r = 0,04 g/dm³ sieros rūgšties; r = 0,07 g/dm³ vyno rūgšties;

13.6.3. Atkuriamumas

Titravimo su indikatoriumi atveju (13.5.3): baltajam ir rausvajam vynui: R = 3,6 mgekv/dm³; R = 02 g/dm³ sieros rūgšties; R = 0,3 g/dm³ vyno rūgšties; raudonajam vynui: R = 5,1 mgekv/dm³; R = 0,3 g/dm³ sieros rūgšties; R = 0,4 g/dm³ vyno rūgšties.

14. Lakiųjų rūgščių kiekio nustatymo metodai

14.1. Apibrėžimas

Lakiosios rūgštys - tai riebalų rūgštys, kurių pagrindinė yra acto rūgštis. Šios rūgštys vyne yra laisvos ir druskų pavidalu;

14.2. Metodo esmė

Lakiųjų rūgščių titravimas vyno distiliate, gautame distiliavimo vandens garais būdu. Iš vyno pašalinamas anglies dioksidas. Sieros dioksidas ir sorbo rūgštis, kurios gali pereiti į distiliatą, lakiosioms rūgštims nepriskiriamos. Joms taikomos tam tikros pataisos.

PASTABA. Salicilo rūgštis, kuri kai kuriose šalyse naudojama vynui stabilizuoti prieš analizę, dalinai pereina į distiliatą. Būtina nustatyti jos kiekį ir patikslinti rezultatą;

14.3. Įranga ir priemonės

Lakiųjų rūgščių distiliavimo vandens garais aparatas, susidedantis iš garų generatoriaus (vandens garuose neturi būti anglies dioksido), kolbos su garų tiekimo vamzdeliu, deflegmatoriaus ir kondensatoriaus.

Aparatas turi būti patikrintas trimis bandymais:

A. Į kolbą su garų tiekimo vamzdeliu įpilama 20 cm³ virinto vandens; paimama 250 cm³ distiliato ir į jį įpilama 0,1 cm³ 0,1 M natrio hidroksido tirpalo, įlašinami du lašai fenolftaleino tirpalo: rožinė spalva turi išlikti stabili ne mažiau kaip 10 s (tai reiškia, kad vandens garuose nėra anglies dioksido).

B. Į kolbą su garų tiekimo vamzdeliu įpilama 20 cm³ 0,1 M acto rūgšties tirpalo. Surinkama 250 cm³ distiliato ir titruojama 0,1 M natrio hidroksido tirpalu. Suvartoto šarmo kiekis turi būti ne mažesnis kaip 19,9 cm³: tai reiškia, kad ³99,5 % acto rūgšties buvo nudistiliuota.

C. Į kolbą su garų tiekimo vamzdeliu įpilama 20 cm³ 1 M pieno rūgšties tirpalo. Surenkama 250 cm³ distiliato ir titruojama 0,1 M natrio hidroksido tirpalu. Suvartoto titruoti šarmo kiekis turi būti ne didesnis kaip 10 cm³: tai reiškia, kad į distiliatą patenka £0,5 % pieno rūgšties. Bet koks aparatas arba prietaisas, tenkinantis šiuose bandymuose nustatytus reikalavimus, laikomas atitinkančiu oficialius tarptautinius standartus;

14.4. Reagentai ir tirpalai:

14.4.1. Kristalinė vyno rūgštis;

14.4.2. 0,1 M natrio hidroksido tirpalas;

14.4.3. Fenolftaleino tirpalas: 1 g/100 cm³ 96 % etilo alkoholyje;

14.4.4. Druskos rūgšties tirpalas (ρ₂₀ =1,18 g/cm³), atskiestas ¼ tūris/tūryje;

14.4.5. 0,005 M jodo tirpalas;

14.4.6. Kalio jodidas;

14.4.7. Krakmolo tirpalas: ištirpinama 5 g krakmolo 500 cm³ vandens, 10 min virinama, dedama 200 g natrio chlorido. Po atvėsinimo praskiedžiama iki 1 dm³;

14.4.8. Sotusis natrio tetraborato tirpalas (Na₂B₄O₇´10H₂O), tai yra apie 55 g/dm³ 20 ºC temperatūroje;

14.4.9. 0,1 M acto rūgšties tirpalas;

14.4.10. 1 M pieno rūgšties tirpalas;

14.5. Analizė:

14.5.1. Mėginio paruošimas

Anglies dioksido pašalinimas: apie 50 cm³ vyno įpilama į kolbą filtruoti vakuume, 1-2 min purtoma ir tuo pačiu metu sudaromas vakuumas vandens siurbliu;

14.5.2. Distiliavimas vandens garais

Įpilama 20 cm³, kaip nurodyta 14.4.1 p. degazuoto vyno į kolbą su garų tiekimo vamzdeliu. Įpilama apie 0,5 g vyno rūgšties. Distiliuojama, kol susirinks ne mažiau kaip 250 cm³ distiliato;

14.5.3. Titravimas

Įlašinami į distiliatą 2 lašai fenolftaleino tirpalo ir titruojama 0,1 M natrio hidroksido tirpalu. Suvartotas šarmo tirpalo kiekis, cm³, pažymimas n. Dar įlašinami 4 lašai druskos rūgšties, praskiestos santykiu 1:4, įpilama 2 cm³ krakmolo tirpalo ir įdedami keli kristalėliai kalio jodido. Titruojamas laisvasis sieros dioksidas 0,005 M jodo tirpalu. Titruoti suvartotas jodo kiekis, cm³, pažymimas n’. Pilama sočiojo natrio tetraborato tirpalo, kol vėl atsiranda rožinė spalva. Titruojamas sujungtasis sieros dioksidas 0,005 M jodo tirpalu. Titruoti suvartotas jodo tirpalo kiekis, cm³, pažymimas n“;

14.6. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška:

14.6.1. Apskaičiavimo būdas

Lakiųjų rūgščių kiekis, išreikštas mgekv/dm³ vieno ženklo po kablelio tikslumu, apskaičiuojamas pagal formulę:

5´(n-0,1´n’-0,05´n“).

Lakiųjų rūgščių kiekis, išreikštas sulfato rūgšties g/dm³ dviejų ženklų po kablelio tikslumu, apskaičiuojamas pagal formulę:

0,245´(n–0,1´n’–0,05´n“).

Lakiųjų rūgščių kiekis, išreikštas acto rūgšties g/dm³ dviejų ženklų po kablelio tikslumu, apskaičiuojamas pagal formulę:

0,300´(n–0,1´n’–0,05´n“).

14.6.2. Pakartojamumas

r = 0,7 mgekv/dm³; r = 0,03 g/dm³ sieros rūgšties; r = 0,04 g/dm³ acto rūgšties;

14.6.3. Atkuriamumas

R =1,3 mgekv/dm³; R = 0,06 g/dm³ sieros rūgšties; R = 0,08 g/dm³ acto rūgšties;

14.6.4. Vynas su sorbo rūgšties priedu

Kadangi iki 96 % sorbo rūgšties nusidistiliuoja su vandens garais, jos kiekį, esantį 250 cm³ distiliato, reikia atimti iš gauto rezultato; čia reikia turėti omenyje, kad 100 mg sorbo rūgšties atitinka pagal rūgštingumą 0,89 mgekv arba 0,004 g sulfato rūgšties, arba 0,053 g acto rūgšties ir kad sorbo rūgšties (mg/dm³) kiekis taip pat buvo nustatytas;

14.7. Salicilo rūgšties, perėjusios į lakiųjų rūgščių distiliatą, analizė:

14.7.1. Metodo esmė

Nustačius lakiųjų rūgščių kiekį ir jį patikslinus pagal nustatytą sieros dioksido kiekį, toliau distiliatas rūgštinamas ir dedama trivalentės geležies druskos. Jeigu yra salicilo rūgšties, susidaro violetinė spalva. Salicilo rūgšties, perėjusios kartu su lakiosiomis rūgštimis į distiliatą, kiekis nustatomas kitame distiliate, kurio tūris yra lygus distiliato, kuriame nustatytas lakiųjų rūgščių kiekis, tūriui. Jame salicilo rūgštis nustatoma kolorimetrijos metodu. Atėmus iš gauto lakiųjų rūgščių kiekio antrojo distiliato rūgštingumą, padaroma atitinkama pataisa;

14.7.2. Reagentai ir tirpalai:

14.7.2.1. Druskos rūgštis (1,18 ≤ ρ₂₀ ≤1,19 g/cm³);

14.7.2.2. 0,1 M Na₂S₂O₃´5H₂O tirpalas;

14.7.2.3. 1,6 g/dm³ konc. natrio salicilato tirpalas;

14.7.2.4. 0,01 M NaC₇H₅O₃ tirpalas;

14.7.2.5. Geležies (III) amonio sulfatas tirpalas (10 g/100 cm³);

14.7.3. Analizė:

14.7.3.1. Kokybinis salicilo rūgšties nustatymas lakiųjų rūgščių distiliate

Nustačius lakiųjų rūgščių kiekį ir jį patikslinus pagal nustatytą sieros dioksido kiekį, į kūgio kolbą įpilama 0,5 cm³ druskos rūgšties, 0,3 cm³ 0,1 M natrio tiosulfato ir 1 cm³ geležies (III) amonio sulfato tirpalo. Jeigu yra salicilo rūgšties, susidaro violetinė spalva;

14.7.3.2. Salicilo rūgšties kiekio nustatymas

Kūgio kolboje pažymimas brūkšniu distiliato tūris, kuris paskui išpilamas, o kolba išplaunama vandeniu. Distiliuojamas naujas 20 cm³ tūrio vyno mėginys vandens garais ir distiliatas surenkamas į pažymėtąją kolbą. Į distiliatą įpilama 0,3 cm³ druskos rūgšties ir 1 cm³ geležies (III) amonio sulfato tirpalo. Kūgio kolboje esantis skystis įgauna violetinę spalvą.

Į antrą taip pat pažymėtą kolbą įpilama distiliuoto vandens iki tokio pat lygio kaip ir kolboje su vyno distiliatu. Įpilama 0,3 cm³ druskos rūgšties ir 1 cm³ geležies (III) amonio sulfato tirpalo. Iš biuretės pilamas 0,01 M natrio salicilato tirpalas, kol spalva netampa identiška vyno distiliato spalvai. Suvartoto titruoti natrio salicilato kiekis pažymimas n“’, cm³;

14.8. Lakiųjų rūgščių kiekio patikslinimas

Iš 0,1 M natrio hidroksido tirpalo tūrio n, suvartoto distiliatui titruoti lakiųjų rūgščių analizės metu, atimamas tūris 0,1 n“’, cm³.

15. Sujungtųjų rūgščių kiekio (fiksuotojo rūgštingumo) nustatymo metodas

15.1. Metodo esmė

Sujungtųjų rūgščių kiekis (fiksuotasis rūgštingumas) apskaičiuojamas iš bendrojo rūgščių kiekio atėmus lakiųjų rūgščių kiekį;

15.2. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška

Sujungtųjų rūgščių kiekis išreiškiamas:

-miliekvivalentais litre (mekv/dm³);

-vyno rūgšties gramais litre (g/dm³).

16. Vyno rūgšties nustatymo metodai

16.1. Metodų esmė:

16.1.1. Pamatinis metodas

Vyno rūgštis nusodinama kalcio (±) tartrato pavidalu ir nustatoma gravimetriškai, o palyginimui - tūrio matavimo metodu. Nusodinimo sąlygos (pH, bendrasis tūris, nusodinamų jonų koncentracijos) yra tokios, kad kalcio (±) tartratas nusodinamas visiškai, tuo tarpu kalcio D (-) tartratas lieka tirpale. Jei į vyną įdėta mezovyno rūgšties, dėl kurios ne visas kalcio (±) tartratas nusėda, ją prieš vartojimą reikia hidrolizinti;

16.1.2. Įprastinis metodas

Vyno rūgštis, atskirta jonitiniu filtru, yra nustatoma kolorimetriškai eliuate, išmatavus raudonos spalvos, atsirandančios reaguojant su vanadžio rūgštimi, intensyvumą. Eliuate taip pat yra pieno ir obuolių rūgščių, tačiau jos netrukdo;

16.2. Pamatinis metodas:

16.2.1. Gravimetrinis metodas:

16.2.1.1. Reagentai:

16.2.1.1.1. Kalcio acetato tirpalas, kurio 1 dm³ yra 10 g kalcio: pasveriama 1 dm³ talpos matavimo kolboje 25 g kalcio karbonato (CaCO₃), įpilama 40 cm³ ledinės acto rūgšties (CH₃COOH) (r₂₀ = 1,05 g/cm³) ir praskiedžiama vandeniu iki brūkšnio;

16.2.1.1.2. Kristalinis kalcio (±) tartratas (CaC₄O₆H₄´4H₂O): į 400 cm³ talpos laboratorinę stiklinę įpilama 20 cm³ L(+) vyno rūgšties tirpalo (5 g/dm³); dar įpilama 20 cm³ amonio D(-) tartrato tirpalo (6,126 g/ dm³) ir 6 cm³ kalcio acetato tirpalo, kurio 1 dm³ yra 10 g kalcio (16.2.1.1.1 p.).

Paliekama 2 h kad susidarytų nuosėdos. Susidariusios nuosėdos supilamos į stiklo filtrą Nr. 4, perplaunamos tris kartus su maždaug 30 cm³ distiliuoto vandens ir išdžiovinamos džiovinimo spintoje 70 °C temperatūroje iki pastovios masės. Vartojant aukščiau nurodytus reagentų kiekius, gaunama apie 340 mg kristalinio kalcio (±) tartrato. Jis laikomas užkimštame butelyje;

16.2.1.1.3. Nusodiklio tirpalas (pH 4,75):

– D(-) vyno rūgštis                                                                                 122 mg;

– 25 tūrio % amonio hidroksido tirpalas (r₂₀ = 0,97 g/cm³)                  0,3 cm³;

– kalcio diacetato tirpalas (10 g kalcio/dm³)                                          8,8 cm³;

– vanduo                                                                                                iki 1000 cm³.

Ištirpinama D(-) vyno rūgštis, įpilama amonio hidroksido tirpalo ir praskiedžiama vandeniu, kad susidarytų maždaug 900 cm³. Toliau įpilama 8,8 cm³ kalcio acetato tirpalo, praskiedžiama vandeniu, kad būtų vienas litras tirpalo, ir su acto rūgštimi pakoreguojamas pH - iki 4,75. Kadangi kalcio (±) tartratas šiame tirpale šiek tiek tirpus, įdedama 5 mg kalcio (±) tartrato litrui tirpalo, maišoma 12 h ir nufiltruojama;

16.2.1.2. Analizė:

16.2.1.2.1. Vynas, į kurį nebuvo dėta mezovyno rūgšties

Į 600 cm³ talpos laboratorinę stiklinę įpilama 500 cm³ nusodiklio tirpalo ir 10 cm³ vyno. Sumaišoma ir patrynus indo šonus stiklo lazdelės galu paskatinamas nuosėdų susidarymas. Paliekama 12 h (pernakt), kad susidarytų nuosėdos. Skystis ir nuosėdos nutitruojamos per pasvertą stiklo filtrą Nr. 4, kuris yra įstatytas į švarią vakuuminę kolbą. Su filtratu gerai praskalaujamas indas, kuriame susidarė nuosėdos, kad jame nieko neliktų. Nuosėdos išdžiovinamos džiovinimo spintoje 70 °C temperatūroje, kol svoris pasidaro pastovus, ir pasveriamos. Sakykim, kad p yra gauto kristalizuoto kalcio (±) tartrato (CaC₄O₆H₄´4H₂O) masė;

16.2.1.2.2. Vynas, į kurį buvo dėta mezovyno rūgšties

Analizuoti vyną, į kurį buvo dėta mezovyno rūgšties ar manoma, kad buvo dėta, pirmiausia pradedama nuo šios rūšies hidrolizės. Į 50 cm³ kūgio kolbą įpilama 10 cm³ vyno ir 0,4 cm³ ledinės acto rūgšties (CH₃COOH, r₂₀ = 1,05 g/cm³). Ant kolbos uždedamas grįžtamasis kondensatorius ir pavirinama 30 min. Leidžiama atvėsti ir tada kūgio kolboje esantis tirpalas perpilamas į 600 cm³ talpos laboratorinę stiklinę. Kolba praskalaujama 2 kartus, kiekvieną kartą įpilant po 5 cm³ vandens, ir toliau daroma taip, kaip aprašyta aukščiau. Apskaičiuojamas mezovyno rūgšties kiekis, kuris pridedamas prie galutinio vyno rūgšties kiekio;

16.2.1.3. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška

Viena kalcio (±) tartrato molekulė atitinka pusę L(+) vyno rūgšties, esančios vyne, molekulės. Vyno rūgšties kiekis, esantis 1 dm³ vyno ir išreikštas mekv, prilygsta 384,5 p. Jis užrašomas vieno skaičiaus po kablelio tikslumu. Vyno rūgšties kiekis 1 dm³, išreikštas vyno rūgšties g, yra lygus 28,84 p. Jis užrašomas vieno skaičiaus po kablelio tikslumu. Vyno rūgšties kiekis 1 dm³, išreikštas rūgščiuoju kalio tartratu, yra lygus 36,15´p. Jis užrašomas vieno skaičiaus po kablelio tikslumu;

16.2.2. Palyginamoji tūrio matavimo analizė:

16.2.2.1. Reagentai:

16.2.2.1.1. Druskos rūgštis (HCl) (1:5 t/t) (r₂₀ = 1,18 – 1,19 g/cm³);

16.2.2.1.2. 0,05 M EDTR tirpalas:

– EDTR (etilendinitrilotetraacto rūgšties dinatrio druska) (C₁₀H₁₄N₂O₈Na₂´2H₂O) 18,61 g;

– distiliuoto vandens                                                                                         iki1000 cm³;

16.2.2.1.3. 40 % (m/t) natrio hidroksido tirpalas:

– natrio hidroksidas (NaOH)                                40 g;

– distiliuoto vandens                                            iki 100 cm³;

16.2.2.1.4. 1 % (m/m) kompleksometrinis indikatorius:

– 2-hidroksi-1-(2-hidroksi-4-sulfo-1-naftilazo)-3-naftalenkarboirūgštis (C₂₁H₁₄N₂O₇S´3H₂O)              1 g;

– bevandenis natrio sulfatas (Na₂SO₄)                                         100 g.

16.2.2.2. Analizė

Pasvėrus ant vakuuminės kolbos uždedamas stiklo filtras, kuriame yra kalcio (±) tartratas, ir ištirpinamos nuosėdos 10 cm³ praskiestos druskos rūgšties (16.2.2.1.1p.). Filtras išplaunamas 50 cm³ distiliuoto vandens.

Įpilama 5 cm³ 40 % natrio hidroksido tirpalo (16.2.2.1.3 p.) ir apie 30 mg indikatoriaus (16.2.2.1.4 p). Titruojama su 0,05 M EDTR (16.2.2.1.2 p). Tariama, kad suvartota n cm³ titranto;

16.2.2.3. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška

Vyno rūgšties kiekis 1 dm³, išreikštas mekv, yra lygus 5´n. Jis užrašomas vieno skaičiaus po kablelio tikslumu. Vyno rūgšties kiekis 1 dm³, išreikštas vyno rūgšties g, yra lygus 0,375´n. Jis užrašomas vieno skaičiaus po kablelio tikslumu. Vyno rūgšties kiekis 1 dm³, išreikštas rūgščiuoju kalio hidrotartratu, yra lygus 0,470´n. Jis užrašomas vieno skaičiaus po kablelio tikslumu;

16.3 Įprastinis metodas:

16.3.1. Reagentai vynui iš anksto apdoroti:

16.3.1.1. 30 % (t/t) acto rūgštis (CH₃COOH); (r₂₀ = 1,05 g/cm³);

16.3.1.2. Stipraus šarmingumo acetatinis anijonitas (pvz. anijonitinė derva Merck III, 20-50 meš). Anijonitas (apie 100 g) suspenduojamas 200 cm³ 30 % acto rūgšties (16.3.1.1. p.) tirpalo. Paliekamas mažiausiai 24 h ir tik tada vartojamas. Tolesniems tyrimams anijonitą reikia laikyti 30 % acto rūgštyje;

16.3.1.3. 0,5 % (t/t) acto rūgštis (CH₃COOH); (r₂₀ = 1,05 g/cm³);

16.3.1.4. 0,5 M natrio sulfato tirpalas (7,1 g/100 cm³). Pasveriama 71 g bevandenio natrio sulfato (Na₂SO₄) 1 dm³ talpos matavimo kolboje, ištirpinama distiliuotame vandenyje ir praskiedžiama vandeniu iki brūkšnio;

16.3.2. Reagentai vyno rūgščiai nustatyti:

16.3.2.1. 27 % (m/t) natrio acetato tirpalas (CH₃CONa): ištirpinama 270 g bevandenio natrio acetato (CH₃COONa) distiliuotame vandenyje ir praskiedžiama vandeniu iki 1000 cm³;

16.3.2.2. Vanadato reagentas: ištirpinama 10 g amonio metavanadato (NH₄VO₃) 150 cm³ 1 M natrio hidroksido tirpalo (16.3.2.10 p.); šis tirpalas supilama į 500 cm³ talpos matavimo kolbą ir įpilama 200 cm³ 27 % natrio acetato tirpalo (16.3.2.1 p.); praskiedžiama distiliuotu vandeniu iki brūkšnio;

16.3.2.3. 1 M H₂SO₄ tirpalas;

16.3.2.4. 0,5 M H₂SO₄ tirpalas;

16.3.2.5. 0,05 M H₂SO₄ tirpalas;

16.3.2.6. 0,05 M perjodato rūgšties tirpalas: į 1000 cm³ talpos matavimo kolbą įpilama 10,696 g natrio perjodato (NaJO₄) 50 cm³ 0,5 M sieros rūgšties (16.3.2.4 p.) ir praskiedžiama distiliuotu vandeniu iki brūkšnio;

16.3.2.7. 10 % (m/t) glicerolio tirpalas: į 100 cm³ talpos matavimo kolbą įpilama 10 g glicerolio (C₃H₈O₃) ir praskiedžiama distiliuotu vandeniu iki brūkšnio;

16.3.2.8. Natrio sulfato tirpalas, 7,1 g / 100 cm³ (žr.16.3.1.4 p.);

16.3.2.9. Vyno rūgšties tirpalas, 1g/dm³: į 500 cm³ talpos matavimo kolbą įpilama 0,5 g vyno rūgšties, įpilama 6,66 cm³ 1 M natrio hidroksido tirpalo (16.3.2.10 p.) ir praskiedžiama 7,1 % natrio sulfato tirpalu (16.3.1.4 p) iki brūkšnio;

16.3.2.10. 1 M natrio hidroksido tirpalas (NaOH);

16.3.3. Įranga ir priemonės:

16.3.3.1. Stiklo kolonėlė, kurios vidinis skersmuo 10-11 mm, ilgis apytiksliai 300 mm, su išleidžiamuoju čiaupu;

16.3.3.2. Spektrofotometras, matuojantis absorbciją, kai bangos ilgis 490 nm, ir 10 mm storio kiuvetės;

16.3.4. Analizė:

16.3.4.1. Jonitinio filtro paruošimas

Į stiklo kolonėlę virš čiaupo (16.3.3.1 p.) įkišamas stiklo vatos kamštis ir sumirkomas distiliuotu vandeniu. Į kolonėlę įpilama 10 cm³ acetatinio anijonito suspensijos (16.3.1.2 p.) ir leidžiama nusistovėti. Anijonitas iš viršaus užkemšamas stiklo vata (kad plaunant nebūtų pajudintas). Anijonitas turi būti vartojamas tik vienai procedūrai;

16.3.4.2. Organinių rūgščių atskyrimas

Atidaromas čiaupas ir leidžiama acto rūgšties tirpalui ištekėti apytiksliai 2-3 cm žemiau viršutinio stiklo vatos kamščio. Įpilama 10 ml 0,5 % acto rūgšties tirpalo (16.3.1.3 p.) ir leidžiama skysčiui ištekėti iki to paties aukščio. Ši plovimo procedūra pakartojama dar keturis kartus. Po paskutinio plovimo čiaupas uždaromas ir ant anijonito užpilama 10 cm³ vyno ar misos. Skystis turi išlašėti iš kolonos (vidutinis greitis – 1 lašas/s), tačiau jį reikia sustabdyti, kai skystis vos apsemia anijonitą. Dar kartą į kolonėlę įpilama 10 cm³ 0,5 % acto rūgšties tirpalo (16.3.1.3 p.) ir leidžiama ištekėti tokiu pačiu greičiu kaip ir anksčiau. Tada septynis kartus perplaunama, kiekvieną kartą suvartojant po 10 cm³ vandens. Paskutinio plovimo metu čiaupas uždaromas tuoj pat, kai skysčio lygis būna truputį aukščiau viršutinio stiklo vatos kamščio. Rūgštys, kurias absorbavo anijonitas, išplaunamos su 7,1 % natrio sulfato tirpalu (16.3.1.4 p.). Eliuatas surenkamas į 100 cm³ talpos matavimo kolbą iki brūkšnio;

16.3.4.3. Vyno rūgšties nustatymas:

16.3.4.3.1. Vynas, į kurį nebuvo dėta mezovyno rūgšties

Įpilama po 20 cm³ eliuato į dvi kūgio kolbas – a ir b: a naudojama tiriamajam, o b, kurioje vyno rūgštis suskaidyta su perjodato rūgštimi, palyginamajam bandymui.

Į a kolbą įpilama:

– 2 cm³ M H₂SO₄ (16.3.2.3 p.);

– 5 cm³ 0,05 M H₂SO₄ (16.3.2.5 p.);

– 1 cm³ 10 % glicerolio (16.3.2.7 p.).

Į b kolbą įpilama:

– 2 cm³ M H₂SO₄ (16.3.2.3 p.);

– 5 cm³ 0,05 M perjodato rūgšties tirpalo (16.3.2.6 p.).

Palaukiama 15 min ir įpilama 1 cm³ 10 % glicerolio (16.3.2.7 p.), kuris suskaido perjodato rūgšties perteklių. Palaukiama 2 min ir maišant pipete įlašinama 5 cm³ vanadato reagento (16.3.2.2 p.) į b kolbą ir tuoj pat į a kolbą. Iškart įjungiamas sekundmatis ir supilamas a ir b kolbų turinys į spektrofotometro kiuvetes. Po 90 s išmatuojama skysčio iš a kolbos absorbcija esant 490 nm bangos ilgiui. Kaip palyginamasis tirpalas naudojamas skystis iš b kolbos. Tirpalai, kuriuose yra didelis vyno rūgšties kiekis ir kurių absorbcija viršija kalibravimo ribą, turi būti skiedžiami 7,1 % natrio sulfatu ir dar kartą analizuojami;

16.3.4.3.2. Vynas, į kurį buvo dėta mezovyno rūgšties

Analizuoti vynus, į kuriuos buvo dėta mezovyno rūgšties ar manoma, kad taip buvo padaryta, pirmiausia pradedama nuo šios rūgšties hidrolizės, kaip buvo aprašyta pamatiniame metode. Atvėsintas, kūgio kolbos turinys supilamas į anijonitinį filtrą, tada skalaujama vandeniu (2 kartus po 5 cm³). Tęsiama, kaip aprašyta aukščiau. Apskaičiuotas mezovyno rūgšties kiekis pridedamas prie galutinio vyno rūgšties kiekio;

16.3.4.4. Kalibravimo kreivės sudarymas

Į 100 cm³ talpos matavimo kolbas įpilama 10, 20, 30, 40 ir 50 cm³ 1g/dm³ vyno rūgšties tirpalo (16.3.2.9 p.) ir praskiedžiama 7,1 % natrio sulfato tirpalu (16.3.1.4 p.), iki brūkšnio. Šių tirpalų koncentracija atitinka vyno eliuatus, kuriuose yra 1, 2, 3, 4 ir 5 g/dm³ vyno rūgšties. Įpilama į kūgio kolbas a ir b po 20 cm³ šių tirpalų ir tęsiama toliau, kaip aprašyta 16.3.3.3 p. Šių tirpalų absorbcijos verčių priklausomybė nuo vyno rūgšties koncentracijos yra tiesinė, truputį išsilenkianti žemyn esant mažoms koncentracijoms. Jei reikia, ši kreivės dalis braižoma kruopščiau, naudojant tiksliai žinomos - mažesnės už 1,0 g/dm³ koncentracijos tirpalų analizės rezultatus;

16.3.3.5. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška

Pagal išmatuotą eliuato absorbcijos vertę, kalibravimo kreivėje randama atitinkama vyno rūgšties koncentracija vyne g/dm³; rezultatas užrašomas vieno skaičiaus po kablelio tikslumu;

17. Citrinų rūgšties nustatymo metodas:

17.1. Metodo esmė

Katalizuojama citratliazės (CL), citrinų rūgštis skyla į oksalacetatą ir acetatą:

Dalyvaujant malato dehidrogenazei (MDH) ir laktato dehidrogenazei (LDH), oksalacetatas ir jo dekarboksilinimo produktas – piruvatas – redukuojami į L-malatą ir L-laktatą, naudojant redukuotą nikotinamidadenindinukleotidą (NADH):

NADH kiekis, kuris šiose reakcijose oksiduojasi į NAD⁺, yra proporcingas esamam citrato kiekiui. NADH oksidacija matuojama pagal absorbcijos sumažėjimą, kai bangos ilgis yra 340 nm;

17.2. Reagentai:

17.2.1. Buferinis tirpalas, kurio pH 7,8: 0,51 M glicilglicinas; pH 7,8; Zn²⁺ (0,6´10^-3 M). 100 cm³ matavimo kolboje ištirpinama 7,13 g glicilglicino maždaug 70 cm³ bidistiliato. Pareguliuojama pH iki 7,8 naudojant maždaug 10 cm³ 5 M natrio hidroksido, įpilama 10 cm³ cinko chlorido tirpalo (80 mg ZnCl₂ 100 cm³ H₂O) ir praskiedžiama bidistiliatu iki brūkšnio;

17.2.2. Redukuoto nikotinamidadenindinukleotido (NADH) tirpalas (apytiksliai 6´10^-3 M): ištirpinama 30 mg NADH ir 60 mg NaHCO₃ 6 cm³ bidistiliuoto vandens;

17.2.3. Malato dehidrogenazės ir laktato dehidrogenazės tirpalas (MDH/LDH, 0,5 mg MDH/cm³, 2,5 mg LDH/cm³): sumaišoma 0,1 cm³ MDH (5 mg MDH/cm³) ir 0,4 cm³ amonio sulfato tirpalo (3,2 M ir 0,5 dm³ LDH (5 mg/cm³). Ši suspensija, jei laikoma 4 °C temperatūroje, stabili mažiausiai metus;

17.2.4. Citratliazė (CL, 5 mg baltymo/cm³): ištirpinama 168 mg liofilizato 1 cm³ ledinio vandens. Šis tirpalas stabilus mažiausiai savaitę, jei laikoma 4 °C temperatūroje, o užšaldytas – mažiausiai keturias savaites. Rekomenduojama prieš vartojimą patikrinti fermentų aktyvumą;

17.2.5. Polivinilpolipirolidonas (PVPP).

PASTABA. Visus reagentus galima nusipirkti;

17.3. Įranga ir priemonės:

17.3.1. Spektrofotometras, kuriuo galima matuoti, kai bangos ilgis yra 340 nm (maksimali NADH absorbcija). Jei tokio nėra, galima naudoti spektrofotometrą su diskretiniu spektro šaltiniu, kuris leidžia atlikti matavimus, kai bangos ilgis yra 334 ar 365 nm. Kadangi matuojama absoliučioji absorbcija (t. y. kalibravimo kreivės nevartojamos, o etalonuojama pagal NADH ekstinkcijos koeficientą), reikia patikrinti aparato bangų ilgio skalę ir spektrinę absorbciją;

17.3.2. 1 cm storio stiklo kiuvetės arba vienkartinės kiuvetės;

17.3.3. Mikropipetės, sugraduotos nuo 0,02 cm³ iki 2 cm³;

17.4. Mėginio paruošimas

Citratas dažniausiai nustatomas tiesiogiai vyne, todėl nebūtina pašalinti spalvos ir nereikia skiesti, tačiau tik tuomet, kai citrinų rūgšties yra mažiau negu 400 mg/dm³. Jei taip nėra, vynas praskiedžiamas tiek, kad citrato koncentracija būtų nuo 20 iki 400 mg/dm³ (t. y. nuo 5 iki 80 mg citrato analizuojamame mėginyje).

Analizuojant raudonąjį vyną, kuriame daug fenolinių junginių, rekomenduojama jį pirmiausia apdoroti su PVPP. Ištirpinama apie 0,2 g PVPP vandenyje ir paliekama 15 min. Nufiltruojama rievėtu filtru. Į 50 cm³ talpos kūgio kolbą įpilama 10 cm³ vyno, mentele nuo filtro nubraukiamas ir į kolbą sudedamas drėgnas PVPP, purtoma 2-3 min ir nufiltruojama.

17.5. Analizė

Spektrofotometru, kuriuo galima matuoti, kai bangos ilgis yra 340 nm, ir naudojant 1 cm storio kiuvetes, išmatuojama absorbcija. Kaip nulinės absorbcijos etalonas vartojamas oras (be kiuvetės šviesos kelyje). Į 1 cm storio kiuvetes supilama:

Mėginio pavadinimas	Palyginamoji kiuvetė (cm^3)	Mėginio kiuvetė (cm^3)
17.2.1 tirpalas 17.2.2 tirpalas Tiriamasis mėginys Bidistiliatas 17.2.3 tirpalas	1,00 0,10 - 2,00 0,02	1,00 0,10 0,20 1,80 0,02

Sumaišoma ir maždaug po 5 min užsirašomos tirpalų palyginamojoje ir mėginio kiuvetėje absorbcijos vertės (A₁). Į abi kiuvetes įpilama po 0,02 cm³ 17.2.4 tirpalo. Sumaišoma, palaikoma, kol pasibaigia reakcija (apie 5 min) ir užsirašomos tirpalų palyginamojoje ir mėginio kiuvetėje absorbcijos vertės (A₂). Apskaičiuojamas palyginamosios ir mėginio kiuvečių tirpalų absorbcijos verčių skirtumas (A₂ – A₁), atitinkamai DA_R ir DA_S.

Apskaičiuojamas gautų rezultatų skirtumas: DA=DA_S–DA_R.

PASTABA. Laikas, reikalingas fermentams veikti, skirtingose vyno partijose gali skirtis todėl aukščiau pateikta vertė yra tik orientacinė ir rekomenduojama, kad ji būtų nustatoma kiekvienai partijai atskirai;

17.6. Rezultatų apskaičiavimas ir įšraiška

Citrinų rūgšties koncentracija išreiškiama mg/dm³ sveikojo skaičiaus tikslumu;

17.6.1. Rezultatų apskaičiavimas

Bendroji formulė koncentracijai, mg/cm³, apskaičiuoti yra tokia:

                 V´Me´

C = ______________ ´DA;

              d´u´1000

čia V – palyginamojo tirpalo kiekis, cm³ (šiuo atveju 3,14 cm³); u – mėginio kiekis, cm³ (šiuo atveju 0,2 cm³); M – medžiagos, kuri bus nustatyta, molekulinė masė (šiuo atveju bevandenės citrinų rūgšties masė M = 192,1); d – kiuvetės storis, cm (šiuo atveju 1 cm); e – NADH absorbcijos koeficientas (esant 340 nm, e = 6,3 m mol^-1´l cm^-1).

Taigi C=479´DA. Jei mėginys jį ruošiant buvo skiestas, rezultatą reikia padauginti iš praskiedimo koeficiento.

PASTABA. Esant 334 nm, C = 488´DA (=6,2 m mol^-1´l cm^-1); esant 365 nm, C = 887´DA (=3,4 m mol^-1´l cm^-1);

17.6.2. Pakartojamumas

Kai citrinų rūgšties koncentracija mažesnė kaip 400 mg/dm³, r = 14 mg/dm³; kai citrinų rūgšties koncentracija, didesnė kaip 400 mg/dm³, r = 28 mg/dm³;

17.6.3. Atkuriamumas

Kai citrinų rūgšties koncentracija mažesnė kaip 400 mg/dm³, R = 39 mg/dm³; kai citrinų rūgšties koncentracija didesnė kaip 400 mg/dm³, R = 65 mg/dm³.

18. Pieno rūgšties nustatymo metodai

18.1. Metodo esmė:

Reakcijos, kurios katalizatoriai yra L-laktatdehidrogenazė (L-LDH) ir D-laktatdehidrogenazė (D-LDH), metu nikotinamidadenindinukleotidas (NAD) oksiduoja pieno rūgšties racematą (L-laktatą ir D-laktatą) iki piruvato. Reakcijos pusiausvyra paprastai gana stipriai pasislinkusi į laktato pusę. Kai iš reakcijos mišinio pašalinamas piruvatas, jo susidaro daugiau. L-Glutamato ir piruvato reakcijos, kurios katalizatorius yra glutamatpiruvat-aminotransferazė (GPA), metu piruvatas virsta L-alaninu:

1)
2)
3)

Susidariusio NADH kiekis, kuris nustatomas pagal padidėjusią absorbciją, kai bangos ilgis yra 340 nm, proporcingas pradiniam laktato kiekiui. L-pieno rūgštis gali būti nustatoma atskirai pagal 1 ir 3 reakcijas, o D-pieno rūgštis gali būti panašiai nustatyta pagal 2 ir 3 reakcijas;

18.1.2. Įprastinis metodas

Pieno rūgštis, kuri atskiriama joniniu filtru, oksiduojama į etanolį ir nustatoma kolorimetrijos metodu po reakcijos su natrio nitroprusidu ir piperidinu;

18.2. Pamatinis metodas:

18.2.1. Reagentai:

18.2.1.1. Buferinis tirpalas, kurio pH 10 (glicilglicinas, 0,6 mol/dm³; L-glutamatas, 0,1 mol/dm³). Ištirpinama 4,75 g glicilglicino ir 0,88 g L-glutamo rūgšties maždaug 50 cm³ bidistiliato. Įpylus kelis kubinius centimetrus 10 M natrio hidroksido, padidinama pH vertė iki 10. Praskiedžiama bidistiliatu, kad susidarytų 60 cm³ tirpalo. Šis tirpalas tinkamas vartoti mažiausiai 12 savaičių, esant 4°C temperatūrai;

18.2.1.2. Nikotinamidadenindinukleotido (NAD) tirpalas, maždaug 40´10^-1 M: ištirpinama 900 mg NAD 30 cm³ bidistiliato. Šis tirpalas tinkamas vartoti mažiausiai keturias savaites, esant 4 °C temperatūrai;

18.2.1.3. Glutamatpiruvataminotransferazės (GPT) suspensija, 20 mg/cm³. Tinka vartoti mažiausiai metus, esant 4 °C temperatūrai;

18.2.1.4. L-Laktatdehidrogenazės (L-LDH) suspensija, 5 mg/cm³. Tinka vartoti mažiausiai metus, esant 4 °C temperatūrai;

18.2.1.5. D-Laktatdehidrogenazės (D-LDH) suspensija. Tinka vartoti mažiausiai metus, esant 4 °C temperatūrai.

1 PASTABA. Rekomenduojama prieš bandymus patikrinti fermentų aktyvumą.

2 PASTABA. Visus reagentus galima nusipirkti;

18.2.2. Įranga ir priemonės:

18.2.2.1. Spektrofotometras, kuriuo galima matuoti, kai bangos ilgis yra 340 nm, (NADH absorbcija yra maksimali). Jei tokio nėra, galima naudoti spektrofotometrą su diskretinio spektro šaltiniu, kuriuo galima matuoti, kai bangos ilgis yra 334 ar 365 nm. Kadangi matuojama absoliučioji absorbcija (t. y. kalibravimo kreivės nevartojamos, o etalonuojama pagal NADH ekstinkcijos koeficientą), reikia patikrinti bangų ilgio skalę ir prietaiso spektrinę absorbciją;

18.2.2.2. 1 cm storio stiklo kiuvetės arba vienkartinės kiuvetės;

18.2.2.3. Mikropipetės mėginiams nuo 0,02 iki 2 cm³ lašinti;

18.2.3. Mėginio paruošimas

PASTABA. Pirštais negalima liesti jokios stiklo įrangos dalies, kuri susiliečia su reakcijos mišiniu, kadangi gali patekti L-pieno rūgšties ir iškreipti rezultatus.

Laktatas dažniausiai nustatomas vyne tiesiogiai, t. y. nepanaikinant jo ir neskiedžiant, jei tik pieno rūgšties koncentracija yra mažesnė negu 100 mg/dm³. Tačiau jei pieno rūgšties koncentracija yra:

– nuo 100 mg/dm³ iki 1 g/dm³, skiedžiama santykiu 1/10 bidistiliatu;

– nuo 1 g/dm³ iki 2,5 g/dm³, skiedžiama santykiu 1/25 bidistiliatu;

– nuo 2,5 g/dm³ iki 5 g/dm³, skiedžiama santykiu 1/50 bidistiliatu;

18.2.4. Analizė:

18.2.4.1. Bendrojo pieno rūgšties kiekio nustatymas

Prieš atliekant matavimus buferinio tirpalo temperatūra turi būti nuo 20 iki 25 °C. Spektrofotometru, kuriuos galima matuoti, kai bangos ilgis yra 340 nm, nustatoma absorbcija 1 cm storio kiuvetėse, kuriose oras yra kaip nulinės absorbcijos palyginamasis etalonas (šviesos kelyje nėra kiuvetės) arba vanduo kaip palyginamasis tirpalas. Į 1 cm storio kiuvetes supilami tokie skysčiai:

Mėginio pavadinimas	Palyginamoji kiuvetė (cm^3)	Mėginio kiuvetė (cm^3)
18.2.1.1 tirpalas 18.2.1.2 tirpalas Bidistiliatas 18.2.1.3 suspensija Analizuojamas mėginys	1,00 0,20 1,00 0,02 -	1,00 0,20 0,80 0,02 0,20

Tirpalas pamaišomas stikline lazdele ar sintetinės medžiagos strypeliu suplotu galu; maždaug po 5 min išmatuojama tirpalų absorbcija kiuvetėje su palyginamuoju ir su mėginio tirpalu (A₁). Įpilama 0,02 cm³ 18.2.1.4 tirpalo ir 0,05 cm³ 18.2.1.5 tirpalo, sumaišoma, palaukiama, kol pasibaigs reakcija (apie 30 min), ir išmatuojama tirpalų absorbcija etaloninėje kiuvetėje su palyginamuoju ir su mėginio tirpalu (A2). Apskaičiuojamas palyginamosios ir mėginio kiuvečių tirpalų absorbcijos verčių skirtumas (A₂ –A₁) taip pat DA_R ir DA_S. Apskaičiuojamas šių rezultatų skirtumas: DA = DA_S – DA_R;

18.2.4.2. L-Pieno rūgšties ir D-pieno rūgšties nustatymas

L-Pieno rūgštis ir D-pieno rūgštis gali būti nustatomos atskirai, pagal tą pačią metodiką, kuri taikoma ir bendrajam pieno rūgšties kiekiui nustatyti, tačiau tik iki A₁ vertės nustatymo. Toliau daroma taip. Įpilama 0,02 cm³ 18.2.1.4 tirpalo, suplakama, palaukiama, kol pasibaigs reakcija (apie 20 min), ir išmatuojama tirpalų absorbcija kiuvetėje su palyginamuoju ir su mėginio tirpalu (A₂). Įpilama 0,05 cm³ 18.2.1.5 tirpalo, suplakama, palaukiama, kol pasibaigs reakcija (apie 30 min.), ir išmatuojama tirpalų absorbcija kiuvetėje su palyginamuoju ir mėginio tirpalu (A₃). Apskaičiuojami tirpalų absorbcijos verčių skirtumai: (A₂–A₁) L-pieno rūgščiai ir (A₃–A₂) skirtumą D-pieno rūgščiai, DA_R ir DA_S. Galiausiai, apskaičiuojamas šių rezultatų skirtumas: DA=DA_S–DA_R.

PASTABA. Laikas, reikalingas fermentinei reakcijai užbaigti, įvairiose vyno partijose gali skirtis. Aukščiau pateikta vertė yra tik orientacinė ir rekomenduojama, kad ji būtų nustatoma kiekvienai partijai atskirai. Nustatant vienos L-pieno rūgšties koncentraciją, inkubacinis periodas gali būti sutrumpintas iki 10 min.;

18.2.5. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška

Pieno rūgšties koncentracija išreiškiama g/dm³ vieno skaičiaus po kablelio tikslumu:

18.2.5.1. Rezultatų apskaičiavimas:

Bendroji formulė koncentracijai, g/dm³, apskaičiuoti yra tokia:

V´M

C = ___________________ ´DA;

e´d´u´1000

čia V – palyginamojo tirpalo kiekis, cm³ (L-pieno rūgštis: V=2,24 cm³; D-pieno rūgštis ir bendroji pieno rūgštis: V=2,29 cm³); u - mėginio kiekis, cm³ (šiuo atveju 0,2 cm³); M – medžiagos, kuri bus nustatyta, molekulinė masė (šiuo atveju DL-pieno rūgšties molekulinė masė M=90,08); d – kiuvetės storis, cm (šiuo atveju 1 cm); e – NADH absorbcijos koeficientas (esant 340 nm, e=6,3 m mol^-1´l cm^-1):

18.2.5.1.1. Bendra pieno rūgšties ir D-pieno rūgšties koncentracija: C=0,164´DA. Jei mėginys ruošimo metu buvo skiestas, rezultatą reikia padauginti iš praskiedimo koeficiento.

PASTABA. Esant 334 nm, C=0,167´DA (e=6,2 m mol^-1´l cm^-1); esant 365 nm, C=0,303´DA (e=3,4 m mol^-1´l cm^-1);

18.2.5.1.2. L-Pieno rūgštis: C=0,160´DA. Jei mėginys ruošimo metu buvo skiestas, rezultatą reikia padauginti iš praskiedimo koeficiento.

PASTABA. Eesant 334 nm, C=0,163´DA (e=6,2 m mol^-1´l cm^-1); esant 365 nm, C=0,297´DA (e=3,4 m mol^-1´l cm^-1);

18.2.5.2. Pakartojamumas

r=0,02+0,07´x_i g/dm³; čia x_i – pieno rūgšties koncentracija mėginyje, g/dm³;

18.2.5.3. Atkuriamumas

R=0,05+0,125´x_i g/dm³; čia x_i yra pieno rūgšties koncentracija mėginyje, g/dm³;

18.3. Įprastinis metodas:

18.3.1. Išankstinis vyno apdorojimas: žiūrėti skyrių „Vyno rūgšties nustatymo metodai“, įprastinio metodo 16.3.1. p;

18.3.2. Pieno rūgšties nustatymas:

18.3.2.1. Reagentai:

18.3.2.1.1. 0,1 M keturvalentis cerio sulfatas, ištirpintas 0,35 M sieros rūgštyje: 1 dm³ talpos matavimo kolboje ištirpinama 40,431 g keturvalenčio cerio sulfato, Ce(SO₄)₂´4H₂O, 350 cm³ tiksliai išmatuotame 1 M sieros rūgšties tirpale (18.3.2.1.4 p.). Tirpalas turi būti visą laiką aušinamas. Praskiedžiama distiliuotu vandeniu iki brūkšnio;

18.3.2.1.2. 2,5 M natrio hidroksido tirpalas (NaOH);

18.3.2.1.3. Natrio acetato tirpalas, 270 g/dm³ (paruoštas iš bevandenio natrio acetato, CH₃COONa);

18.3.2.1.4. 1 M sieros rūgštis, H₂SO₄;

18.3.2.1.5. 2 % natrio nitroprusido tirpalas (Na₂FeNO(CN)₅´2H₂O). Turi būti laikomas tamsioje vietoje labai gerai užkimštame butelyje. Tinka vartoti ne daugiau kaip 8 h;

18.3.2.1.6. 10 % (t/t) piperidino tirpalas (C₅H₁₁N);

18.3.2.1.7. 1 M pieno rūgšties tirpalas. 100 cm³ pieno rūgšties (C₃H₆O₃) sumaišoma su 400 cm³ vandens. Tirpalas šildomas garinimo lėkštėje ant verdančio vandens vonios 4 h. Retkarčiais į tirpalą įpilama distiliuoto vandens. Tirpalas atvėsinamas ir į jį įpilama tiek vandens, kad susidarytų 1dm³ tirpalo. Imama 10 cm³ šio tirpalo ir titruojama pieno rūgštis 1 M natrio hidroksido tirpalu (18.3.2.1.8 p.). Tirpale turi būti 1 M pieno rūgšties (90 g);

18.3.2.1.8. 1 M natrio hidroksido tirpalas (NaOH);

18.3.2.2. Įranga ir priemonės:

18.3.2.2.1. Stiklo kolonėlė su išleidžiamuoju čiaupu srautui reguliuoti. Kolonėlės vidinis skersmuo 10-11 mm, ilgis apie 300 mm;

18.3.2.2.2. Pastovios temperatūros (65 °C) vandens vonia.;

18.3.2.2.3. Spektrofotometras, kuriuo galima matuoti absorbciją, kai bangos ilgis yra 570 nm, su 1 cm storio kiuvetėmis;

18.3.2.3. Analizė:

18.3.2.3.1. Jonitinio filtro paruošimas: žiūrėti skyrių „Vyno rūgšties nustatymo metodai“, įprastinio metodo 16.3.3.1 p;

18.3.2.3.2. Organinių rūgščių atskyrimas: žiūrėti skyrių „Vyno rūgšties nustatymop metodai“, įprastinio metodo, 16.3.3.2 p;

18.3.2.3.3. Pieno rūgšties nustatymas

Į 50 cm³ talpos stiklo mėgintuvėlį su šlifo kamščiu įpilama 10 cm³ eliuato, paskui 10 cm³ cerio sulfato tirpalo (18.3.2.1.1 p) ir suplakama. Mėgintuvėlis palaikomas tiksliai 10 min vandens, kurios temperatūra 65 °C, vonioje. Per šį laiką kelioms sekundėms ištraukiamas kamštis, nes kaitinant padidėja slėgis. Tada mėgintuvėlis sandariai užkemšamas, kad neišgaruotų susidaręs etanalis, išimamas iš vonios, atvėsinamas po tekančiu vandeniu iki maždaug 20 °C temperatūros. Įpilama 5 cm³ 2,5 M natrio hidroksido tirpalo (18.3.2.1.2 p.), sumaišoma ir nufiltruojama.

Paimama 15 cm³ filtrato ir supilama į 50 cm³ užkemšamą kolbą, kurioje anksčiau buvo įpilta mišinio, sumaišyto iš 5 cm³ 27 % natrio acetato tirpalo (18.3.2.1.3 p.) ir 2 cm³ 1 M sulfato rūgšties (18.3.2.1.4 p.) Įpilama 5 cm³ natrio nitroprusido tirpalo (18.3.2.1.5 p.), sumaišoma, paskui įpilama 5 cm³ piperidino tirpalo (18.3.2.1.6 p.), greitai sumaišoma ir tuoj pat šis tirpalas supilamas į spektrofotometro kiuvetę. Tirpalo spalva pakinta iš žalios į violetinę ir yra matuojama, kai bangos ilgis 570 nm, pagal orą (šviesos kelyje nėra kiuvetės): ji suintensyvėja, paskui greitai susilpnėja. Stebima, kaip kinta absorbcijos vertė. Maksimalioji vertė bus galutinė. Jei eliuate yra per daug pieno rūgšties ir absorbcija yra per didelė, eliatas praskiedžiamas 7,1 % natrio sulfato tirpalu (18.3.1. p.) ir toliau matuojamas praskiestas tirpalas;

18.3.2.3.4. Kalibravimo kreivės sudarymas

Į 1000 cm³ talpos matavimo kolbą pipete įpilama 10 cm³ 1 M pieno rūgšties tirpalo (18.3.2.1.7 p.) ir 10 cm³ titruoto 1 M natrio hidroksido tirpalo (18.3.2.1.8 p.) bei iki brūkšnio pripilama 7,1 % natrio sulfato tirpalo. Paimama 5, 10, 15, 20 ir 25 cm³ šio tirpalo ir supilama į 100 cm³ talpos matavimo kolbas. Iki brūkšnio pripilama 7,1 % (18.3.1. p.) natrio sulfato tirpalo. Paimama po 10 cm³ kiekvieno gauto tirpalo ir pagal 18.3.2. p. aprašytą eliuato procedūrą nustatomos jų absorbcijos vertės. Šių tirpalų koncentracija atitinka vyno eliuatus, kuriuose yra 0,45; 0,9; 1,35; 1,80 ir 2,25 g/dm³ pieno rūgšties. Šių tirpalų absorbcijos verčių priklausomybė nuo pieno rūgšties koncentracijų yra tiesinė linija;

18.3.2.4. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška

Eliuato absorbcijos vertės išmatuojamos ir pieno rūgšties koncentracija vyne, g/dm³, nustatoma pagal kalibravimo kreivę. Rezultatai užrašomi vieno skaičiaus po kablelio tikslumu.

PASTABA. Vyne, kuriame yra daugiau kaip 250 mg/dm³ sieros dioksido, gali būti šiek tiek etanalsulfonrūgšties, kuri nustatoma kartu su pieno rūgštimi. Tokiu atveju rezultatą reikia tikslinti atliekant papildomą operaciją: mėgintuvėlyje su kamščiu sumaišoma 15 cm³ eliuato su 5 cm³ 27 % natrio acetato (18.3.2.1.3 p.) ir 2 cm³ 0,775 M H₂SO₄ (77,5 cm³ 1 M H₂SO₄ skiedžiama distiliuotu vandeniu, kad susidarytų 100 cm³ tirpalo). Tada, kaip ir nustatant pieno rūgštį, įpilama 5 cm³ 2 % natrio nitroprusido (18.3.2.1.5 p.) ir 5 cm³ 10 % piperidino (18.3.2.1.6 p.). Viską sumaišius, matuojama absorbcija. Absorbcijos matavimo sąlygos yra tokios pačios, kaip aprašytosios nustatant pieno rūgštį. Gauta absorbcijos vertė pažymima kalibracinėje kreivėje ir nustatoma tariamoji pieno rūgšties kiekio vertė B, g/dm³ (kadangi yra etanalsulfonrūgšties). Jei L’ yra tariamoji pieno rūgšties koncentracija, g/dm³, vyne, tai tikroji pieno rūgšties koncentracija L apskaičiuojama pagal formulę: L = L’ – B´0,4 (g/dm³).

19. L-Obuolių rūgšties nustatymo metodas

19.1. Metodo esmė

Reakcijos metu, kurioje katalizatorius yra L-malatdehidrogenazė (L-MDH), nikotinamidadenindinukleotidas (NAD) oksiduoja L-obuolių rūgštį iki oksalacetato. Reakcijos pusiausvyra paprastai gana stipriai pasislenka į malato pusę. Kai iš reakcijos mišinio pašalinamas oksalacetatas, jo susidaro daugiau. L-Glutamato ir oksalacetato reakcijoje, kurioje katalizatorius yra glutamatoksalacetataminotransferazė (GOA), oksalacetatas virsta L-aspartatu:

Susidariusio NADH kiekis, kuris nustatomas pagal padidėjusią absorbciją, kai bangos ilgis yra 340 nm, proporcingas pradiniam malato kiekiui.

19.2. Reagentai:

19.2.1. Buferinis tirpalas kurio pH 10: 0,6 M glicilglicinas; 0,1 M L-glutamatas. Ištirpinama 4,75 g glicilglicino ir 0,88 g L-glutamo rūgšties maždaug 50 cm³ bidistiliato. Įpylus maždaug 4,6 cm³ 10 M natrio hidroksido, padidinama, pH vertė iki 10. Praskiedžiama bidistiliatu, kad susidarytų 60 cm³ tirpalo. Šis tirpalas tinkamas vartoti mažiausiai 12 savaičių, esant 4 ^oC temperatūrai;

19.2.2. Nikotinamidadenindinukleotido (NAD) tirpalas, maždaug 40´10^-3 M: ištirpinama 420 mg NAD 12 cm³ bidistiliato. Šis tirpalas tinkamas vartoti mažiausiai keturias savaites, esant 4 ^oC temperatūrai;

19.2.3. Glutamatoksaloacetataminotransferazės (GOA) suspensija, 2 mg/cm³. Tinka vartoti mažiausiai metus, esant 4 ^oC temperatūrai;

19.2.4. L-Malatdehidrogenazės (L-MDH) suspensija, 5 mg/cm³. Tinka vartoti mažiausiai metus, esant 4 ^oC temperatūrai.

PASTABA. Visus reagentus galima nusipirkti;

19.3. Įranga ir priemonės:

19.3.1. Spektrofotometras, kuriuo galima matuoti, kai bangos ilgis yra 340 nm (NADH absorbcija yra maksimali). Jei tokio nėra, galima naudoti spektrofotometrą su diskretinio spektro šaltiniu, kuriuo galima matuoti, kai bangos ilgis yra 334 ar 365 nm. Kadangi matuojama absoliučioji absorbcija (t. y. kalibravimo kreivės nevartojamos, o etalonuojama pagal NADH ekstinkcijos koeficientą), reikia patikrinti bangų ilgių skalę ir prietaiso absorbcijos spektrą.;

19.3.2. 1 cm storio stiklo kiuvetės ar vienkartinės kiuvetės;

19.3.3. Mikropipetės mėginiams nuo 0,01 iki 2 cm³ lašinti;

19.4. Mėginio paruošimas

L-Malatas dažniausiai yra nustatomas vyne tiesiogiai nepašalinant spalvos ir neskiedžiant, jei L-obuolių rūgšties koncentracija yra mažesnė negu 350 mg/dm³ (išmatuota esant 365 nm bangos ilgiui). Tačiau jei koncentracija didesnė, vynas praskiedžiamas bidistiliatu, kol L-malato koncentracija tampa 30 – 350 mg/dm³ (t. y. L-malato kiekis mėginyje yra 3–35 mg). Jei malato koncentracija vyne yra mažesnė negu 30 mg/dm³, mėginio kiekį galima padidinti iki 1 cm³. Reikia įpilti tiek vandens, kad bendras tūris dviejose kiuvetėse būtų vienodas;

19.5. Analizė

Spektrofotometru, kuriuo galima matuoti, kai bangos ilgis yra 340 nm, išmatuojama absorbcija 1 cm storio kiuvetėje. Kaip nulinės absorbcijos etalonas vartojamas oras (šviesos kelyje nėra kiuvetės) arba kaip palyginamasis tirpalas – vanduo. Į 1 cm storio kiuvetes supilama:

Mėginio pavadinimas	Palyginamoji kiuvetė (cm^3)	Mėginio kiuvetė (cm^3)
19.2.1 tirpalas 19.2.2 tirpalas Bidistiliatas 19.2.3 suspensija Analizuojamas mėginys	1,00 0,20 1,00 0,01 -	1,00 0,20 0,90 0,01 0,10

Tirpalas pamaišomas ir maždaug po 5 min išmatuojamas tirpalų absorbcija palyginamojoje ir mėginio kiuvetėje (A₁). Po to į abi kiuvetes įpilama po 0,01 cm³ 19.2.4 tirpalo. Sumaišoma, palaukiama, kol pasibaigs reakcija, (apie 5-10 min) ir išmatuojama tirpalų absorbcija palyginamojoje ir mėginio kiuvetėje (A₂). Apskaičiuojamas palyginamosios ir mėginio kiuvečių tirpalų absorbcijos verčių skirtumas (A₂ – A₁), DA = DA_s–DA_R. Apskaičiuojamas šių rezultatų skirtumas DA = DA_s–DA_R.

PASTABA. Laikas, reikalingas fermentinei reakcijai užbaigti, įvairiose vyno partijose gali skirtis. Aukščiau pateikta vertė yra tik orientacinė ir rekomenduojama, kad ji būtų nustatoma kiekvienai partijai atskirai;

19.6. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška:

L-Obuolių rūgšties koncentracija išreiškiama g/dm³ vieno skaičiaus po kablelio tikslumu;

19.6.1. Rezultatų apskaičiavimas

Bendroji formulė koncentracijai, g/dm^3, apskaičiuoti yra tokia:

V´M

C = ´DA;

e´d´u´1000

čia V – analizuojamo tirpalo tūris, cm³ (šiuo atveju 2,22 cm³); u - mėginio tūris, cm³ (šiuo atveju 0,1 cm³); M – analizuojamos medžiagos molekulinė masė (šiuo atveju L-obuolių rūgšties molekulinė masė M = 134,09); d – kiuvetės storis, cm (šiuo atveju 1 cm); e – NADH absorbcijos koeficientas (esant 340 nm, e = 6,3 m mol^-1´l cm^-1).

L-Malato koncentracija C = 0,473´DA g/dm³. Jei mėginys ruošimo metu buvo skiestas, rezultatą reikia padauginti iš praskiedimo koeficiento.

PASTABA. Esant 334 nm, C = 0,482´DA; esant 365 nm, C = 0,876´DA;

19.6.2. Pakartojamumas

r=0,03+0,034´x₁; čia x₁ yra obuolių rūgšties koncentracija mėginyje, g/dm³;

19.6.3. Atkuriamumas

R=0,05+0,071´x₁; čia x₁ yra obuolių rūgšties koncentracija mėginyje, g/dm³.

20. D-Obuolių rūgšties nustatymo metodas

20.1. Metodo esmė

Tai - fermentinis metodas. Naudojamas reagentų rinkinys, kurio pakanka maždaug 30 tyrimų. Dalyvaujant D-malatdehidrogenazės dekarboksilazei (D-MDH), nikotinamidadenindinukleotidas (NAD) oksiduoja D-obuolių rūgštį (D-malatą) iki oksalacetato. Šioje reakcijoje susidaręs oksalacetatas skyla į piruvatą ir karbonato rūgštį.

Susidariusio NADH kiekis yra proporcingas D-obuolių rūgšties koncentracijai ir nustatomas, kai bangos ilgis yra 334, 340 ar 365 nm;

20.2. Reagentų rinkinio sudėtis:

20.2.1. Pirmasis buteliukas su maždaug 30 cm³ tirpalo, kurį sudaro HEPES buferinis tirpalas 2-[4-(2-hidroksietil)piperazinil-1] etansulfonrūgštis), pH 9,0, ir stabilizatoriai;

20.2.2. Antrasis buteliukas su maždaug 210 mg NAD-liofilizato;

20.2.3. Trys buteliukai su D-MDH-liofilizatu, apie 8 vienetus kiekviename;

20.2.4. Tirpalų paruošimas ir stabilumas:

20.2.4.1. Pirmojo buteliuko turinys vartojamas neskiestas. Prieš vartojimą tirpalo temperatūra turi būti 20–25 ^oC. Buteliuko turinys tinkamas vartoti 1 metus, laikant +4 ^oC temperatūroje;

20.2.4.2. Antrojo buteliuko turinys praskiedžiamas 4 cm³ bidistiliato. Prieš vartojimą tirpalo temperatūra turi būti 20–25 ^oC. Tirpalas tinkamas vartoti 3 savaites, laikant +4 ^oC temperatūroje, ir du mėnesius, laikant –20 ^oC temperatūroje;

20.2.4.3. Į vieną iš trijų buteliukų įpilama 0,6 cm³ bidistiliato. Prieš vartojimą tirpalo temperatūra turi būti 20–25 ^oC. Tirpalas tinkamas vartoti 5 dienas, laikant +4 ^oC temperatūroje;

20.3. Įranga ir priemonės:

20.3.1. Spektrofotometras, kuriuo galima matuoti, kai bangos ilgis yra 340 nm (NADH ir NADPH absorbcija yra maksimali). Jei tokio prietaiso nėra, galima naudoti spektrofotometrą su diskretinio spektro šaltiniu, kuriuo galima matuoti, kai bangos ilgis yra 334 ar 365 nm;

20.3.2. 1 cm storio stiklo kiuvetės (galima naudoti ir vienkartines kiuvetes);

20.3.3. Mikropipetės, kuriomis galima paimti 0,01 ir 2 cm³ mėginio;

20.4. Mėginio paruošimas

D-Obuolių rūgšties kiekis kiuvetėje turi būti nuo 2 iki 50 mg. Todėl tiriamąjį tirpalą reikia praskiesti, kad D-obuolių rūgšties koncentracija būtų atitinkamai nuo 0,02 iki 0,5 g/dm³ arba 0,02 ir 0,3 g/dm³. Jei absorbcijos verčių skirtumas DA yra mažesnis už 0,100, mėginio tūrį reikia padidinti iki 1,80 cm³. Tačiau reikia įpilti tiek vandens, kad galutinis kiekis abiejose kiuvetėse būtų vienodas (mėginys ir palyginamasis tirpalas);

20.5. Analizė

Temperatūra nuo 20 iki 25 ^oC. Galutinis kiekis 2,95 cm³. Užrašomi spektrofotometro rodmenys, lyginant su oru (be kiuvetės šviesos kelyje), su vandeniu ar su palyginamuoju mėginiu.

Įlašinama į kiuvetes	Palyginamojo mėginio kiekis, cm^3	Mėginio kiekis, cm^3
20.2.4.1 tirpalas 20.2.4.2 tirpalas Bidistiliatas Mėginio tirpalas	1,00 0,10 1,80 -	1,00 0,10 1,70 0,10

Sumaišoma, po maždaug 6 min užrašomos tirpalų absorbcijų vertės (A₁). Reakcija pradedama įpylus į kiekvieną iš kiuvečių po 0,05 cm³ 20.2.4.3 tirpalo. Sumaišoma ir pasibaigus reakcijai (po maždaug 20 min), užrašomos tirpalų absorbcijų vertės (A₂). Apskaičiuojamas palyginamojo ir tiriamojo tirpalų absorbcijų verčių skirtumas (A₂ – A₁). Iš mėginio absorbcijų verčių skirtumo (DA_S) atimamas palyginamojo tirpalo absorbcijų verčių skirtumas (DA_B): DA = DA_S–DA_B;

20.6. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška:

D-Obuolių rūgšties koncentracija išreiškiama g/dm³ vieno skaičiaus po kablelio tikslumu;

20.6.1. Apskaičiavimas

Bendroji formulė koncentracijai apskaičiuoti yra tokia:

V´M

C =_______________________ ´DA;

e´d´u´1000

čia V – galutinis tūris, cm³; u - mėginio tūris, cm³; M – tiriamosios medžiagos molekulinė masė; d – kiuvetės storis, cm; e - NADH absorbcijos koeficientas, kai bangos ilgis: 340 nm = 6,3 (n mol^-1´l´cm^-1); Hg 365 nm = 3,4 (n mol^-1´l´cm^-1); Hg 334 nm = 6,18 (n mol^-1´l´cm^-1).

Taigi

2,95´134,09´DA                   3,956

C = _________________ ____=                     ´DA    , g, D-obuolių rūgšties 1 dm³mėginio

e ´1´0,1´1000                        e

Jei mėginys ruošimo metu buvo skiestas, rezultatą reikia padauginti iš praskiedimo koeficiento F;

20.6.2. Pakartojamumas

r=0,05´x_i; čia x_i – D-obuolių rūgšties koncentracija, g/dm³;

20.6.3. Atkuriamumas

R=0,1´x_i; čia x_i – D-obuolių rūgšties koncentracija, g/dm³.

21. Bendrojo obuolių rūgšties kiekio nustatymo metodas

21.1. Metodo esmė

Obuolių rūgštis, kuri išskiriama anijonitiniu filtru, eliuate nustatoma kolorimetriškai: matuojama geltonos spalvos tirpalo, kuris susidaro obuolių rūgščiai reaguojant su chromotropo rūgštimi, esant koncentruotos sulfato rūgšties, absorbcija. Kadangi yra pašalinių medžiagų, rezultatus reikia tikslinti: t. y. iš absorbcijos vertės, kuri buvo gauta naudojant 96 % koncentracijos sulfato ir chromotropo rūgštis, reikia atimti absorbcijos vertę, kuri buvo gauta naudojant 86 % koncentracijos rūgštis (esant tokiai rūgščių koncentracijai obuolių rūgštis nereaguoja);

21.2. Įranga ir priemonės:

21.2.1. Stiklo kolonėlė su čiaupu: ilgis maždaug 250 mm, vidinis skersmuo 35 mm;

21.2.2. Stiklo kolonėlė su čiaupu: ilgis maždaug 300 mm, vidinis skersmuo 10-11 mml;

21.2.3. Termostatu reguliuojama vandens, kurio temperatūra 100 ^oC, vonia;

21.2.4. Spektrofotometras, tinkamas absorbcijai matuoti, kai bangos ilgis yra 420 nm;

21.2.5. 1 cm storio kiuvetės;

21.3. Reagentai:

21.3.1. Stiprios bazės jonitas (pvz., Merck III);

21.3.2. 5 % (m/t) natrio hidroksidas;

21.3.3. 30 % (m/t) acto rūgštis;

21.3.4. 0,5 % (m/t) acto rūgštis;

21.3.5. 10 % (m/t) natrio sulfato tirpalas;

21.3.6. 95-97 % (m/m) koncentruota sieros rūgštis;

21.3.7. 86 % (m/m) sieros rūgštis;

21.3.8. 5 % (m/t) chromotropo rūgštis: prieš kiekvieną analizę paruošiamas šviežias tirpalas, t. y. 500 mg natrio chromotropato (C₁₀H₆Na₂O₈S₂.2H₂₀) ištirpinama 10 cm³ distiliuoto vandens;

21.3.9. DL-Obuolių rūgšties tirpalas, 0,5 g/dm³: ištirpinama 250 g obuolių rūgšties (C₄H₆O₅) natrio sulfato tirpale (10 %) ir praskiedžiama 500 cm³ talpos matavimo kolboje 10 % natrio sulfato tirpalu (21.3.5 p.) iki brūkšnio;

21.4. Analizė:

21.4.1. Jonito paruošimas

Stiklo kolonėlės (35´250 mm) apačioje virš čiaupo dedamas vatos kamštelis, sumirkytas distiliuotu vandeniu. Tada į kolonėlę supilama jonito dervos suspensija. Skysčio lygis turi būti 50 mm virš dervos. Plaunama kolonėlė pirmiausia 1000 cm³ distiliuoto vandens, paskui natrio hidroksido tirpalu (5 %), kuris išleidžiamas per čiaupą. Virš dervos turi likti 2–3 mm skysčio. Paskui kolonėlė dar 2 kartus plaunama 5 % natrio hidroksido tirpalu ir paliekama 1 h. Vėl plaunama 1000 cm³ distiliuoto vandens. Tada kolonėlė užpildoma 30 % acto rūgšties tirpalu, išleidžiama jo tiek, kad virš anijonito liktų 2-3 mm, ir vėl 2 kartus išplaunama 30 % acto rūgšties tirpalu. Prieš naudojimą paliekama mažiausiai 24 h. Tolesniems tyrimams anijonitas laikomas 30 % acto rūgštyje;

21.4.2. Joninio filtro paruošimas

Kolonėlės (11´300 mm) apačioje virš čiaupo dedamas vatos kamštelis. Į filtrą supilama jonito suspensija (paruošta, kaip nurodyta 21.4.1 p.). Jos aukštis filtre turi būti 10 cm. Atsukamas čiaupas ir išleidžiamas 30 % acto rūgšties tirpalas. Virš anijonito turi likti 2–3 mm tirpalo. Kolonėlė išplaunama 50 cm³ 0,5 % acto rūgšties tirpalu;

21.4.3. DL-Obuolių rūgšties atskyrimas

Į kolonėlę, paruoštą kaip nurodyta 21.4.2 p., supilama 10 cm³ vyno ar misos. Atsukamas čiaupas ir leidžiama lašėti (vidutinis lašėjimo greitis – 1 lašas/s). Lašėjimas sustabdomas, kai virš dervos lieka 2–3 mm skysčio. Kolonėlė išplaunama 50 cm³ 0,5 % acto rūgšties tirpalu, paskui 50 cm³ distiliuoto vandens ir leidžiama skysčiui lašėti tokiu pat greičiu kaip ir anksčiau. Lašėjimas sustabdomas, kai virš dervos lieka 2-3 mm skysčio. Rūgštys, kurias absorbavo anijonitas, išplaunamos 10 % natrio sulfato tirpalu (21.3.5 p.). Eliuatas surenkamas į 100 cm³ talpos matavimo kolbą. Kolonėlę galima atnaujinti tokia pat procedūra, kaip aprašyta 21.4.1 p;

21.4.4. Obuolių rūgšties nustatymas

Paimami du 30 cm³ talpos mėgintuvėliai su plačiu kakleliu (su kamščiais) ir pažymimi A ir B. Į mėgintuvėlį A (palyginamąjį) įpilama 10 cm³ 86 % sulfato rūgšties tirpalo, į mėgintuvėlį B (mėginį) – 10 cm³ 96 % sulfato rūgšties tirpalo. Užkemšama ir suplakama, kad skystis susimaišytų. Tačiau reikia saugoti, kad kamštis nesušlaptų. Mėgintuvėliai pamerkiami į verdančio vandens vonią 10 min. Paskui aušinami 90 min tamsoje 20 ^oC temperatūroje. Ataušinus tuoj pat nustatoma absorbcijos vertė, kai bangos ilgis yra 420 nm. Naudojama 1 cm storio kiuvetė;

21.4.5. Kalibravimo kreivės sudarymas

Pipete įpilama 5,0; 10,0; 15,0 ir 20 cm³ mėginio į keturias 50 cm³ talpos matavimo kolbas. Iki brūkšnio pripilama 10 % natrio sulfato tirpalo. Šie tirpalai atitinka eliuatus, gautus iš vyno, kuriuose yra 0,5; 1,0; 1,5 ir 2,0 g/dm³ obuolių rūgšties. Toliau daroma taip, kaip aprašyta 21.4.4 p. Šių tirpalų absorbcijos vertės priklauso nuo obuolių rūgšties koncentracijos juose; ši priklausomybė yra tiesinė, einanti per koordinačių pradžią. Kadangi gaunamos spalvos intensyvumas labai priklauso nuo sulfato rūgšties koncentracijos, svarbu patikrinti, ar ši nepasikeitė todėl reikia patikrinti kalibravimo kreivę bent viename kiekvieno reagentų rinkinio taške;

21.5. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška:

Obuolių rūgšties koncentracija, g/dm³, eliuate nustatoma ekstrapoliuojant nustatytą absorbcijos vertę pagal kalibravimo kreivę. Rezultatas užrašomas vieno skaičiaus po kablelio tikslumu;

21.5.1. Pakartojamumas

Kai kiekis < 2 g/dm³, r = 0,1 g/dm³; kai kiekis > 2 g/dm³, r = 0,2 g/dm³.

21.5.2. Atkuriamumas

R = 0,3 g/dm³.

22. Sorbo rūgšties nustatymo metodas

22.1. Metodų esmė:

22.1.1. Nustatymas ultravioletinės srities absorbcinės spektrofotometrijos metodu

Sorbo rūgštis (trans, trans-2,4-heksadieno rūgštis) išskiriama distiliuojant vandens garais ir nustatoma vyno distiliate, naudojant ultravioletinės absorbcijos spektrofotometriją. Medžiagos, kurios trukdo nustatyti ultravioletinėje srityje, pašalinamos sausai išgarinant silpnai pašarmintą kalcio hidroksidu vyno distiliatą. Sorbo rūgšties kiekiui, kuris yra mažesnis už 20 mg/dm³, patvirtinti naudojama plonasluoksnė chromatografija, kurios jautrumas yra 1 mg/dm³;

22.1.2. Nustatymas dujų chromatografijos metodu

Sorbo rūgštis ekstrahuojama etilo eteriu ir nustatoma dujų chromatografijos metodu, naudojant vidinį etaloną;

22.1.3. Rūgšties pėdsakų nustatymas plonasluoksnės chromatografijos metodu

Sorbo rūgštis ekstrahuojama etilo eteriu, atskiriama plonasluoksnės chromatografijos metodu, o jos koncentracija nustatoma pusiau kiekybiškai;

22.2. Ultravioletinės absorbcijos spektrofotometrijos metodas:

22.2.1. Reagentai:

22.2.1.1. Kristalinė vyno rūgštis, C₄H₆O₆;

22.2.1.2. Kalcio hidroksido, Ca(OH)₂, tirpalas, apytiksliai 0,02 M;

22.2.1.3. Etaloninis sorbo rūgšties tirpalas, 20 mg/dm³: ištirpinama 20 mg sorbo rūgšties, (C₄H₆O₆₎, maždaug 2 cm³ 0,1 M natrio hidroksido tirpalo. Tirpalas supilamas į 1000 cm³ talpos matavimo kolbą ir iki brūkšnio pripilama vandens. Tokioje kolboje vandenyje galima ištirpinti 26,8 mg kalio sorbato (C₆H₇KO₂) ir praskiesti vandeniu iki brūkšnio;

22.2.2. Įranga ir priemonės:

22.2.2.1. Distiliavimo garais aparatas (žr. skyrių „Lakiųjų rūgščių nustatymo metodai“);

22.2.2.2. Verdančio vandens vonia;

22.2.2.3. Spektrofotometras, kuriuo galima matuoti absorbciją, kai bangos ilgis yra 256 nm, naudojant 1 cm storio kvarco kiuvetę;

22.2.3. Analizė:

22.2.3.1. Distiliavimas

Į distiliavimo garais aparato kolbą įpilama 10 cm³ vyno ir įdedama 1–2 g vyno rūgšties (22.2.1.1 p.); surenkama 250 cm³ distiliato;

22.2.3.2. Kalibravimo kreivės sudarymas

Etaloninis tirpalas (22.2.1.3 p.) praskiedžiamas tokiu santykiu, kad susidarytų 4 etaloniniai tirpalai, kuriuose būtų atitinkamai 0,5; 1,0; 2,5 ir 5 mg sorbo rūgšties dm³. Spektrofotometru (bangos ilgis 256 nm) nustatomos jų absorbcijų vertės, palyginti naudojamas distiliuotas vanduo. Absorbcijos priklausomybė nuo koncentracijos yra tiesinė;

22.2.3.3. Matavimas

Įpilama 5 cm³ distiliato į garinimo lėkštę, kurios skersmuo yra 55 mm, ir 1 cm³ kalcio hidroksido tirpalo (22.2.1.2 p.). Garinama ant vandens vonios, kol liks sausa liekana. Nuosėdos ištirpinamos keliuose kubiniuose centimetruose distiliuoto vandens, visas tirpalas supilamas į 20 cm³ matavimo kolbą ir iki brūkšnio pripilama vandens, kuriuo buvo plauta lėkštė su nuosėdomis. Spektrofotometru išmatuojama absorbcija (bangos ilgis 256 nm). Kaip palyginamasis naudojamas tirpalas, gautas praskiedus 1 cm³ kalcio hidroksido tirpalo (22.2.1.2 p.) 19 cm³ vandens. Kalibravimo kreivėje pažymima išmatuotosios absorbcijos vertė ir surandama sorbo rūgšties koncentracija C tirpale.

PASTABA. Taikant šį metodą, galima neatsižvelgti į nuostolius dėl garinimo, o absorbcija matuojama apdoroto distiliato, kuris skiedžiamas distiliuotu vandeniu santykiu 1:4;

22.2.4. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška

Sorbo rūgšties koncentracija vyne, mg/dm³, apskaičiuojama pagal formulę 100´C; čia C – sorbo rūgšties koncentracija, mg/dm³, tirpale, kuris buvo analizuotas spektrofotometrijos metodu;

22.3. Dujų chromatografijos metodas:

22.3.1. Reagentai:

22.3.1.1. Etilo eteris, (C₂H₅)₂O, nudistiliuotas prieš pat vartojimą;

22.3.1.2. Vidinis etalono tirpalas: undekano rūgšties (C₁₁H₂₂O₂₎ 1 g/dm³ koncentracijos tirpalas 95 tūrio % etilo alkoholyje;

22.3.1.3. Vandeninis sieros rūgšties (H₂SO₄₎ tirpalas (r₂₀ = 1,84 g/cm³), skiestas santykiu 1:3 (t/t);

22.3.2. Įranga ir priemonės:

22.3.2.1. Dujų chromatografas su liepsnos jonizacijos detektoriumi ir nerūdijančio plieno kolonėle (4 m × 1/3 colio), kuri iš anksto buvo apdorota dimetildichlorsilanu (DMDCS) ir užpildyta stacionaria faze, kurią sudaro 2,2’-oksidietanolio sukcinato (5 %) ir fosforo rūgšties (1 %) mišinys (DEGS – H₃PO₄) arba 2,2’-oksidietanolio adipato (7 %) ir fosforo rūgšties (1 %) mišinys (DEGA – H₃PO₄). Stacionari fazė padengiama ant kietosios fazės Gaschrom Q (80–100) meš.

Kolonėlės apdorojimas DMDCS: per kolonėlę leidžiamas tirpalas, kuriame yra 2–3 g toluene ištirpinto DMDCS. Tuoj pat po to, kai baigiama leisti, kolonėlė išplaunama metanoliu, vėliau azotu ir galiausiai heksanu ir vėl azotu. Tik tada ji paruošta užpildyti. Darbo sąlygos: termostato temperatūra 175 ^oC; inžektoriaus ir detektoriaus temperatūra: 230 ^oC; nešiklis – azotas, kurio tekėjimo greitis 200 cm³/min;

22.3.2.2. 10 ml talpos mikrošvirkštas, sugraduotas kas 0,1 ml.

PASTABA. Galima naudotis kitų rūšių geros skiriamosios gebos kolonėlėmis, ypač kapiliarinėmis (pvz., FFAP). Aprašytasis darbo metodas pateikiamas kaip pavyzdys;

22.3.3. Analizė:

22.3.3.1. Analizuojamo mėginio paruošimas

Į apytiksliai 40 cm³ talpos stiklinį mėgintuvėlį su šlifo kamščiu įpilama 20 cm³ vyno, 2 cm³ vidinio etalono tirpalo (22.3.1.2 p.) bei 1 cm³ praskiestos sieros rūgšties (22.3.1.3 p.). Tirpalas maišomas kelis kartus apverčiant mėgintuvėlį. Sumaišius į tirpalą įpilama dar 10 cm³ etilo eterio (22.3.1.1 p.). Ekstrahuojama sorbo rūgštis į organinį sluoksnį, plakant mėgintuvėlio turinį 5 min, ir leidžiama sluoksniams atsiskirti;

22.3.3.2. Etaloninio tirpalo paruošimas

Parenkamas vynas, kurio eterinio ekstrakto hromatogramoje nėra sorbo rūgšties smailės. Įpilama į tokį vyną sorbo rūgšties, kurios koncentracija yra 100 mg/dm³. 20 cm³ taip paruošto mėginio apdorojama pagal 22.3.3.1 p. aprašytą metodiką;

22.3.3.3. Chromatografija

Į chromatografą mikrošvirkštu paeiliui įšvirkščiama 2 ml eterinio ekstrakto, gauto pagal 22.3.3.2 p. ir 2 ml eterinio ekstrakto, gauto pagal 22.3.3.1 p. aprašytas metodikas. Užrašomos atitinkamos chromatogramos: patikrinama, ar sorbo rūgšties ir vidinio etalono sulaikymo trukmės atitinka. Išmatuojamas kiekvienos užrašytos smailės aukštis (arba plotas);

22.3.4. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška

Sorbo rūgšties koncentracija, mg/dm³, analizuojamame vyne yra apskaičiuojama pagal formulę:

100´h/H´I/I;

čia H – sorbo rūgšties smailės aukštis etaloniniame tirpale; h – sorbo rūgšties smailės aukštis analizuojamame tirpale; I – vidinio etalono smailės aukštis analizuojamame tirpale; i – vidinio etalono smailės aukštis analizuojamame tirpale.

PASTABA. Sorbo rūgšties koncentraciją galima nustatyti matuojant atitinkamos smailės plotą.

22.4. Plonasluoksnės chromatografijos metodas:

22.4.1. Reagentai:

22.4.1.1. Etilo eteris, (C₂H₅)₂O;

22.4.1.2. Vandeninis sieros rūgšties, H₂SO₄, tirpalas (r₂₀ = 1,84 g/cm³), skiestas santykiu 1:3 (t/t);

22.4.1.3. Etaloninis 20 mg/dm³ sorbo rūgšties tirpalas maždaug 10 tūrio % etilo alkoholio ir vandens mišinyje;

22.4.1.4. Judrioji fazė: heksanas-pentanas-acto rūgštis (20:20:3) (C₆H₁₄/C₅H₁₂/CH₃COOH, r₂₀ = 1,05 g/cm³);

22.4.2. Įranga ir priemonės:

22.4.2.1. 20´20 cm plokštelės, skirtos plonasluoksnei chromatografijai ir padengtos 0,15 mm storio poliamido suspensija, į kurią įdėta fluorescencinio indikatoriaus;

22.4.2.2. Indas plonasluoksnei chromatografijai;

22.4.2.3. Mikropipetė arba mikrošvirkštas, kuriais 5ml galima lašinti ± 0,1 ml tikslumu;

22.4.2.4. Ultravioletinė lempa (254 nm);

22.4.3. Analizė:

22.4.3.1. Analizuojamo mėginio paruošimas

Į apytiksliai 25 cm³ talpos stiklo mėgintuvėlį su šlifo kamščiu įpilama 10 cm³ vyno, 1cm³ skiestos sieros rūgšties (22.4.1.2 p.) bei 5 cm³ etilo eterio (22.4.1.1 p.). Tirpalas maišomas kelis kartus apverčiant mėgintuvėlį. Leidžiama nusistovėti;

22.4.3.2. Praskiestų etaloninių tirpalų paruošimas

Iš 22.4.1.3 p. nurodyto tirpalo paruošiami 5 praskiesti etaloniniai tirpalai, kuriuose būtų atitinkamai 2, 4, 6, 8 ir 10 mg/ dm³ sorbo rūgšties;

22.4.3.3. Chromatografija

Mikrošvirkštu ar mikropipete užlašinama 5 ml eterinio ekstrakto, gauto, kaip nurodyta 22.4.3.1 p., ir po 5 ml kiekvieno praskiesto etaloninio tirpalo (22.4.3.2 p.) ant plokštelės taip, kad nuo apatinio plokštelės krašto liktų 2 cm ir tarp lašų būtų taip pat 2 cm tarpas. Į chromatografo indą, maždaug 0,5 cm aukščio, įpilama judriosios fazės (22.4.1.4 p.) ir palaukiama, kol visas oras inde bus prisodrintas tirpalo garų. Tada į indą įdedama plokštelė. Palaukiama, kol chromatograma išryškėja nuo 12 iki 15 cm (maždaug 30 min). Plokštelė išdžiovinama vėsaus oro srovėje. Chromatograma ištiriama naudojantis 254 nm ultravioletine lempa. Dėmelės, rodančios sorbo rūgšties buvimą, taps tamsiai violetiškai geltonos fluorescuojančiame plokštelės fone;

22.4.4. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška

Dėmelių, atsiradusių dėl analizuojamajame mėginyje ir etaloniniuose tirpaluose esančios sorbo rūgšties, intensyvumo palyginimas leidžia atlikti pusiau kiekybinį sorbo rūgšties koncentracijos nuo 2 iki 10 mg/dm³ įvertinimą. 1 mg/dm³ koncentraciją galima nustatyti užlašinus 10 ml analizuojamo mėginio. Koncentracijas, kurios viršija 10 mg/dm³, galima nustatyti užlašinus mažiau negu 5 ml analizuojamo tirpalo (kiekis matuojamas mikrošvirkštu).

23. L-Askorbo rūgšties nustatymo metodai

23.1. Metodų esmė:

Siūlomais metodais galima nustatyti, ar vyne bei misoje yra L-askorbo ir dehidroaskorbo rūgščių.

23.1.1. Pamatinis metodas (fluorimetrija)

L-Askorbo rūgštis oksiduojama ant aktyvintųjų anglių iki dehidroaskorbo rūgšties. Pastaroji, reaguodama su o-fenilendiaminu (OPDA), sudaro fluorescuojantį junginį. Tuščiojo mėginio analizės metu, naudojant boro rūgštį, galima nustatyti pašalinę fluorescenciją (susidaro boro rūgšties ir dehidroaskorbo rūgšties kompleksas) ir atimti ją iš rezultato, gauto fluorimetrijos būdu;

23.1.2. Įprastinis metodas (kolorimetrija)

Jodas oksiduoja L-askorbo rūgštį iki dehidroaskorbo rūgšties, kuri nusodinama susidarant bis(2,4-dinitrofenilhidrazonui). Atskirtas pluonasluoksnės chromatografijos metu ir ištirpintas acto rūgštyje raudonos spalvos darinys nustatomas spektrofotometriškai, kai bangos ilgis yra 500 nm;

23.2. Pamatinis metodas (fluorimetrija):

23.2.1. Reagentai:

23.2.1.1. o-Fenilendiamindihidrochlorido tirpalas (C₆H₁₀Cl₂N₂₎, 0,02 g/100 cm³; ruošiamas prieš pat vartojimą;

23.2.1.2. Natrio acetato tirpalas(CH₃COONa´3H₂O), 500g/dm³;

23.2.1.3. Boro rūgšties ir natrio acetato mišinio tirpalas: ištirpinama 3 g boro rūgšties (H₃BO₃) 100 cm³ natrio acetato tirpalo (23.2.1.2 p.); šis tirpalas turi būti ruošiamas prieš pat vartojimą;

23.2.1.4. Acto rūgšties tirpalas, CH₃COOH (r₂₀ = 1,05 g/cm³); ledinė acto rūgštis praskiedžiama iki 56 % (t/t); tokio tirpalo pH yra apie 1,2;

23.2.1.5. Etaloninis L-askorbo rūgšties tirpalas, 1g/dm³: prieš pat vartojimą 50 cm³ acto rūgšties tirpalo ištirpinama 50 mg L-askorbo rūgšties (C₆H₈O₆₎, išdžiovintos nuo šviesos apsaugotoje džiovinimo spintoje;

23.2.1.6. Analizinio grynumo aktyvintosios anglys (vienas iš prekybinių pavadinimų „Norite“). Į 2 dm³ kūgio kolbą įdedama 200 g aktyvintųjų anglių ir įpilama 500 cm³ 10 % (t/t) druskos rūgšties (HCl) tirpalo (r₂₀ = 1,19 g/cm³). Užvirinama ir filtruojama per stiklo filtrą, kurio akytumas yra 3. Tokiu būdu apdorotos anglys supilamos į 2 dm³ kūgio kolbą, įpilama 1 dm³ vandens, suplakama ir filtruojama per stiklo filtrą, kurio akytumas yra 3. Procedūra kartojama dar 2 kartus. Liekana ant filtro dedama į 115±5 ^oC termostatuojamą džiovinimo spintą ir paliekama 12 h (pernakt);

23.2.2. Įranga ir priemonės:

23.2.2.1. Fluorimetras. Naudojamasi spektrofluorimetru, kuriame yra ištisinio spektro lempa. Optimalūs sužadinimo ir emisijos bangų ilgiai turi būti nustatyti iš anksto ir priklauso nuo aparatūros. Pavyzdžiui, sužadinimo bangos ilgis gali būti apytiksliai 350 nm, o emisijos bangos ilgis – apytiksliai 430 nm. Naudojamos 1 cm storio kiuvetės;

23.2.2.2. Stiklo filtras, kurio akytumas yra 3;

23.2.2.3. Mėgintuvėliai (apytiksliai 10 mm skersmens);

23.2.2.4. Lazdelės maišyti mėgintuvėliuose;

23.2.3. Analizė:

23.2.3.1. Vyno ar misos mėginio paruošimas

Į 100 cm³ talpos matavimo kolbą įpilama vyno ar misos ir praskiedžiama 56 % acto rūgšties tirpalu (23.2.1.4 p.) iki brūkšnio. L-Askorbo rūgšties koncentracija gautame tirpale turi būti nuo 0 iki 60 mg/dm³. Sumaišomas kolbos turinys, įdedama 2 g aktyvuotų anglių (23.2.1.6 p.) ir paliekama 15 min pastovėti. Retkarčiais pamaišoma. Tirpalas filtruojamas per paprastą filtravimo popierių, tačiau pirmi keli kubiniai centimetrai filtrato išpilami.

Paimamos dvi 100 cm³ talpos matavimo kolbos. Į pirmą jų įpilama tuščiojo mėginio – 5 cm³ filtrato ir 5 cm³ sumaišyto boro rūgšties ir natrio acetato tirpalo (23.2.1.3 p.), į antrą – mėginio – 5 cm³ natrio acetato tirpalo (23.2.1.2 p.). Paliekama 15 min pastovėti. Retkarčiais pamaišoma. Praskiedžiama vandeniu iki brūkšnio.

Iš kiekvienos kolbos paimama po 2 cm³ tirpalo ir įpilama 5 cm³ o‑fenilendiamino tirpalo (23.2.1.1 p.), išmaišoma. Reakcija vyksta apie 30 min, kol tirpalas patamsėja. Tada išmatuojama spektrofluorimetru;

23.2.3.2. Kalibravimo kreivės sudarymas

Į tris 100 cm³ talpos matavimo kolbas įpilama 2, 4 ir 6 cm³ etaloninio L-askorbo rūgšties tirpalo (23.2.1.5 p.), praskiedžiama acto rūgšties tirpalu (23.2.1.4 p.) iki brūkšnio ir plakant tirpalą sumaišoma. Tokiu būdu paruoštų 100 cm³ etaloninių tirpalų yra 2, 4 ir 6 mg L‑askorbo rūgšties.

Į kiekvieną kolbą įdedama po 2 g aktyvintųjų anglių (23.2.1.6 p.) ir paliekama 15 min pastovėti. Retkarčiais pamaišoma. Tirpalas filtruojamas per paprastą filtravimo popierių, tačiau pirmi keli kubiniai centimetrai filtrato išpilami. Į tris 100 cm³ talpos matavimo kolbas įpilama po 5 cm³ kiekvieno surinkto filtrato (pirmasis rinkinys). Procedūra pakartojama ir taip gaunamas antrasis 3 matavimo kolbų rinkinys. Į kiekvieną pirmojo rinkinio kolbą (skirtą tuščiajam bandymui) įpilama 5 cm³ borato rūgšties ir natrio acetato mišinio tirpalo (23.2.1.5 p.), o į kiekvieną antrojo rinkinio kolbą įpilama po 5 cm³ natrio acetato tirpalo (23.2.1.2 p.).

Paliekama pastovėti 15 min, retkarčiais pamaišoma. Praskiedžiama distiliuotu vandeniu iki brūkšnio. Iš kiekvienos kolbos paimama po 2 cm³ tirpalo, įpilama po 5 cm³ o‑fenilendiamino tirpalo (23.2.1.1 p.) ir išmaišoma. Reakcija turi vykti apie 30 min, kol tirpalas patamsėja. Tada matuojama spektrofluorimetru;

23.2.3.3. Nustatymas fluorimetrijos metodu

Kiekvieno tirpalo, pagal kurį sudaroma kalibravimo kreivė, bei analizuojamo tirpalo matavimų skalėje nustatoma nulinė vertė. Tam naudojamas atitinkamas tuščiasis mėginys. Tada išmatuojamas kiekvieno tirpalo fluorescencijos intensyvumas. Nubraižoma kalibravimo kreivė. Tai tiesi linija, einanti per koordinačių pradžią. Ant šios tiesės randama vertė, kuri atitinka nustatytąją, ir pagal ją – analizuojamame tirpale esančių L-askorbo ir (+)-dehidroaskorbo rūgščių koncentracija C;

23.2.3.4. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška

L-Askorbo ir dehidroaskorbo rūgščių koncentracija vyne, mg/dm³, apskaičiuojama pagal formulę C´F; čia F – praskiedimo koeficientas;

23.3. Įprastinis metodas (kolorimetrija):

23.3.1. Reagentai:

23.3.1.1. 30 % (m/t) metafosforo rūgšties tirpalas. Pasveriama 30 g metafosforo rūgšties, (HPO₃)_n, sutrintos grūstuvėje. Greitai nuplaunama įmerkus į distiliuotą vandenį ir išmaišoma. Rūgštis ištirpinama 100 cm³ talpos matavimo kolboje distiliuotame vandenyje ir praskiedžiama iki brūkšnio. Tokiame tirpale metafosforo rūgšties koncentracija apytiksliai 30 % (m/t);

23.3.1.2. 3 % (m/t) metafosforo rūgšties tirpalas ruošiamas prieš pat vartojimą, skiedžiant tirpalą 23.3.1.1 distiliuotu vandeniu santykiu 1:10;

23.3.1.3. 1 % (m/t) metafosforo rūgšties tirpalas ruošiamas prieš pat vartojimą, skiedžiant tirpalą 23.3.1.1 distiliuotu vandeniu santykiu 1:30;

23.3.1.4. Poliamido suspensija. 10 g chromatografijoje vartojamo poliamido ištirpinama 60 cm³ distiliuoto vandens. Paliekama pastovėti 2 h. Paruošto kiekio pakanka keturioms analizėms;

23.3.1.5. Tiokarbamidas, (NH₂)₂CS;

23.3.1.6. 0,05 M jodo tirpalas, J₂;

23.3.1.7. 6 % (m/t) 2,4-dinitrofenilhidrazino tirpalas. Ištirpinama 6 g 2,4-dinitrofenilhidrazino (C₆H₆N₄O₄) 50 cm³ ledinės acto rūgšties (r₂₀ = 1,05 g/cm³) ir įpilama 50 cm³ sieros rūgšties (r₂₀ = 1,84 g/cm³). 2,4-Dinitrofenilhidrazinas ištirpinamas maišant;

23.3.1.8. Etilacetatas (C₄H₈O₂), į kurį įpilta 2 % (t/t) ledinės acto rūgšties (23.3.1.12 p.);

23.3.1.9. Chloroformas, CHCl₃;

23.3.1.10. Vandeninis 0,5 % (m/t) krakmolo tirpalas;

23.3.1.11. Judrioji fazė: etilacetatas, 50 tūr.; chloroformas, 60 tūr.; ledinė acto rūgštis, 5 tūr. Prieš vartojimą skysčių mišinys paliekamas 12 h pastovėti;

23.3.1.12. Ledinė acto rūgštis, CH₃COOH (r₂₀ = 1,05 g/cm³);

23.3.1.13. L-Askorbo rūgšties tirpalas, 0,1 g / 100 cm³ 1% metafosforo rūgšties tirpalo (23.3.1.3 p.);

23.3.2. Įranga ir priemonės:

23.3.2.1. Laboratorinė centrifuga su 50 cm³ centrifugavimo mėgintuvėliais, turinčiais matinio stiklo kamštelius;

23.3.2.2. Šalto, 5-10 °C temperatūros, vandens vonia su termostatu;

23.3.2.3. 20 °C temperatūros vandens vonia su termostatu;

23.3.2.4. Plokštelės (20´20 cm) plonasluoksnei chromatografijai, padengtos silikageliu G (sluoksnio storis – 0,25 ar 0,3 mm);

23.3.2.5. Chromatografijos indas;

23.3.2.6. Mikropipetė, sugraduota kas 0,2 cm^3;

23.3.2.7. Spektrofotometras, tinkamas absorbcijai matuoti, kai bangos ilgis yra 500 nm, bei 1 cm storio kiuvetės;

23.3.3. Analizė:

23.3.3.1. L-Askorbo rūgšties oksidavimas iki dehidroaskorbo rūgšties

Į 100 cm³ talpos matavimo kolbą įpilama 50 cm³ vyno, paskui 15 cm³ poliamido suspensijos (23.3.1.4 p.) ir iki brūkšnio pripilama 3 % metafosforo rūgšties tirpalo (23.3.1.2 p.). Gautas tirpalas paliekamas 1 h pastovėti. Tačiau gana dažnai turinį reikia suplakti. Toliau tirpalas nufiltruojamas per rievėtą filtrą. Į centrifugos vamzdelį įpilama 20 cm³ filtrato ir 1 cm³ 0,05 M jodo tirpalo (23.3.1.6 p.). Turinys sumaišomas plakant užkimštą centrifugos vamzdelį. Po 1 min įdedama apytiksliai 25 mg tiokarbamido – taip pašalinamas jodo perteklius;

23.3.3.2. Diketogulono rūgšties darinio - bis(2,4-dinitrofenilhidrazono) – susidarymas ir ekstrahavimas.

Į vandens vonelę, kurioje palaikoma 5–10 ^oC vandens temperatūra, įstatomas vamzdelis ir į jį įpilama 4 cm³ 2,4-dinitrofenilhidrazino tirpalo (23.3.1.7 p.). Atsargiai sumaišoma. Reikia žiūrėti, kad stiklinis kamštelis nesušlaptų. Vamzdelis gerai uždaromas, įstatomas į 20 ^oC temperatūros vandens vonelę ir paliekamas 16 h (pernakt).

Į centrifugos mėgintuvėlį įpilama 15 cm³ etilacetato (23.3.1.8 p.). Mėgintuvėlis užkemšamas matinio stiklo kamšteliu ir 30 s stipriai plakama, paskui 5 min centrifuguojama, kai išcentrinė jėga yra 350-400 g. Į kūgio kolbą su matinio stiklo kamšteliu įlašinama 10 cm³ etilacetato ekstrakto. Tada centrifugos mėgintuvėlis atkemšamas ir įpilama dar 5 cm³ etilacetato (23.3.1.8 p.). Vėl 30 s plakama ir 5 min tokiu pačiu greičiu centrifuguojama. Į kūgio kolbą, kurioje yra 10 cm³ pirmo ekstrakto, įlašinama 5 cm³ etilacetato ekstrakto ir sumaišoma;

23.3.3.3. Bis (2,4-dinitrofenilhidrazono) išskyrimas chromatografijos būdu. Tai atlikti reikia per 2 h nuo ekstrakto paruošimo (23.3.3.2 p.).

Ant visos pradinės linijos, kuri nutolusi 2 cm nuo plokštelės krašto, užpilama 0,2 cm³ etilacetato ekstrakto. Visuose plokštelės kraštuose turi likti po 2 cm. Judrioji fazė (23.3.1.11 p.) panardinama į chromatografijos vonelę 1 cm gylyje ir palaukiama, kol atmosfera prisisotina tirpalo garų. Plokštelė įdedama taip, kad tirpalas galėtų tekėti iki jos krašto.

Plokštelė džiovinama 1 h ventiliuojamoje traukos spintoje, laikoma vertikalioje padėtyje virš blizgiojo popieriaus lakšto ir mentele nugrandoma (atitinkamu kampu tekėjimo pusėn) raudonos spalvos vieta (būdinga 2,4-dinitrofenilhidrazonui). Visus gautus miltelius reikia be nuostolių supilti į kūgio kolbą su šlifo kamščiu. Tada ir įpilama 4 cm³ acto rūgšties (23.3.1.12 p.). Paliekama pastovėti 30 min, tačiau dažnai pamaišoma. Gautas tirpalas filtruojamas per rievėtą filtravimo popierių tiesiog į spektrofotometro kiuvetę (23.3.2.7 p.). Filtratas turi būti visiškai skaidrus. Išmatuojama šio tirpalo absorbcija, kai bangos ilgis yra 500 nm. Kiuvetėje su palyginamuoju tirpalu turi būti acto rūgštis (23.3.1.12 p.), kurios absorbcija lygi nuliui;

23.3.3.4. Kalibravimo kreivės sudarymas

Į tris 100 cm³ talpos matavimo kolbas įpilama 5, 10 ir 15 cm³ L-askorbo rūgšties tirpalo (23.3.1.13 p.) ir iki brūkšnio praskiedžiama 1 % metafosforo rūgšties tirpalu (23.3.1.3 p.). Gautų tirpalų koncentracija yra atitinkamai 50, 100 ir 150 mg /dm³ askorbo rūgšties. Kiekvienas šių tirpalų apdorojamas pagal metodiką, aprašytą 23.3.3.1, 23.3.3.2 ir 23.3.3.3 p. Nubraižoma kalibravimo kreivė. Tai - tiesi linija, einanti per koordinačių ašies pradžią;

23.3.3.5. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška

L-Askorbo ir dehidroaskorbo rūgščių koncentracija vyne išreiškiama mg/dm³. Tiesioje kalibravimo kreivės dalyje nustatoma absorbcijos vertė, išmatuota pagal 23.3.3.3 p. aprašytą metodiką. Taip surandama L-askorbo ir dehidroaskorbo rūgščių koncentracija analizuojamame tirpale.

PASTABA. Jei L-askorbo ir dehidroaskorbo rūgščių koncentracija yra didesnė negu 150 mg/dm³, mėginio tūris sumažinamas iki 25, 20 ar 10 cm³ vyno ir gautas rezultatas padauginamas iš praskiedimo koeficiento F.

24. Aktyviojo rūgštingumo (pH) nustatymo metodas

24.1. Įvadas

pH – tai misos ir vyno aktyviojo rūgštingumo rodiklis. Aktyvusis rūgštingumas - tai neigiamas vandenilio jonų koncentracijos tirpaluose logaritmas, išreikštas moliais litre. Skirtingai nuo titruojamojo rūgštingumo, parodančio bendrąjį rūgščių kiekį vyne arba sultyse, aktyvusis rūgštingumas parodo disocijuotų rūgščių kiekį. Tarp vandenilio rodiklio ir vyno titruojamojo rūgštingumo tiesioginio ryšio nėra.

Neutraliosios terpės pH yra lygus 7, rūgščiuosiuose tirpaluose vandenilio jonų kiekis didėja ir pH tuo mažesnis, kuo rūgštesnė terpė. Šarmų tirpaluose, atvirkščiai, pH didesnis nei 7. Misos ir vyno pH svyruoja tarp 2,7 ir 4.

Vandenilio rodiklis yra svarbus vyno formavimosi ir brendimo procesams. Nuo jo vertės priklauso pirminių ir antrinių rūgimo produktų santykis, vyno polinkis oksiduotis, kristališkai bei biologiškai susidrumsti, oksidacijos ir redukcijos potencialo vertė, vyno apdorojimo (drumstumą sudarančių dalelių stabilizavimas ir pašalinimas) eiga. Didelį vaidmenį vandenilio rodiklis vaidina putojančio vyno technologijoje. pH padidinti naudojama kreida, sumažinti - citrinų rūgštis. Sulčių ir vyno pH nustatomas elektrometrijos metodu.

24.2. Metodo esmė

Potencialo tarp dviejų panardintų į vyną (arba į misą) elektrodų skirtumo matavimas. Vieno iš elektrodų potencialas priklauso nuo skysčio pH vertės, antrojo elektrodo potencialas yra pastovus ir žinomas, šis elektrodas yra etaloninis.

24.3. Įranga ir priemonės:

24.3.1. pH–metras su pH vienetų skale, matavimo paklaida ne didesnė kaip 0,05 vnt;

24.3.2. Elektrodai: stiklinis (jis laikomas distiliuotame vandenyje), etaloninis, kalomelio (jis laikomas koncentruotame kalio chlorido tirpale), kombinuotasis (jis laikomas distiliuotame vandenyje);

24.4. Reagentai ir tirpalai:

24.4.1. Buferiniai tirpalai: sotusis (kuriame ne mažiau kaip 5,7 g) rūgščiojo kalio ftalato tirpalas 20 ºC temperatūroje (HOOC C₂H₄O₂ COOK). Šis tirpalas saugomas 2 mėnesius su 0,1 g timolio 200 cm³;

	3,57 20 ºC temp.
pH	3,56 20 ºC temp.
	3,55 20 ºC temp.

0,05 M (kuriame yra 10,211 g/dm³) rūgščiojo kalio ftalato tirpalas 20 ºC temperatūroje (HOOC C₆H₄ COOK). Maksimalus saugojimo laikas - 2 mėnesiai.

	3,999 15 ºC temp.
pH	4,003 20 ºC temp.
	4,008 25 ºC temp.
	4,015 30 ºC temp.

Tirpalas, kuriame yra:

kalio dihidrofosfato, KH₂PO₄, g                                3,4023

rūgščiojo kalio hidrofosfato, K₂HPO₄, g                   4,354

vandens, dm³                                                                                  iki 1.

Maksimalus saugojimo laikas – 2 mėnesiai.

	6,90 15 ºC temp.
pH	6,88 20 ºC temp.
	6,86 25 ºC temp.
	6,85 30 ºC temp..

PASTABA. Galima naudoti etaloninius buferinius tirpalus, įsigytus specializuotose parduotuvėse;

24.5. Analizė:

24.5.1 Mėginio paruošimas analizei

Misa ar vynas analizuojami be jokio papildomo paruošimo. Rektifikuota koncentruota misa praskiedžiama vandeni, kad bendrųjų cukrų koncentracija mėginyje būtų apie 25±0,5 % (m/m) (25°Brix). Jei P– bendrųjų cukrų koncentracija masės procentais rektifikuotoje misoje, analizei pasveriamas toks kieksis 2500/P ir praskieskite, kad gautūsi 100 g tirpalo;

24.5.2. Prietaiso nulinės padėties nustatymas. Prietaiso nulinė padėtis nustatoma prieš kiekvieną matavimą griežtai pagal galiojančią instrukciją;

24.5.3. pH–metro patikrinimas. pH-metras tikrinamas 20 ºC temperatūroje pagal prietaiso instrukciją, naudojant buferinius tirpalus, kurių pH 6,88 ir 3,57. Buferinis tirpalas, kurio pH 4,00 20 ºC temperatūroje, naudojamas prietaiso skalės kalibravimo kontrolei;

24.5.4. Matavimas

Elektrodai panardinami į 20-25 ºC temperatūros vyną (arba misą), bet geriau, jeigu galima matavimus atlikti 20 ºC temperatūroje. pH vertė nustatoma prietaiso skalėje. Atliekami mažiausiai du matavimai. Galutinis rezultatas – dviejų matavimo rezultatų vidurkis;

24.5.5. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška

Vyno (arba misos) pH išreiškiamas dviejų ženklų po kablelio tikslumu.

25. Sieros dioksido nustatymo metodai

25.1. Įvadas

SO₂ (sieros dioksidas) – tai bespalvės aitraus kvapo dujos. Gerai tirpsta vandenyje, o tirpdamos sudaro sulfito rūgštį. Sulfito rūgštį gali sudaryti kai kurios mielių rūšys rūgimo metu, jos gali būti dedama į misą ir į vyną. Ji pasižymi stipriomis redukuojančiomis ir antiseptinėmis savybėmis. Vyno gamyboje ji plačiai naudojama išspaudoms, misai ir vynui sulfituoti.

Sulfito rūgšties misoje ir vyne būna laisvos (nedisocijuota H₂SO₃, rūgščiojo sulfito HSO₃¯, sulfito SO₃^{` `} jonai) ir junginiuose (su acetaldehidu, pirovynuogių ir a-ketoglutaro rūgštimis, cukrumi, dažančiomis ir kitomis medžiagomis). Skirtingų formų kiekis priklauso nuo terpės pH ir temperatūros. Aseptinėmis savybėmis pasižymi nedisocijuota H₂SO₃ ir jonai HSO₃¯ ir SO₃^{` `.} (pastarieji silpnesnėmis).

Manoma, kad sieros dioksidas inaktyvina oksidavimo fermentus, tarp jų dehidrogenazes, paralyžiuoja mielių ląstelių funkciją. Esant sieros dioksido, misos mikroflora (laukinės mielės, bakterijos, pelėsiai) žūva ir rūgimą vykdo grynos mielių kultūros, galinčios augti esant nemažam sulfato rūgšties kiekiui. Sieros dioksidą, kaip stiprų reduktorių, vyne ištirpęs deguonis lengvai oksiduoja iki sulfato rūgšties. Jis yra oksidazių inhibitorius, neleidžiantis susidaryti spalvotosioms medžiagoms, gadinančioms skonį, spalvą ir stalo vynų rinkinį, stipriai sumažina jauno vyno oksidacijos ir redukcijos potencialą. Esant sulfito rūgšties, vyne susidaro sulfito ir sulfato oksidacijos ir redukcijos sistema, kurios potencialas apie 200 mV. Manoma, kad sulfito rūgštis gali stimuliuoti ir reguliuoti alkoholinį rūgimą.

Sulfito rūgštis - tai vandenilio sulfido šaltinis vyne. Visų formų sulfito rūgšties kiekis vyne ribojamas. Leistinasis sulfito rūgšties kiekis vyne įvairiose šalyse yra nevienodas: pavyzdžiui, Vokietijoje, Austrijoje, Rumunijoje ir kt. leidžiama 450 mg/dm³ bendrojo kiekio; Ispanijoje, Austrijoje, Rumunijoje – 100 mg/dm³ laisvosios sulfito rūgšties. NVS šalyse leistinas vyne bendrasis sulfito rūgšties kiekis yra iki 200 mg/dm³ ir laisvosios rūgšties iki 20 mg/dm³, pusiau saldžiame vyne atitinkamai iki 300 mg/dm³ ir 30 mg/dm³.

TVVO nustatė tokius SO₂ kiekio vyne apribojimus: vynui su mažiau kaip 4 g/dm³ cukraus, raudonajam ir rausvajam – 200 mg/dm³, baltajam – 250 mg/dm³; vynui su daugiau nei 4 g/dm³ cukraus – 300 mg/dm³. Išimties atveju kai kurių rūšių baltajame vyne leidžiama iki 100 mg/dm³ sulfito. ES vyno įstatymuose nustatyta, kad bendrasis sieros anhidrido kiekis paruoštame vyne, išskyrus likerį ir putojantį, neturi viršyti: raudonajame vyne – 160 mg/dm³, baltajame ir rausvajame – 210 mg/dm³.

Ribojamas maksimalus sieros anhidrido kiekis, nustatytas vynui, turinčiam liekamojo cukraus, išreikšto invertuotuoju cukrumi, 5g/dm³ ir daugiau, raudonajam vynui – iki 210 mg/dm³, baltajam ir rausvajam – iki 260 mg/dm³, vynui, turinčiam žymos „Spatlese“ teisę, ir vynui su pavadinimu pagal kilmę – iki 300 mg/dm³; vynui, turinčiam žymos „Auslese“ teisę ir baltajam aukščiausios kokybės vynui su pavadinimu pagal kilmę – iki 350 mg/dm³; vynui, turinčiam žymų „Beerenauslese“, „Ausbruch“ ir kt. teisę – iki 400 mg/dm³.

Sieros dioksido kiekio sumažinimo vyne problema dar neišspręsta, todėl daugelyje šalių atliekami nuodugnūs SO₂ formų ir jų sąveikos su terpe tyrimai. Žinoma, kad laisvasis SO₂ yra pagrindinė forma, stabdanti mikroorganizmų dauginimąsi. Ištirpintas SO₂, kurio sudėtyje yra nuo 1 iki 10 % laisvosios formos, pasižymi didžiausiu antiseptiniu poveikiu, esant nedideliam pH. Turint omenyje, kad laisvojo SO₂ koncentracija priklauso nuo pH, buvo nustatyti ištirpinto joninio SO₂ kiekiai skirtingoms pH vertėms. Šie SO₂ kiekiai, kurie yra aktyviausiai veikianti antimikrobinė sieros dioksido priedo dalis, buvo pavadinti molekuliniu SO₂.

Vyno, kuriame yra liekamojo cukraus, biologiniam stabilumui užtikrinti pakanka 1,20 mg/dm³ molekulinio SO₂. Mažesnė jo koncentracija tinka saugant vyną žemesnėje temperatūroje. Sieros dioksidui būdingas kvapas atsiranda, kai molekulinio SO₂ koncentracija būna 2 mg/dm³ ir didesnė. Tiek technologiniu, tiek ekonominiu požiūriu sieros dioksidas lieka universaliausia ir priimtina priemonė vyno gamyboje. Tačiau pagal kokybės gerinimo reikalavimus jo kiekį vyne reikėtų sumažinti. SO₂ koncentracija pagamintame vyne daugelyje šalių siejama su žaliavos kokybe ir technologijos lygiu.

25.2. Apibrėžimas

Laisvuoju sieros dioksidu vadinamas misoje arba vyne esantis H₂SO₃ ir HSO₃¯ formų sieros dioksidas, kuris priklausomai nuo pH ir temperatūros yra pusiausvyroje: H₂SO₃ ↔ H⁺+HSO₃¯. H₂SO₃ laikomas molekuliniu sieros dioksidu.

Bendruoju sieros dioksidu vadinama vyne esančių įvairių formų sieros dioksidų, laisvų arba junginiuose su vyno komponentais, suma;

25.3. Laisvasis ir bendrasis sieros dioksidų kiekis:

25.3.1. Metodų esmė:

25.3.1.1. Pamatinis metodas

Laisvasis sieros dioksidas pašalinamas iš vyno kartu su oro arba azoto srove; tada jis surenkamas ir oksiduojamas barbotuojant skiestajame ir neutraliajame vandenilio peroksido tirpale. Susidariusi sulfato rūgštis nustatoma titruotu natrio hidroksido tirpalu. Bendrasis sieros dioksidas pašalinamas oro ar azoto srove kaitinant vyną ar skiestą koncentruotą misą iki 100 ºC temperatūros.

25.3.1.2. Greitasis metodas

Laisvasis sieros dioksidas nustatomas tiesiogiai jodometrinio titravimo būdu. Sujungtasis sieros dioksidas nustatomas taip pat jodometrinio titravimo būdu po to, kai suardomas šarmu. Sudėjus gautus rezultatus, gaunamas bendrasis sieros dioksidas.

25.3.2. Pamatinis metodas:

25.3.2.1. Įranga ir priemonės

Sieros dioksidui nustatyti naudojamo prietaiso principinė schema pateikta 25.1 pav. Svarbiausia, kad šiam tikslui naudojamoje aparatūroje šaldytuvas būtų toks, koks pavaizduotas 25.1 pav. Dujų pūtimo į distiliavimo indą vamzdelis turi apvalų 1 cm skersmens galą, jo didžiajame horizontaliame pjūvyje yra dvidešimt 0,2 mm skersmens skylučių. Šio vamzdelio gale gali būti frituotoji stiklo plokštelė dideliam kiekiui burbuliukų sudaryti. Šie burbuliukai užtikrina gerą dujų ir skysčio fazių sąlytį.

Dujų, einančių per prietaisą, suvartojama apie 40 dm³/h. Indas, esantis dešiniojoje prietaiso pusėje, skirtas slėgio sumažinimui apriboti. Slėgis sumažinamas vandens siurbliu iki 20-30 cm vand. st. Tam, kad būtų įmanoma reguliuoti slėgio sumažėjimą, palaikant optimalų dujų suvartojimą, patogų naudoti srautomatį su pusiau kapiliariniu vamzdeliu tarp distiliavimo talpos ir indo.

25.3.2.1.2. Mikrobiuretė;

25.1 pav. Sieros dioksido nustatymo prietaisas. Matmenys duoti milimetrais. Vidiniai 4 koncentriškų vamzdelių, sudarančių kondensatorių, skersmenys: 45, 34, 27 ir 10 mm

25.3.2.2. Reagentai:

25.3.2.2.1. 85 % fosforo rūgštis (H₃PO₄, r₂₀=1,71 g/dm³);

25.3.2.2.2. Vandenilio peroksido tirpalas, 9,1 g H₂O₂/dm³ (trys tūriai);

25.3.2.2.3. Reagentas indikatorius:

metilo raudonasis             100 mg;

metilo mėlynasis               50mg;

alkoholis, 50 tūr. %          100 mg;

25.3.2.2.4. 0,01 M natrio hidroksido tirpalas, NaOH;

25.3.2.3. Laisvojo sieros dioksido kiekio nustatymas:

Vynas turi pastovėti 20 ºC temperatūroje pilname, sandariai uždarytame inde 2 dienas prieš tyrimą, jeigu reikia labai tiksliai nustatyti;

25.3.2.3.1. Analizė

Į prietaiso, kuriame išskiriamas sieros dioksidas, 250 cm³ talpos kolbą A įpilama 50 cm³ tiriamojo mėginio ir 15 cm³ fosforo rūgšties tirpalo. Indas prijungiamas prie aparatūros. Į distiliavimo indą B įpilama 2-3 cm³ vandenilio peroksido tirpalo, įlašinami du lašai indikatoriaus ir neutralizuojama 0,01 M natrio hidroksido tirpalu. Per distiliavimo indą 15 min leidžiamas oras (arba azotas). Laisvasis sieros dioksidas išsiskiria ir oksiduojasi iki sulfato rūgšties. Garų pūtimas į distiliavimo indą nutraukiamas ir gauta sulfato rūgštis titruojama 0,01 M natrio hidroksido tirpalu. Titruoti suvartotas natrio hidroksido mililitrų kiekis pažymimas n;

25.3.2.3.2. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška

Skaičiavimai rodo, kad laisvojo sieros dioksido kiekis sudaro 6,4´n, mg/dm³;

–mėginiams, kuriuose yra mažai sieros dioksido (mėginio kiekis 50 cm³): 6´n;

–mėginiams, kurių mėginio kiekis 20 cm³: 16´n;

25.3.2.4. Bendrojo sieros dioksido kiekio nustatymas:

25.3.2.4.1. Analizė

Tiriant rektifikuotą koncentruotą misą, naudojamas praskiestas iki 40 % (m/t) koncentracijos tiroalas (žiūr. 13.5.1. p.). Į 25.1. pav pavaizduoto aparato kolbą įpilama 50 cm³ gauto tirpalo ir 5 cm³ fosforo rūgšties. Kolba sujungiama su aparatu.

Tiriant vyną ir misą, jei spėjama, kad bendrasis SO₂ £ 50 mg/dm³ į aprašyto prietaiso 250 cm³ talpos kolbą įpilama 50 cm³ vyno ir 15 cm³ fosforo rūgšties. Kolba prijungiama prie aparatūros. Jei spėjama, kad bendrasis SO₂ ³ 50 mg/dm³, į aprašyto prietaiso 100 cm³ talpos kolbą įpilama 20 cm³ vyno ir 5 cm³ fosforo rūgšties. Kolba prijungiama prie aparatūros.

Į barboterį B įpilama 2-3 cm³ vandenilio peroksido tirpalo ir neutralizuojama taip, kaip buvo aprašyta. Vynas, esantis kolboje A, užvirinamas ant nedidelės liepsnos (4-5 cm aukščio), kuri turi liesti kolbos dugną. Po kolba dedamas diskas su 30 cm skersmens anga (nenaudoti metalinio sietelio!). Tokiu būdu išvengiama vyno ekstrakto medžiagų pridegimo prie kolbos sienelių. Virinimas tęsiamas azoto arba oro srovės leidimo metu. Per 15 min bendrasis sieros dioksidas visas išsiskiria ir oksiduojasi. Susidariusi sulfato rūgštis nustatoma titruojant 0,01 M natrio hidroksido tirpalu. Titruoti suvartotas natrio hidroksido mililitrų kiekis pažymimas n;

25.3.2.4.2. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška

Bendrasis sieros dioksido kiekis (mg/dm³) apskaičiuojamas taip:

- vyno ir misos mėginiams (mg/dm³), kuriuose yra mažai sieros dioksido (mėginio kiekis 50 cm³): 6,4´n;

- vyno ir misos mėginiams (mg/dm³), kurių mėginio kiekis 20 cm³: 16´n;

– rektifikuotos koncentruotos misos mėginiams (mg/kg bendrojo cukraus kiekio) (50 cm³): (1600´n) / P, čia P–bendrasis cukraus kiekis, masės procentais.

25.3.2.4.3. Pakartojamumas

Kai kiekis <50 mg/dm³ (mėginio kiekis 50 cm³), r = 1 mg/dm³; kai kiekis >50 mg/dm³ (mėginio kiekis 20 cm³), r = 6 mg/dm³;

25.3.2.4.4. Atkuriamumas

Kai kiekis <50 mg/dm³ (mėginio kiekis 50 cm³), R = 9 mg/dm³; kai kiekis >50 mg/dm³ (mėginio kiekis 20 cm³), R = 15 mg/dm³;

25.3.3. Greitasis metodas:

25.3.3.1. Reagentai ir tirpalai:

25.3.3.1.1. Trilonas B (etilendiamintetraacto rūgšties dinatrio druska);

25.3.3.1.2. 4 M (160 g/dm³) natrio hidroksido tirpalas;

25.3.3.1.3. Sieros rūgštis (ρ₂₀ =1,84 g/cm³), skiesta santykiu 1:10 (tūris/tūris);

25.3.3.1.4. 0,025 M jodo tirpalas;

25.3.3.1.5. Krakmolo tirpalas, 5 g/dm³: ištirpinama 5 g krakmolo 500 cm³ vandens, virinama maišant 10 min, įpilama 200 g natrio chlorido. Po ataušinimo praskiedžiama iki 1 dm³;

25.3.3.2. Laisvojo sieros dioksido kiekio nustatymas

Į 500 cm³ talpos kūgio kolbą įpilama 50 cm³ vyno, 5 cm³ krakmolo, 30 mg trilono B ir 3 cm³ H₂SO₄ (1:10). Iš karto titruojama 0,025 M jodo tirpalu, kol susidariusi melsva spalva išlieka nepakitusi 10-15 s. Titruoti suvartotas jodo tirpalo mililitrų kiekis pažymimas n;

25.3.3.3. Sujungtojo sieros dioksido kiekio nustatymas

Įpilama 8 cm³ 4 M natrio hidroksido tirpalo, vieną kartą supurtoma ir palaikoma 5 min. Tada iškart supilama iš cilindro stiklinės 10 cm³ sulfato rūgšties tirpalo (1:10) ir viskas labai gerai supurtoma. Tuojau pat titruojama 0,025 M jodo tirpalu ir pažymimas suvartotas tirpalo mililitrų kiekis n’. Dar įpilama 20 cm³ 4 M natrio hidroksido tirpalo, supurtoma vieną kartą ir palaikoma 5 min. Iškart supilama iš mėgintuvėlio 30 cm³ sulfato rūgšties tirpalo (1:10). Išsiskyręs sieros dioksidas titruojamas 0,025 M jodo tirpalu ir pažymimas suvartotas jodo kiekis n“;

25.3.3.4. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška

Laisvojo sieros dioksido kiekis, mg/dm³ nustatomas iš formulės 32 n; bendrojo – iš formulės 32 (n + n’ + n“).

1 PASTABA. Raudonajam vynui, kuriame yra mažai SO₂, geriau naudoti mažesnės negu 0,025 M koncentracijos jodo tirpalą (pvz. 0,01 M). Tokiu atveju paskutinėje formulėje koeficientas 32 būtų keičiamas koeficientu 12,8.

2 PASTABA. Titruojant raudonąjį vyną, geriausia jį apšviesti iš apačios paprastos elektros lemputės geltonos spalvos spinduliu per kalio chromato tirpalą arba panaudoti lempą su natrio garais. Be to, analizę reikia atlikti tamsiame kambaryje ir stebėti vyno skaidrumą: vynas taps matinis, kai pasikeis krakmolo spalva.

3 PASTABA. Kai nustatytasis sieros dioksido kiekis yra artimas įstatymų leidžiamai ribai arba viršija ją, bendrojo sieros dioksido kiekio analizė atliekama pamatiniu metodu.

4 PASTABA. Jeigu nustatyti reikia labai tiksliai, mėginys palaikomas prieš tyrimą 2 dienas 20 °C temperatūroje apsaugotas nuo sąlyčio su oru; analizė atliekama toje pačioje temperatūroje.

5 PASTABA. Kai kurios medžiagos rūgštinėje terpėje oksiduojamos jodu, todėl, norint nustatyti tiksliau, reikia patikslinti suvartoto jodo kiekį. Tuo tikslu laisvasis sieros dioksidas prieš titravimą sujungiamas su acto arba propiono aldehidais, panaudojus jų perteklių. Į 50 g vyno, esančio 300 cm³ talpos kūgio kolboje, įpilama 5 cm³ acto aldehido tirpalo (7 g/dm³) arba 5 cm³ propiono aldehido (10 g/dm³), kolba užkemšama kamščiu ir laikoma 30 min. Įpilama dar 3 cm³ sulfato rūgšties (1:10) ir toks 0,025 M jodo tirpalo kiekis, kurio pakanka krakmolo spalvai pakeisti. Šis kiekis (cm³) pažymimas n“’. Jį reikia atimti iš n (laisvojo sieros dioksido kiekis) ir iš n+n’+n“(bendrojo sieros dioksido kiekis): n“’ paprastai yra nedidelis dydis (0,2-0,3 cm³ 0,025 M jodo). Jeigu į vyną dedama askorbo rūgšties, n“’ labai padidėja ir galima bent apytiksliai nustatyti šios medžiagos kiekį pagal n“’, turint omenyje, kad 1 cm³ 0,025 M jodo tirpalo oksiduoja 4,4 mg askorbo rūgšties. Matuojant n“’ galima taip pat nesunkiai aptikti vyną, į kurį buvo dėta daugiau kaip 20 mg/cm³ askorbo rūgšties, ir kuri nepavirto oksidacijos produktu;

25.4. Molekulinio sieros dioksido analizė:

25.4.1. Metodo esmė

Molekulinio sieros dioksido, H₂SO₃, procentinis kiekis laisvojo sieros dioksido kiekyje apskaičiuojamas pagal pH vertę, etilo alkoholio kiekį ir temperatūrą. Tam tikroje temperatūroje ir esant tam tikrai etilo alkoholio koncentracijai

H₂SO₃ ↔ H⁺+HSO₃¯,

H₂SO₃ = L/^10pH-pkM +1,                                                                                           (1)

L = [H₂SO₃]+[ HSO₃¯]; pk_M = pk_T - A√I/(I+B√I);

čia      I – joninė jėga; A ir B – koeficientai, kurie priklauso nuo temperatūros ir etilo alkoholio kiekio; k_T - termodinaminė disociacijos konstanta; pk_T – dydžio priklausomybė nuo temperatūros ir etilo alkoholio kiekio, pateikta 25.1 lentelėje; k_M - mišrioji disociacijos konstanta; vidutinio dydžio joninei jėgai 25.2 lentelėje pateikta dydžio pk_M priklausomybė nuo temperatūros ir etilo alkoholio kiekio. Molekulinio sieros dioksido kiekio, apskaičiuoto pagal (1) lygtį, priklausomybė nuo pH, temperatūros ir etilo alkoholio kiekio pateikta 25.3 lentelėje;

25.1 lentelė. Termodinaminės konstantos pk_T vertės

Etilo alkoholio kiekis, tūrio %	t, °C
	20	25	30	35	40
0	1,798	2,000	2,219	2,334	2,493
5	1,897	2,098	2,299	2,397	2,527
10	1,997	2,198	2,394	2,448	2,606
15	2,099	2,301	2,503	2,607	2,728
20	2,203	2,406	2,628	2,754	2,895

25.4.2. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška

Žinant vyno pH ir etilo alkoholio kiekį jame, 25.3 lentelėje galima surasti molekulinio sieros dioksido kiekį X,%, temperatūroje t, ºC. Molekulinio sieros dioksido kiekis, mg/dm³, bus X·C; čia C – laisvojo sieros dioksido kiekis, mg/dm³;

25.2 lentelė. Mišriosios konstantos pk_T vertės

Etilo alkoholio kiekis, tūrio %	t, °C
	20	25	30	35	40
0	1,723	1,925	2,143	2,257	2,416
5	1,819	2,020	2,220	2,317	2,446
10	1,916	2,116	2,311	2,405	2,522
15	2,014	2,216	2,417	2,520	2,640
20	2,114	2,317	2,538	2,663	2,803

25.3 lentelė. Laisvojo sieros dioksido sudėtyje esančio molekulinio sieros dioksido kiekio, %, priklausomybė (I = 0,038) nuo pH, t, °C, ir etilo alkoholio kiekio

PH	Etilo alkoholio kiekis, tūrio %
	0	5	10	15	20
t = 20 ^0C
2,8	7,73	9,46	11,55	14,07	17,09
2,9	6,24	7,66	9,40	11,51	14,07
3,0	5,02	6,18	7,61	9,36	11,51
3,1	4,03	4,98	6,14	7,58	9,36
3,2	3,22	3,99	4,94	6,12	7,58
3,3	2,58	3,20	3,98	4,92	6,12
3,4	2,06	2,56	3,18	3,95	4,92
3,5	1,64	2,04	2,54	3,16	3,95
3,6	1,31	1,63	2,03	2,53	3,16
3,7	1,04	1,30	1,62	2,02	2,53
3,8	0,83	1,03	1,29	1,61	2,02
t = 25 °C
2,8	11,47	14,23	17,15	20,67	24,75
2,9	9,58	11,65	14,12	17,15	22,71
3,0	7,76	9,48	11,55	14,12	17,18
3,1	6,27	7,68	9,40	11,55	14,15
3,2	5,04	6,20	7,61	9,40	11,58
3,3	4,05	4,99	6,14	7,61	9,42
3,4	3,24	4,00	4,94	6,14	7,63
3,5	2,60	3,20	3,97	4,94	6,16
3,6	2,07	2,56	3,18	3,97	4,55
3,7	1,65	2,05	2,54	3,18	3,98
3,8	1,32	1,63	2,03	2,54	3,18
t = 30 °C
2,8	18,05	20,83	24,49	29,28	35,36
2,9	14,89	17,28	20,48	24,75	30,29
3,0	12,20	14,23	16,98	20,71	35,66
3,1	9,94	11,65	13,98	17,18	21,52
3,2	8,06	9,48	11,44	14,15	17,88
3,3	6,51	7,68	9,30	11,58	14,75
3,4	5,24	6,20	7,53	9,42	12,08
3,5	4,21	4,99	6,08	7,63	9,84
3,6	3,37	4,00	4,89	6,16	7,98
3,7	2,69	3,21	3,92	4,95	6,44
3,8	2,16	2,56	3,14	3,98	5,19
t = 35 °C
2,8	12,27	24,75	28,71	34,42	42,18
2,9	18,53	20,71	24,24	29,42	36,69
3,0	15,31	17,18	20,26	24,88	31,52
3,1	12,55	14,15	16,79	20,83	26,77
3,2	10,24	11,58	13,82	17,28	22,51
3,3	8,31	9,42	11,30	14,23	18,74
3,4	6,71	7,63	9,19	11,65	15,49
3,5	5,44	6,16	7,44	9,48	12,71
3,6	4,34	4,95	6,00	7,68	10,36
3,7	3,48	3,98	4,88	6,20	8,41
3,8	2,78	3,18	3,87	4,99	6,80
t = 40 °C
2,8	29,23	30,68	34,52	40,89	50,14
2,9	24,70	26,01	29,52	35,47	44,74
3,0	20,67	21,83	24,96	30,39	38,85
3,1	17,15	18,16	20,90	25,75	33,54
3,2	14,12	14,98	17,35	21,60	28,62
3,3	11,55	12,28	14,29	17,96	24,15
3,4	9,40	10,00	11,70	14,81	20,19
3,5	7,61	8,11	9,52	12,13	16,73
3,6	6,14	6,56	7,71	9,88	13,77
3,7	4,94	5,28	6,22	8,01	11,25
3,8	3,97	4,24	5,01	6,47	9,15

26. Natrio nustatymo metodai:

26.1. Metodų esmė:

26.1.1. Pamatinis metodas - atominė absorbcinė analizė: natris nustatomas tiesiogiai vyne atominės absorbcinės spektroskopijos būdu prieš tai į vyną įdėjus jonizacijos slopinimo reagento (cezio chlorido), kuris neleidžia natriui jonizuotis;

26.1.2. Įprastinis metodas - liepsnos fotometrija: natris nustatomas tiesiogiai praskiestame vyne (mažiausiai 1:10) liepsnos fotometrijos būdu;

26.2. Pamatinis metodas:

26.2.1. Reagentai:

26.2.1.1. Tirpalas, kurio 1 dm³ yra 1 g natrio. Vartojamas prekinis etaloninis komercinis tirpalas, kurio 1 dm³ yra 1 g natrio. Šis tirpalas ruošiamas taip: 1 dm³ talpos matavimo kolboje distiliuotame vandenyje ištirpinama 2,542 g bevandenio natrio chlorido, NaCl, ir praskiedžiama vandeniu iki brūkšnio. Tirpalas turi būti laikomas polietileno butelyje;

26.2.1.2. Modelinis tirpalas:

citrinų rūgštis (C₆H₈O₇´H₂O)                                3,5 g

sacharozė (C₁₂H₂₂O₁₁)                                            1,5 g

glicerolis (C₃H₈O₃)                                                 5,0 g

bevandenis kalcio chloridas (CaCl₂)                       50 mg

bevandenis magnio chloridas (MgCl₂)                   50 mg

absoliutusis alkoholis (C₂H₅OH)                            50 cm³

dejonizuotas vanduo                                              iki 500 cm³

26.2.1.3. Cezio chlorido tirpalas, kuriame yra 5 % cezio: ištirpinama 6,330 cezio chlorido, CsCl, 100 cm³ distiliuoto vandens;

26.2.2. Įranga ir priemonės

Atominės absorbcijos spektroskopas su oro ir acetileno degikliu; natrio tuščiavidurio katodo lempa;

26.2.3. Analizė:

26.2.3.1. Mėginio paruošimas

Į 50 cm³ talpos matavimo kolbą pipete įlašinama 2,5 cm³ vyno, įpilama 1 cm³ cezio chlorido tirpalo (26.2.1.3.) ir iki brūkšnio praskiedžiama distiliuotu vandeniu;

26.2.3.2. Kalibravimas

Į 100 cm³ talpos matavimo kolbas įpilama 5,0 cm³ modelinio tirpalo ir atitinkamai 0, 2,5, 5,0, 7,5 ir 10 cm³ 1 g/dm³ natrio tirpalo (26.2.1.1 p.), iš anksto praskiesto santykiu 1:100. Į kolbas taip pat įpilama po 2 cm³ cezio chlorido tirpalo (26.2.1.3p.) ir praskiedžiama distiliuotu vandeniu iki brūkšnio. Taip paruoštų etaloninių tirpalų 1 dm³ yra atitinkamai 0, 0,25, 0,50, 0,75 ir 1,00 mg natrio bei 1 g cezio. Šie tirpalai turi būti laikomi polietileno buteliuose;

26.2.3.3. Matavimas

Nustatomas bangos ilgis – 589,0 nm. Naudojant modelinį tirpalą, kurio 1 dm³ yra 1 g cezio (26.2.3.1 p.), randamas nulinis taškas absorbcijos skalėje. Tiesiogiai į spektrofotometro degiklį įpurškiamas skiestas vynas, paskui etaloninis tirpalas (26.2.3.2 p.). Užrašomos absorbcijos vertės. Kiekvienas matavimas pakartojamas;

26.2.4. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška:

26.2.4.1. Apskaičiavimas

Nubraižoma absorbcijos verčių priklausomybės nuo natrio koncentracijos etaloniniuose tirpaluose kreivė. Iš jos randama natrio koncentracija C vyne. Natrio koncentracija, mg/dm³ vyno, bus 20 C; užrašoma sveikojo skaičiaus tikslumu;

26.2.4.2. Pakartojamumas

r = 1+0,024´x_i mg/dm³; čia x_i = Na koncentracija mėginyje, mg/dm³;

26.2.4.3. Atkuriamumas

R = 2,5+0,05´x_i mg/dm³; čia x_i = Na koncentracija mėginyje, mg/dm³;

26.3. Įprastinis metodas:

26.3.1. Reagentai:

26.3.1.1. Etaloninis tirpalas, kurio 1 dm³ yra 20 mg natrio:

absoliutusis alkoholis (C₂H₅OH)                                    10 cm³

citrinų rūgštis (C₆H₈O₇´H₂O)                                        700 mg

sacharozė (C₁₂H₂₂O₁₁)                                                    300 mg

glicerolis (C₃H₈O₃)                                                         1000 mg

rūgštusis kalio tartratas (sausasis) (C₄H₅KO₆)               481,3 mg

bevandenis kalcio chloridas (CaCl₂)                              10 mg

bevandenis magnio chloridas (MgCl₂)                           10 mg

sausasis natrio chloridas (NaCl)                                     50,84 mg

vanduo                                                                           iki 1 dm³

26.3.1.2. Tirpalas praskiesti

absoliutusis alkoholis (C₂H₅OH)                                    10 cm³

citrinų rūgštis (C₆H₈O₇´H₂O)                                        700 mg

sacharozė (C₁₂H₂₂O₁₁)                                                    300 mg

glicerolis (C₃H₈O₃)                                                         1000 mg

rūgštusis kalio tartratas (sausasis) (C₄H₅KO₆)               481,3 mg

bevandenis kalcio chloridas (CaCl₂)                              10 mg

bevandenis magnio chloridas (MgCl₂)                           10 mg

vandens                                                                          iki 1 dm³

Norint paruošti 26.3.1.1 ir 26.3.1.2 p. nurodytus tirpalus, 1 dm³ talpos matavimo kolboje ištirpinamas rūgštusis kalio tartratas maždaug 500 cm³ labai karšto distiliuoto vandens, šis tirpalas sumaišomas su 400 cm³ distiliuoto vandens, kuriame buvo ištirpinti kiti chemikalai, ir praskiedžiama vandeniu iki brūkšnio. Tirpalai turi būti laikomi polietileno buteliuose. Prieš tai įlašinama po 2 lašus alilizotiocianato;

26.3.2. Įranga ir priemonės

Liepsnos fotometras su oro ir butano mišiniu;

26.3.3. Analizė:

26.3.3.1. Kalibravimas

Į 100 cm³ talpos matavimo kolbas įpilama 5, 10, 15, 20 ir 25 cm³ etaloninio tirpalo (26.3.1.1 p.) ir praskiedžiama tirpalu (26.3.1.2 p.) iki brūkšnio. Tokiu būdu gaunami tirpalai, kurių 1 dm³ yra atitinkamai 1, 2, 3, 4 ir 5 mg natrio;

26.3.3.2. Matavimas

Matuojama, kai bangos ilgis yra 589,0 nm. Naudojant distiliuotą vandenį nustatomas 100 % skaidrumas. Tiesiogiai į fotometro degiklį įpurškiami etaloniniai tirpalai (26.3.3.1 p.), paskui vynas, praskiestas distiliuotu vandeniu santykiu 1:10, ir užrašomas procentais reiškiamos skaidrumo vertės. Jei reikia, jau skiestą santykiu 1:10 vyną galima toliau skiesti tam skirtu tirpalu (26.3.1.2 p.);

26.3.4. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška:

26.3.4.1. Apskaičiavimas

Nubraižoma skaidrumo verčių priklausomybės nuo natrio koncentracijos etaloniniuose tirpaluose kreivė. Užsirašoma iš šios kreivės gaut praskiesto vyno mėginio skaidrumo vertė ir nustatoma natrio koncentracija C. Natrio koncentracija, mg/dm³, apskaičiuojama pagal formulę F × C; čia F yra praskiedimo koeficientas.

26.3.4.2. Pakartojamumas

r = 1,4 mg/dm³ (išskyrus likerinį vyną); r = 2,0 mg/dm³ likeriniam vynui;

26.3.4.3. Atkuriamumas

R = 4,7+0,08´x_i mg/dm³; čia x_i = natrio koncentracija mėginyje, mg/dm³.

27. Kalio nustatymo metodai

27.1. Metodų esmė:

27.1.1. Pamatinis metodas: kalis yra nustatomas tiesiogiai praskiestame, naudojant atominę absorbcinę analizę, prieš tai į vyną įdėjus jonizacijos slopinimo reagento (cezio chlorido), kuris neleidžia kaliui jonizuotis;

27.1.2. Įprastinis metodas: kalis nustatomas tiesiogiai praskiestame vyne, naudojant liepsnos fotometriją;

27.2. Pamatinis metodas:

27.2.1. Reagentai:

27.2.1.1. Tirpalas, kuriame yra 1 g/dm³ kalio. Vartojamas prekinis etaloninis tirpalas, kuriame yra 1 g/dm³ kalio. Šis tirpalas ruošiamas taip: distiliuotame vandenyje ištirpinama 4,813 g kalio rūgščiojo tartrato (C₄H₅KO₆) ir praskiedžiama iki 1 dm³ distiliuotu vandeniu;

27.2.1.2. Modelinis tirpalas:

citrinų rūgštis (C₆H₈O₇´H₂O)                                   3,5 g

sacharozė (C₁₂H₂₂O₁₁)                                               1,5 g

glicerolis (C₃H₈O₃)                                                    5,0 g

bevandenis kalcio chloridas (CaCl₂)                         50 mg

bevandenis magnio chloridas (MgCl₂)                      50 mg

absoliutusis alkoholis (C₂H₅OH)                               50 cm³

vanduo                                                                      iki 500 cm³

27.2.1.3. Cezio chlorido tirpalas, kuriame yra 5 % cezio: ištirpinama 6,33 cezio chlorido (CsCl) 100 cm³ distiliuoto vandens;

27.2.2. Įranga ir priemonės

Atominės absorbcijos spektroskopas su oro ir acetileno degikliu; kalio tuščiavidurio katodo lempa;

27.2.3. Analizė:

27.2.3.1. Mėginio paruošimas

Į 50 cm³ talpos matavimo kolbą pipete įlašinama 2,5 cm³ vyno, iš anksto praskiesto santykiu 1:10, 1 cm³ cezio chlorido tirpalo (27.2.1.3 p.) ir iki brūkšnio praskiedžiama distiliuotu vandeniu;

27.2.3.2. Kalibravimas

Į 100 cm³ talpos matavimo kolbas įpilama 5,0 cm³ modelinio tirpalo (27.2.1.2 p.) ir atitinkamai 0, 2,0, 4,0, 6,0 ir 8,0 cm³ 1 g/dm³ kalio tirpalo (27.2.1.1 p.), (iš anksto praskiesto santykiu 1:10). Į kolbas taip pat įpilama po 2 cm³ cezio chlorido tirpalo (27.2.1.3 p.) ir iki 100 cm³ praskiedžiama distiliuotu vandeniu. Taip paruoštuose etaloniniuose tirpaluose yra atitinkamai 0, 2, 4, 6 ir 8 mg/dm³ kalio bei 1 g/dm³ cezio. Šie tirpalai turi būti laikomi polietileno buteliuose;

27.2.3.3. Matavimas

Nustatomas bangos ilgis – 769,9 nm ir nulinė absorbcijos vertė pagal modelinį tirpalą, kuriame yra 1 g/dm³ cezio (27.2.3.1p.). Tiesiogiai į spektrofotometro degiklį įpurškiamas praskiestas vynas (27.2.3.1 p.), paskui etaloniniai tirpalai (27.2.3.2 p.). Užrašomos absorbcijos vertės. Kiekvienas matavimas pakartojamas;

27.2.4. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška:

27.2.4.1. Apskaičiavimas

Nubraižoma absorbcijos verčių priklausomybės nuo kalio koncentracijos etaloniniuose tirpaluose kreivė. Užrašoma šio skiesto vyno mėginio absorbcijos vidutinė vertė, suapvalinta iki sveiko jo skaičiaus, ir paskaičiuojama kalio koncentracija C, mg/dm³. Kalio koncentracija, mg/dm³, vyne apskaičiuojama pagal formulę F´C; čia F yra praskiedimo koeficientas (šiuo atveju 200). Užrašoma suapvalinta iki sveikojo skaičiaus;

27.2.4.2. Pakartojamumas

r = 35 mg/dm³;

27.2.4.3. Atkuriamumas

R = 66 mg/dm³;

27.2.4.4. Kiti rezultatų užrašymo būdai: miliekvivalentais litre, mekv/dm³: 0,0256´F´C; kalio rūgščiojo tartrato mg/dm³: 4,813´F´C;

27.3. Įprastinis metodas – liepsnos fotometrija:

27.3.1. Reagentai:

27.3.1.1. Etaloninis tirpalas, kuriame yra 100 mg/dm³ kalio:

absoliutusis alkoholis (C₂H₅OH)                                    10 cm³

citrinų rūgštis (C₆H₈O₇´H₂O)                                        700 mg

sacharozė (C₁₂H₂₂O₁₁)                                                    300 mg

glicerolis (C₃H₈O₃)                                                         1000 mg

natrio chloridas (NaCl)                                                  50,8 mg

bevandenis kalcio chloridas (CaCl₂)                              10 mg

bevandenis magnio chloridas (MgCl₂)                           10 mg

kalio rūgštusis tartratas (sausasis) (C₄H₅KO₆)               481,3 mg

vandens                                                                          iki 1 dm³

Kalio rūgštusis tartratas ištirpinamas maždaug 500 cm³ labai karšto distiliuoto vandens. Šis tirpalas sumaišomas su 400 cm³ distiliuoto vandens, kuriame buvo ištirpinti kiti chemikalai, ir pripilama iki 1 dm³ vandens.

27.3.1.2. Tirpalas praskiesti:

absoliutusis alkoholis (C₂H₅OH)                                        10 cm³

citrinų rūgštis (C₆H₈O₇´H₂O)                                             700 mg

sacharozė (C₁₂H₂₂O₁₁)                                                         300 mg

glicerolis (C₃H₈O₃)                                                              1000 mg

natrio chloridas (NaCl)                                                       50,8 mg

bevandenis kalcio chloridas (CaCl₂)                                   10 mg

bevandenis magnio chloridas (MgCl₂)                                10 mg

vyno rūgštis (C₄H₆O₆)                                                        383 mg

vandens                                                                               iki 1 dm³

Tirpalai turi būti laikomi polietileno buteliuose. Prieš tai įlašinama po 2 lašus alilizotiocianato;

27.3.2. Įranga ir priemonės

Liepsnos fotometras su oro ir butano mišiniu;

27.3.3. Analizė:

27.3.3.1. Kalibravimas

Į 100 cm³ talpos matavimo kolbas įpilama 25, 50, 75 ir 100 cm³ taloninio tirpalo (27.3.1.1 p.) ir iki 100 cm³ praskiedžiama tirpalu (27.3.1.2 p.). Taip gaunami tirpalai, kuriuose yra atitinkamai 25, 50, 75 ir 100 mg/dm³ kalio;

27.3.3.2. Matavimas

Matuojama, kai bangos ilgis yra 766 nm. Naudojant distiliuotą vandenį nustatomas 100 % skaidrumas. Tiesiogiai į fotometro degiklį įpurškiami etaloniniai tirpalai (27.3.3.1 p.), paskui vynas, praskiestas distiliuotu vandeniu santykiu 1:10, ir užsirašomas procentais reiškiamos skaidrumo vertės. Jei reikia, jau praskiestą santykiu 1:10 vyną galima toliau skiesti tam skirtu tirpalu (27.3.1.2 p.);

27.3.4. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška:

27.3.4.1. Apskaičiavimas

Nubraižoma procentinės skaidrumo vertės priklausomybės nuo kalio koncentracijos etaloniniuose tirpaluose kreivė. Užsirašoma iš šios kreivės gauta praskiesto vyno mėginio skaidrumo vertė ir nustatoma kalio koncentracija C. Kalio koncentracija, mg/dm³, apskaičiuojama pagal formulę F´C; čia F yra praskiedimo koeficientas. Užrašoma suapvalinta iki sveikojo skaičiaus;

27.3.4.2. Pakartojamumas

r = 17 mg/dm³;

27.3.4.3. Atkuriamumas

R = 66 mg/dm³;

27.3.4.4. Kiti rezultatų užrašymo būdai: miliekvivalentais litre, mekv/dm³: 0,0256´F´C; kalio rūgščiojo tartrato, mg/ dm³: 4,813´F´C.

28. Magnio nustatymo metodas

28.1. Metodo esmė

Magnis nustatomas tiesiogiai praskiestame vyne, naudojant atominės absorbcijos analizę;

28.2. Reagentai:

28.2.1. Koncentruotas etaloninis tirpalas, kuriame yra 1 g/dm³ magnio. Vartojamas prekinis etaloninis magnio tirpalas (1 g/dm³). Šį tirpalą galima paruošti taip: ištirpinama distiliuotame vandenyje 8,3646 g magnio chlorido (MgCl₂´6H₂O) ir praskiedžiama iki 1 dm³;

28.2.2. Praskiestas etaloninis tirpalas, kuriame yra 5 mg/dm³ magnio. Etaloniniai magnio tirpalai turi būti laikomi polietileno buteliuose;

28.3. Įranga ir priemonės

Atominės absorbcijos spektroskopas su oro ir acetileno degikliu; magnio tuščiavidurio katodo lempa;

28.4. Analizė:

28.4.1. Mėginio paruošimas

Vynas praskiedžiamas distiliuotu vandeniu santykiu 1:100;

28.4.2. Kalibravimas

Į 100 cm³ talpos matavimo kolbas įpilama 5, 10, 15 ir 20 cm³ etaloninio magnio tirpalo (28.2.2 p.) ir iki 100 cm³ praskiedžiama distiliuotu vandeniu. Taip paruoštuose etaloniniuose tirpaluose bus atitinkamai 0,25, 0,50, 0,75 ir 1,0 mg/dm³ magnio. Šie tirpalai turi būti laikomi polietileno buteliuose;

28.4.3. Matavimas

Nustatomas bangos ilgis – 285 nm. Naudojant distiliuotą vandenį nustatoma absorbcijos nulinė vertė. Įpurškiamas skiestas vynas tiesiai į spektrofotometro degiklį, paskui – ir etaloniniai tirpalai (28.4.2 p.). Užrašomos absorbcijos vertės. Kiekvienas matavimas pakartojamas;

28.5. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška:

28.5.1. Apskaičiavimas

Nubraižoma absorbcijos vertės priklausomybės nuo magnio koncentracijos etaloniniuose tirpaluose kreivė. Iš šios kreivės nustatoma vidutinė skiesto vyno mėginio absorbcijos vertė ir apskaičiuojama magnio koncentracija C, mg/dm³. Magnio koncentracija, mg/dm³ vyno, apskaičiuojama pagal formulę 100´C ir užrašoma suapvalinta iki sveikojo skaičiaus;

28.5.2. Pakartojamumas

r = 3 mg/dm³;

28.5.3. Atkuriamumas

R = 8 mg/dm³.

29. Kalcio nustatymo metodas

29.1. Metodo esmė

Kalcis nustatomas tiesiogiai praskiestame vyne, naudojant atominės absorbcjos analizę, tačiau prieš tai į vyną dedama jonizaciją stabdančio reagento;

29.2. Reagentai:

29.2.1. Etaloninis tirpalas, kuriame yra 1 g/dm³ kalcio. Vartojamas prekinis etaloninis kalcio tirpalas (1 g/dm³). Šį tirpalą galima paruošti ištirpinus 2,5 g kalcio karbonato (CaCO₃) druskos rūgštyje (HCl), praskiestoje santykiu 1:10 (t/t). Druskos rūgšties imama tiek, kad kalcio karbonatas visiškai ištirptų, ir tada praskiedžiama distiliuotu vandeniu iki 1 dm³ tirpalo;

29.2.2. Praskiestas etaloninis tirpalas, kuriame yra 50 mg/dm³ kalcio. Etaloniniai kalcio tirpalai turi būti laikomi polietileno buteliuose;

29.2.3. Lantano chlorido tirpalas, kuriame yra 50 g/dm³ lantano. Ištirpinama 13,369 g lantano chlorido (LaCl₃´7H₂O) distiliuotame vandenyje. Įpilama 1 cm³ druskos rūgšties (HCl), praskiestos santykiu 1:10 (t/t), ir iki 100 cm³ pripilama distiliuoto vandens;

29.3. Įranga ir priemonės

Atominės absorbcijos spektroskopas su oro ir acetileno degikliu; kalcio tuščiavidurio katodo lempa;

29.4. Analizė:

29.4.1. Mėginio paruošimas

Į 20 cm³ talpos matavimo kolbą įpilama 1 cm³ vyno, 2 cm³ lantano chlorido tirpalo (29.2.3 p.) ir iki brūkšnio praskiedžiama distiliuotu vandeniu. Vyne, praskiestame santykiu 1:20, yra 5 g/dm³ lantano. Saldžiame vyne pakanka 5 g/dm³ lantano koncentracijos, jei skiedžiant cukraus kiekis netampa mažesnis kaip 2,5 g/dm³. Vyne, kuriame cukraus koncentracija yra didesnė, lantano koncentraciją reikia padidinti iki 10 g/dm³;

29.4.2. Kalibravimas

Į 100 cm³ talpos matavimo kolbas įpilama 0, 5, 10, 15 ir 20 cm³ praskiesto etaloninio kalcio tirpalo (29.2.2 p.), po 10 cm³ lantano chlorido tirpalo (29.2.3 p.) ir iki 100 cm³ praskiedžiama distiliuotu vandeniu. Taip paruoštuose etaloniniuose tirpaluose bus atitinkamai 0, 2,5, 5,0, 7,5 ir 10 mg/dm³ kalcio ir 5 g/dm³ lantano. Šie tirpalai turi būti laikomi polietileno buteliuose;

29.4.3. Matavimas

Nustatomas bangos ilgis – 422,7 nm. Naudojant tirpalą, kuriame yra 5 g/dm³ lantano (29.4.2 p.), nustatoma absorbcijos nulinė vertė. Įpurškiamas skiestas vynas tiesiai į spektrofotometro degiklį, paskui – ir 5 etaloniniai tirpalai (29.4.2 p.). Užrašomos absorbcijos vertės. Kiekvienas matavimas pakartojamas;

29.5. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška:

29.5.1. Apskaičiavimas

Nubraižoma absorbcijos vertės priklausomybės nuo kalcio koncentracijos etaloniniuose tirpaluose kreivė. Iš jos randama vidutinė praskiesto vyno mėginio absorbcijos vertė ir apskaičiuojama kalcio koncentracija C, mg/dm³. Kalcio koncentracija, mg/dm³ vyno, apskaičiuojama pagal formulę 20´C ir užrašoma suapvalinta iki sveikojo skaičiaus;

29.5.2 Pakartojamumas

Koncentracija < 60 mg/dm³: r = 2,7 mg/dm³; koncentracija > 60 mg/dm³: r = 4 mg/dm³;

29.5.3. Atkuriamumas

R = 0,114´x_i–0,5; čia x_i – koncentracija mėginyje, mg/dm³.

30. Geležis nustatymo metodai

30.1. Metodų esmė:

30.1.1. Pamatinis metodas: geležies kiekis nustatomas praskiestame vyne, iš kurio pašalintas etanolis, tiesiogiai atominės absorbcinės spektroskopijos būdu;

30.1.2. Įprastinis metodas: mineralizavus vyną vandenilio peroksidu, visa geležis paverčiama dvivalente ir nustatoma pagal susidariusią raudoną spalvą, prieš tai įdėjus ortofenantrolino;

30.2. Pamatinis metodas:

30.2.1. Įranga ir priemonės:

30.2.1.1. Rotorinis garintuvas su termostatuojama vandens vonia;

30.2.1.2. Atomo absorbcijos spektroskopas su degimo kamera, maitinama oru ir acetilenu;

30.2.1.3. Geležies katodo lempa;

30.2.2. Reagentai ir tirpalai:

30.2.2.1. Pagrindinis etaloninis tirpalas, kuriame yra 1 g/dm³ trivalentės geležies. Vartojamas prekinis etaloninis tirpalas, kuris gali būti ruošiamas taip: 1 dm³ talpos matavimo kolboje distiliuotame vandenyje, truputį parūgštintame 1 M druskos rūgšties tirpalu, ištirpinama 8,6341 g geležies amonio alūno, FeNH₄(SO₄)₂´12H2O, ir praskiedžiama iki 1 dm³;

30.2.2.2. Praskiestas iki 100 mg/dm³ pagrindinis etaloninis geležies tirpalas;

30.2.3. Analizė:

30.2.3.1. Mėginio paruošimas

Iš vyno pašalinamas etilo alkoholis: vyno mėginys išgarinamas sukamajame garintuve 50-60 ºC iki pusės tūrio. Išgarintas vynas praskiedžiamas distiliuotu vandeniu iki pradinio mėginio tūrio. Prireikus mėginys atskiedžiamas;

30.2.3.2. Kalibravimas

Į 100 cm³ talpos matavimo kolbas įpilama 1, 2, 3, 4 ir 5 cm³ praskiesto pagrindinio etaloninio tirpalo, kuriame yra 100 mg/dm³ geležies, ir praskiedžiama distiliuotu vandeniu iki brūkšnio. Gautuose etaloniniuose tirpaluose bus atitinkamai 1, 2, 3, 4 ir 5 mg/dm³ geležies. Tirpalai turi būti laikomi polietileno induose;

30.2.3.3. Analizė

Nustatomas 248,3 nm bangos ilgis. Naudojant distiliuotą vandenį nustatoma absorbcijos skalės nulinė vertė. Pirmiausia tiesiogiai į spektrofotometro degiklį įpurškiamas praskiestas vynas, tada paeiliui – pagal 30.2.3.2 p. aprašytą metodiką paruošti etaloniniai tirpalai. Išmatuojama absorbcija. Matavimai kartojami po du kartus;

30.2.4. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška

Nubrėžiama absorbcijos priklausomybės nuo geležies koncentracijos etaloniniuose tirpaluose kalibravimo kreivė. Joje pažymimas mėginio absorbcijos verčių vidurkis ir nustatoma geležies koncentracija C. Geležies koncentracija, išreikšta mg/dm³ vieno ženklo po kablelio tikslumu, bus C´F; čia F- praskiedimo koeficientas;

30.3. Įprastinis metodas:

30.3.1. Įranga ir priemonės

100 cm³ talpos Kjeldalio kolba; spektroskopas, kuriuo galima matuoti absorbciją, kai bangos ilgis yra 508 nm;

30.3.2. Reagentai ir tirpalai:

30.3.2.1. Vandenilio peroksido (30 g/dm³) tirpalas be geležies;

30.3.2.2. 1 M druskos rūgšties tirpalas be geležies;

30.3.2.3. Amonio hidroksido (ρ₂₀ = 0,92 g/cm³) tirpalas be geležies;

30.3.2.4. Pemza, apdorota verdančia druskos rūgštimi (1: 2) ir nuplauta distiliuotu vandeniu;

30.3.2.5. 2,5 % hidrochinono tirpalas, parūgštintas 1 cm³ sieros rūgšties 100 cm³ tirpalo. Šis tirpalas saugomas tamsiame inde šaldytuve ir gaminamas iš naujo, jei atsiranda menkiausias rudas atspalvis;

30.3.2.6. 20 % natrio sulfito tirpalas, paruoštas iš neutraliojo bevandenio sulfito;

30.3.2.7. 0,5 % ortofenantrolino tirpalas 96 tūrio % etilo alkoholyje;

30.3.2.8. 20 % amonio acetato tirpalas;

30.3.2.9. Pagrindinis etaloninis trivalentės geležies tirpalas (1g/dm³). Vartojamas prekinis etaloninis tirpalas, kuris gali būti ruošiamas taip: 8,6341 g geležies amonio alūno, FeNH₄(SO₄)₂´12H₂O, ištirpinama 100 cm³ 1 M druskos rūgšties tirpalo ir praskiedžiama iki 1 dm³ 1 M druskos rūgšties tirpalu;

30.3.2.10. Praskiestas pagrindinis etaloninis geležies tirpalas (100 mg/dm³);

30.3.3. Analizė:

30.3.3.1. Mineralizavimas

Tiriant vyną, kuriame yra iki 50 g/dm³ cukraus, į Kjeldalio kolbą įpilama 25 cm³ vyno, 10 cm³ vandenilio peroksido ir įdedami keli gabalėliai pemzos. Išgarinama iki 2-3 cm³. Po ataušinimo į gautą likutį įpilamas (nesušlapinant indo sienelių) toks amonio hidroksido kiekis, kurio reikia terpei pašarminti ir hidroksidams nusodinti. Po ataušinimo į šarminį skystį įpilamas toks 1 M druskos rūgšties tirpalo kiekis, kurio pakaktų hidroksidų nuosėdoms ištirpinti, ir gautas tirpalas perpilamas į 100 cm³ talpos matavimo kolbą. Kjeldalio kolba praskalaujama 1 M druskos rūgšties tirpalu, kuris perpilamas į tą pačią 100 cm³ talpos matavimo kolbą ir praskiedžiama iki brūkšnio tuo pačiu tirpalu.

Tiriant vyną (ir misą), kuriame yra 50-200 g/dm³ cukraus, analizei naudojamas 25 cm³ misos arba vyno mėginio ir 20 cm³ vandenilio peroksido tirpalas; jeigu cukraus kiekis juose didesnis kaip 200 g/dm³, misos ir vyno mėginiai skiedžiami santykiu 1:2 arba net 1:4. 25 cm³ skiesto mėginio naudojama 20 cm³ vandenilio peroksido. Toliau mėginiai ruošiami taip pat kaip ir vyno, kuriame yra iki 50 g/dm³ cukraus;

30.3.3.2. Palyginamasis tirpalas. Jis ruošiamas iš distiliuoto vandens pagal 30.3.3.1 p. aprašytą metodiką, naudojant tokį patį vandenilio peroksido kiekį kaip ir tiriamiesiems tirpalams;

30.3.3.3. Analizė

Į dvi 50 cm³ talpos matavimo kolbas supilama po 20 cm³ druskos rūgštimi parūgštintų mineralizuoto tiriamojo ir palyginamojo tirpalų. Įpilama po 2 cm³ hidrochinono, po 2 cm³ sulfito ir po 1 cm³ ortofenantrolino tirpalų. Palankioms Fe(III) virtimo Fe(II) sąlygoms sudaryti tirpalai palaikomi 15 min. Tada įpilama po 10 cm³ amonio acetato tirpalo ir praskiedžiama distiliuotu vandeniu iki 50 cm³. Naudojant palyginamąjį tirpalą nustatoma nulinė prietaiso skalės vertė ir išmatuojama tiriamojo tirpalo absorbcija, kai bangos ilgis yra 508 nm;

30.3.3.4. Kalibravimas

Į 50 cm³ talpos matavimo kolbas įpilama 0,5, 1, 1,5 ir 2 cm³ 100 mg/dm³ koncentracijos etaloninio geležies tirpalo ir 20 cm³ distiliuoto vandens. Toliau atliekama 30.3.3.3 p. aprašyta analizė. Išmatuojama etaloninių tirpalų, kuriuose yra atitinkamai 50, 100, 150 ir 200 mg geležies, absorbciją;

30.3.4. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška

Nubraižoma absorbcijos kitimo priklausomybės nuo geležies koncentracijos etaloniniuose tirpaluose kalibravimo kreivė. Joje pažymima tiriamojo tirpalo absorbcijos vertė. Iš šios kreivės nustatoma geležies koncentracija C 20 cm³ analizei paimto druskos rūgštimi parūgštinto mineralizuoto mėginio, kuris atitinka 5 cm³ tiriamojo mėginio. Geležies koncentracija, išreikšta mg/dm³ vieno ženklo po kablelio tikslumu, bus lygi 200´C. Jeigu vynas (arba misa) buvo praskiestas, tai geležies koncentracija bus lygi 200´C´F; čia F – praskiedimo koeficientas.

31. Vario nustatymo metodas

31.1. Metodo esmė

Naudojama atominės absorbcijos analizė;

31.2. Įranga ir priemonės:

31.2.1. Platinos lėkštelė;

31.2.2. Atominės absorbcijos spektroskopas;

31.2.3. Vario tuščiavidurio katodo lempa;

31.2.4. Dujų tiekimas: oras ir acetilenas arba azoto (I) oksidas ir acetilenas;

31.3. Reagentai:

31.3.1. Metališkasis varis;

31.3.2. Koncentruota 65 % azoto rūgštis (HNO₃), r₂₀ = 1,38 g/cm³;

31.3.3. Azoto rūgštis, praskiesta santykiu 1:2 (t/t);

31.3.4. Tirpalas, kuriame yra 1 g/dm³ vario. Vartojamas prekinis etaloninis vario tirpalas. Šį tirpalą galima paruošti taip: pasveriama 1,000 g metališkojo vario ir atsargiai supilama į 1000 cm³ talpos matavimo kolbą. Įpilamas pakankamas kiekis praskiestos santykiu 1:2 (t/t) azoto rūgšties (31.3.3 p.), kad ištirptų metalas, tada 10 cm³ koncentruotos azoto rūgšties (31.3.2 p.) ir iki brūkšnio pripilama bidistiliato;

31.3.5. Tirpalas, kuriame yra 100 mg/dm³ vario. Į 100 cm³ talpos matavimo kolbą įpilama 10 cm³ tirpalo, paruošto, kaip nurodyta 31.3.4 p., ir iki brūkšnio pripilama bidistiliato;

31.4. Analizė:

31.4.1. Mėginio paruošimas ir vario nustatymas

Jei reikia, tirpalas praskiedžiamas bidistiliatu;

31.4.2. Kalibravimas

Į 100 cm³ talpos matavimo kolbas pipete įpilama 0,5, 1 ir 2 cm³ tirpalo (31.3.5 p.) ir iki brūkšnio pripilama bidistiliato; taip paruoštame tirpale yra atitinkamai 0,5, 1 ir 2 mg/dm³ vario;

31.4.3. Matavimas

Išmatuojama absorbcija, kai bangos ilgis 324,8 nm. Bidistiliatu nustatoma nulinė vertė. Išmatuojamos etaloninių tirpalų, paruoštų, kaip nurodyta 31.4.2 p., absorbcijos vertės. Kiekvienas matavimas pakartojamas;

31.5. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška

Nubraižoma absorbcijos vertės priklausomybės nuo vario koncentracijos etaloniniuose tirpaluose kreivė. Pagal ją apskaičiuojama koncentracija C, mg/dm³. Jei F – praskiedimo koeficientas, vario koncentracija, mg/dm³, apskaičiuojama pagal formulę F´C. Rezultatas užrašomas dviejų skaičių po kablelio tikslumu.

1 PASTABA. Pagal naudojamo prietaiso jautrumą ir vario koncentraciją mėginyje pasirenkami tirpalai kalibravimo kreivei braižyti ir praskiedžiami.

2 PASTABA. Jei numanoma, kad mėginyje vario koncentracija labai nedidelė, atliekama tokia procedūra: į platinos lėkštelę įpilama 100 cm³ mėginio ir garinama ant verdančio vandens vonios, kol mėginys tampa panašus į sirupą; įlašinama 2,5 cm³ koncentruotos azoto rūgšties (31.3.2 p.), kad lėkštelės dugnas būtų visiškai padengtas; nuosėdos atsargiai sudeginamos ant elektrinės viryklės ar ant nedidelės ugnies; tada lėkštelė su pelenais dedama į mufelinę krosnį, kurios temperatūra 500±25 ^oC, ir paliekama maždaug 1 h; atvėsinti pelenai sudrėkinami 1 cm³ koncentruotos azoto rūgšties (31.3.2 p.) ir tuo pat metu sugrūdami stikliniu grūstuvėliu; mišinys išgarinamas ir vėl sudeginamas pagal aukščiau aprašytą procedūrą; lėkštelė su pelenais įdedama 15 min į mufelinę krosnį. Procedūra su azoto rūgštimi kartojama mažiausiai 3 kartus. Lėkštelėje esantys pelenai praskiedžiami 1 cm³ koncentruotos azoto rūgšties (31.3.2 p.) ir 2 cm³ bidistiliato. Viskas perpilama į 10 cm³ kolbą. Lėkštelė tris kartus perplaunama 2 cm³ bidistiliato ir galiausiai į kolbą jo pripilama iki brūkšnio.

32. Kadmio nustatymo metodas

32.1. Metodo esmė

Kadmis nustatomas tiesiogiai vyne, naudojant beliepsnės atominės absorbcijos analizę;

32.2. Įranga ir priemonės:

PASTABA. Visos stiklinės detalės prieš naudojimą turi būti plaunamos koncentruotoje azoto rūgštyje, kuri pašildoma iki 70-80 ^oC temperatūros, ir skalaujamos bidistiliate;

32.2.1. Atominės absorbcijos spektroskopas su grafito krosnele, fono koregavimo įtaisu ir multipotenciometru;

32.2.2. Kadmio tuščiavidurio katodo lempa;

32.2.3. 5m mikropipetės su specialiais galiukais atominei absorbcijai matuoti;

32.3. Reagentai:

PASTABA. Vartojamas bidistiliatas, gautas distiliavimo aparate iš borosilikatinio stiklo, arba atitinkamo grynumo vanduo. Visi reagentai turi būti analizinio grynumo ir be kadmio priemaišų.

32.3.1. 85 % fosforo rūgštis (r₂₀ = 1,71 g/cm³);

32.3.2. Fosforo rūgšties tirpalas, gautas atskiedus 8 cm³ fosforo rūgšties 92 cm³ vandens;

32.3.3. 0,02 M etilendinitriltetraacto rūgšties natrio druskos (EDTR) tirpalas;

32.3.4. Buferinis tirpalas, kurio pH 9: 100 cm³ talpos matavimo kolboje keliuose kubiniuose centimetruose vandens ištirpinama 5,4 g amonio chlorido, įpilama 35 cm³ amoniako tirpalo (r₂₀ = 0,92 g/cm³), praskiesto iki 25 % (t/t), ir iki 100 cm³ pripilama vandens;

32.3.5. Eriochromo juodasis T: 1 % (m/m) mišinys su natrio chloridu;

32.3.6. Kadmio sulfatas, CdSO₄´8H₂O. Kadmio sulfato titrą būtina patikrinti taip: 102,6 mg kadmio sulfato supilama į stiklinę, kurioje yra truputis vandens. Maišoma, kol druska ištirpsta. Įpilama 5 cm³ buferinio tirpalo (pH 9) ir maždaug 20 mg eriochromo juodojo T. Titruojama EDTR tirpalu, kol indikatorius pradeda mėlynuoti. Turi būti įpilta lygiai 20 cm³ EDTR. Jei šis kiekis truputį kitoks, reikia atitinkamai pakeisti pasverto kadmio sulfato, kuris naudojamas etaloniniam tirpalui ruošti, kiekį;

32.3.7. Kadmio etaloninis tirpalas, kuriame yra 1 g /dm³ kadmio. Vartojamas prekinis etaloninis tirpalas. Jį galima pasigaminti taip: vandenyje ištirpinama 2,2820 g kadmio sulfato ir iki 1 dm³ pripilama vandens. Tirpalas turi būti laikomas butelyje iš borosilikatinio stiklo su matinio stiklo kamščiu;

32.4. Analizė:

32.4.1. Mėginio paruošimas

Vynas praskiedžiamas fosforo rūgšties tirpalu santykiu 1:2 (t/t);

32.4.2. Tirpalų paruošimas kalibravimo kreivei

Tirpalai nuosekliai praskiedžiami kadmio etaloniniu tirpalu taip, kad juose būtų atitinkamai 2, 5, 5, 10 ir 15 mg/dm³ kadmio;

32.4.3. Matavimas:

34.4.3.1. Krosnies programavimas (pavyzdys):

džiovinimas 100 ^oC temperatūroje 30 s;

mineralizavimas 900 ^oC temperatūroje 20 s;

atomizavimas 2 250 ^oC temperatūroje 2-3 s;

azoto srautas (plovimo dujos): 6 dm³/ min.

PASTABA. Procedūros pabaigoje temperatūrą reikia padidinti iki 2 700 ^oC, kad išsivalytų krosnis;

34.4.3.2. Atominės absorbcijos matavimas

Absorbcija matuojama, kai bangos ilgis 228,8 nm. Pagal bidistiliatą absorbcijos skalėje nustatoma nulinė vertė. Mikropipete į degiklį įlašinama trys kiekvieno etaloninio kalibravimo tirpalo bei analizuojamojo mėginio 5 ml porcijos. Užrašomos absorbcijos vertės. Pagal 3 matavimų rezultatus apskaičiuojama vidutinė absorbcijos vertė;

32.5. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška

Nubraižoma absorbcijos vertė priklausomybės nuo kadmio koncentracijos etaloniniuose tirpaluose kreivė, kuri turi būti tiesi linija. Iš nustatytos vidutinės mėginio absorbcijos vertės, kalibravimo kreivėje randama kadmio koncentracija C. Kadmio koncentracija, mg/dm³, vyne yra 2´C.

33. Sidabro nustatymo metodas

33.1. Metodo esmė

Atliekama sudeginto mėginio atominės absorbcijos analizė;

33.2. Įranga ir priemonės:

33.2.1. Platinos lėkštelė;

33.2.2. Vandens vonia su termostatu temperatūrai reguliuoti iki 100 ^oC;

33.2.3. Krosnis, kurioje temperatūra reguliuojama nuo 500 iki 525 ^oC;

33.2.4. Atominės absorbcijos spektroskopas;

33.2.5. Sidabro tuščiavidurio katodo lempa;

33.2.6. Dujos: oras ir acetilenas;

33.3. Reagentai:

33.3.1. Sidabro nitratas, AgNO_3;

33.3.2. 65 % koncentruota azoto rūgštis (HNO₃₎, r₂₀ = 1,38 g/cm³;

33.3.3. Praskiesta azoto rūgštis, 1:10 (t/t);

33.3.4. Tirpalas, kuriame yra 1 g/dm³ sidabro. Vartojamas prekinis etaloninis sidabro tirpalas. Šį tirpalą galima paruošti taip: 1,575 g sidabro nitrato ištirpinama praskiestoje azoto rūgštyje ir iki 1000 cm³ pripilama tos pačios praskiestos azoto rūgšties (33.3.3 p.);

33.3.5. Tirpalas, kuriame yra 10 mg/dm³ sidabro. 10 cm³ tirpalo, paruošto, kaip aprašyta 33.3.4 p., praskiedžiama iki 1000 cm³ praskiesta azoto rūgštimi;

33.4. Analizė:

33.4.1. Mėginio paruošimas

Į platinos lėkštelę įpilama 20 cm³ mėginio ir išgarinama ant verdančio vandens vonios. Likutis sudeginamas 500-525 ^oC temperatūros krosnyje. Balti pelenai sudrėkinami 1 cm³ koncentruotos azoto rūgšties (33.3.2 p.). Vėl garinama ant verdančio vandens vonios. Dar kartą įpilama 1 cm³ azoto rūgšties (33.3.2 p.) ir išgarinama. Įpilama 5 cm³ praskiestos azoto rūgšties (33.3.3 p.) ir lengvai pakaitinama, kol viskas ištirpsta;

33.4.2. Kalibravimas

Į 100 cm³ talpos matavimo kolbas įpilama atitinkamai 2, 4, 6, 8, 10 ir 20 cm³ tirpalo (33.3.5 p.) ir iki brūkšnio pripilama praskiestos azoto rūgšties (33.3.3 p.): tokiuose tirpaluose yra atitinkamai 0,20, 0,40, 0,60, 0,80, 1,0 ir 2,0 mg/dm³ sidabro;

33.4.3. Matavimas

Bangos ilgis nustatomas 328,1 nm. Pagal bidistiliatą nustatoma nulinė vertė. Paeiliui išmatuojama kiekvieno etaloninio tirpalo, paruošto, kaip aprašyta 33.4.2 p., absorbcijos vertė. Matuojama po 2 kartus;

33.5. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška

Nubraižoma absorbcijos vertės priklausomybės nuo sidabro koncentracijos etaloniniuose tirpaluose kreivė. Iš jos randama mėginio absorbcijos vertė ir nustatoma koncentracija C, mg/dm³. Sidabro koncentracija, mg/dm³, vyne yra 0,25´C. Ji užrašoma dviejų skaičių po kablelio tikslumu.

PASTABA. Kalibravimo kreivei braižyti reikia pasirinkti tokias tirpalų koncentracijas, mėginio kiekį ir galutinį skysčio kiekį, kurie atitiktų naudojamo aparato jautrumą.

34. Cinko nustatymo metodas

34.1. Metodo esmė

Pašalinus alkoholį, cinkas nustatomas tiesiogiai vyne, naudojant atominės absorbcijos analizę;

34.2. Reagentai:

PASTABA. Vanduo du kartus distiliuojamas aparate, pagaminama iš borosilikatinio stiklo, arba vartojamas panašaus grynumo vanduo;

34.2.1. Etaloninis tirpalas, kuriame yra 1 g/dm³ cinko. Vartojamas prekinis etaloninis cinko tirpalas. Šį tirpalą galima paruošti taip: vandenyje ištirpinama 4,3975 g cinko sulfato, ZnSO₄´7H₂O, ir iki 1 dm³ pripilama vandens;

34.2.2. Praskiestas etaloninis tirpalas, kuriame yra 100 mg/dm³ cinko;

34.3. Įranga ir priemonės:

34.3.1. Rotorinis garintuvas su termostatu reguliuojama vandens vonia;

34.3.2. Atominės absorbcijos spektroskopas su oro ir acetileno degikliu;

34.3.3. Cinko tuščiavidurio katodo lempa;

34.4. Analizė:

34.4.1. Mėginio paruošimas

Rotoriniame garintuve 50-60 ^oC iš 100 cm³ vyno pašalinamas alkoholis ir sumažinamas mėginio tūris du kartus. Iki 100 cm³ pripilama bidistiliato;

34.4.2. Kalibravimas

Į 100 cm³ talpos matavimo kolbas įpilama atitinkamai 0,5, 1, 1,5 ir 2 cm³ tirpalo, kuriame yra 100 mg/dm³ cinko (34.2.2 p.) ir iki brūkšnio praskiedžiama bidistiliatu. Taip paruoštuose tirpaluose yra atitinkamai 0,5, 1, 1,5 ir 2 mg/dm³ cinko;

34.4.3. Matavimas

Bangos ilgis nustatomas 213,9 nm. Pagal bidistiliatą absorbcijos skalėje nustatoma nulinė vertė. Tiesiogiai į spektrofotometro degiklį įpurškiamas vynas ir paeiliui etaloniniai tirpalai. Užrašomos absorbcijos vertės. Kiekvienas matavimas pakartojamas;

34.5. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška

Nubraižoma absorbcijos vertės priklausomybės nuo cinko koncentracijos etaloniniuose tirpaluose kreivė. Joje pažymima vidutinė absorbcijos vertė, kuri atitinka praskiestą vyno mėginį, ir užrašoma cinko koncentracija vieno skaičiaus po kablelio tikslumu.

35. Švino nustatymo metodas

35.1. Metodo esmė

Švinas nustatomas tiesiogiai vyne, naudojant beliepsnės atominės absorbcijos analizę;

35.2. Įranga ir priemonės:

PASTABA. Visos stiklinės detalės prieš naudojimą turi būti plaunamos koncentruotoje azoto rūgštyje, kuri pašildoma iki 70-80 ^oC temperatūros, ir skalaujamos bidistiliate;

35.2.1. Atominės absorbcijos spektroskopas su grafito krosnele, fono absorbcijos koregavimo įtaisu ir multipotenciometru;

35.2.2. Švino tuščiavidurio katodo lempa;

35.2.3. 5m mikropipetės su specialiais galiukais atominei absorbcijai matuoti;

35.3. Reagentai:

PASTABA. Visi reagentai turi būti analizinio grynumo, ypač be švino priemaišų. Vartojamas bidistiliatas, gautas distiliavimo aparate iš borosilikatinio stiklo, arba atitinkamo grynumo vanduo.

35.3.1. 85 % fosforo rūgštis (r₂₀ = 1,71 g/cm³);

35.3.2. Fosforo rūgšties tirpalas, gautas atskiedus 8 cm³ fosforo rūgšties 92 cm³ vandens;

35.3.3. Azoto rūgštis (r₂₀ = 1,38 g/cm³);

35.3.4. Švino tirpalas, kuriame yra 1 g/dm³ švino. Vartojamas prekinis etaloninis tirpalas. Šį tirpalą galima paruošti taip: praskiestoje 1 % (t/t) azoto rūgštyje ištirpinama 1,600 g švino nitrato, Pb(NO₃)₂, ir iki 1 dm³ pripilama tos pačios azoto rūgšties. Tirpalas turi būti laikomas borosilikatinio stiklo butelyje su matinio stiklo kamščiu;

35.4. Analizė:

35.4.1. Mėginio paruošimas

Vynas praskiedžiamas fosforo rūgšties tirpalu santykiu 1:2 ar 1:3, atsižvelgiant į numatomą švino koncentraciją;

35.4.2. Tirpalų paruošimas kalibravimo kreivei

Naudojant švino etaloninį tirpalą ir jį nuosekliai skiedžiant bidistiliatu, paruošiami tirpalai, kuriuose būtų atitinkamai 2,5, 5, 10 ir 15 mg /dm³ švino;

35.4.3. Matavimas:

35.4.3.1. Krosnies programavimas (pavyzdys):

džiovinimas 100 ^oC temperatūroje 30 s;

mineralizavimas 900 ^oC temperatūroje 20 s;

atomizavimas 2 250 ^oC temperatūroje 2-3 s;

azoto srautas (plovimo dujos): 6 dm³/min.

PASTABA. Procedūros pabaigoje temperatūrą reikia padidinti iki 2 700 ^oC, kad išsivalytų krosnis;

35.4.3.2. Absorbcijos matavimai

Absorbcija matuojama, kai bangos ilgis 217 nm. Pagal bidistiliatą absorbcijos skalėje nustatoma nulinė vertė. Mikropipete į krosnį įlašinama trys kiekvieno etaloninio kalibravimo tirpalo bei analizuojamojo mėginio 5 ml porcijos. Užrašomos absorbcijos vertės. Pagal matavimų rezultatus apskaičiuojama vidutinė absorbcijos vertė;

35.5. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška

Nubraižoma absorbcijos vertės priklausomybės nuo švino koncentracijos etaloniniuose tirpaluose kreivė. Gautas grafikas yra tiesė. Iš nustatytos vidutinės mėginio absorbcijos vertės kalibravimo kreivėje randama švino koncentracija C. Švino koncentracija vyne, mg/dm³, yra C´F; čia F – praskiedimo koeficientas.

36. Fluoridų nustatymo metodai

36.1. Metodo esmė

Fluoridų kiekis vyne, kuris įpilamas į buferinį tirpalą, nustatomas naudojant kietosios membranos selektyvųjį jonų elektrodą. Išmatuotas potencialas yra proporcingas fluoridų jonų aktyvumo analizuojamojoje terpėje logaritmui pagal tokią lygtį:

E = E_o ± S log a_F;

Čia E – selektyviojo jonų elektrodo potencialas, išmatuotas pagal lyginamąjį elektrodą analizuojamojoje terpėje; E_o – standartinis jutiklio potencialas; S – jonų selektyviojo elektrodo nuolinkio koeficientas (Nernsto koeficientas). Esant 25 ^oC temperatūrai, teorinis nuolinkio koeficientas lygus 59,2 mV; a_F – fluoridų jonų aktyvumas analizuojamojoje terpėje;

36.2. Įranga ir priemonės:

36.2.1. Fluorido jonų selektyvusis kristalinės membranos elektrodas;

36.2.2. Lyginamasis elektrodas (kalomelis ar Ag/AgCl);

36.2.3. Milivoltmetras (pH matavimo prietaisas su išplėsta milivoltus rodančia skale), kurio tikslumas – 0,1 mV;

36.2.4. Magnetinis maišiklis su izoliacine plokštele, kuri apsaugo tirpalą nuo variklio išskiriamos šilumos. Maišymo indas su plastikiniu dangteliu (pagamintu iš polietileno ar panašios medžiagos);

36.2.5. Laboratorinės plastiko stiklinės, kurių talpa 30 ar 50 cm³, bei plastiko buteliai (pagaminti iš polietileno ar panašios medžiagos);

36.2.6. Tikslios pipetės (sugraduotos mdm³ ar panašios);

36.3. Reagentai:

36.3.1. Pradinis fluorido tirpalas, kuriame yra 1 g/dm³ fluorido. Vartojamas prekinis etaloninis tirpalas, kuriame yra 1g/dm³ fluorido. Šį tirpalą galima paruošti taip: distiliuotame vandenyje ištirpinama 2,210 g natrio fluorido, džiovinto 3-4 h 105 ^oC temperatūroje, ir praskiedžiama distiliuotu vandeniu iki 1 dm³. Toks tirpalas turi būti laikomas plastiko butelyje;

36.3.2. Etaloniniai atitinkamos koncentracijos fluorido tirpalai ruošiami praskiedžiant pradinį tirpalą distiliuotu vandeniu ir laikomi plastiko buteliuose. Tirpalų, kuriuose fluorido kiekis yra mg/dm³, negalima ruošti iš anksto;

36.3.3. Buferinis tirpalas, kurio pH 5,5. Į vandenį (apie 50 cm³) įdedama 10 g trans-1,2-diaminocikloheksantetraacto rūgšties (CDTA). Tada supilamas tirpalas, kurį sudaro 58 g natrio chlorido ir 29,4 g natrio citrato, ištirpinto 700 cm³ distiliuoto vandens. CDTA ištirpinamas maždaug 6 cm³ 32 % (m/t) natrio hidroksido tirpalo. Galiausiai įpilama 57 cm³ acto rūgšties (r₂₀ = 1,05 g/cm³) ir, naudojant 32 % natrio hidroksido tirpalą (apie 45 cm³), nustatoma pH 5,5. Tirpalas paliekamas atvėsti ir iki 1 dm³ praskiedžiamas distiliuotu vandeniu;

36.4. Analizė:

PASTABA. Svarbu, kad matuojamų tirpalų temperatūra būtų 25±1 ^oC. Didesnis nei 1 ^oC temperatūros nuokrypis sukelia maždaug 0,2 mV pokyčius;

36.4.1. Tiesioginis metodas

Į laboratorinę plastiko stiklinę įpilama tiek vyno, kiek stiklinėje yra buferinio tirpalo. Paskui tirpalas nestipriai ir tolygiai maišomas. Kai indikatorinis elektrodas nusistovi, potencialas kinta ne daugiau kaip 0,2-0,3 mV per 3 min. Potencialo vertė užrašoma mV;

36.4.2. Žinomo priedų kiekio metodas

Nuolat maišant į analizuojamąją terpę tikslia pipete įlašinamas žinomas etaloninio fluorido tirpalo kiekis. Kai potencialo vertė nesikeičia, užrašomi jo duomenys mV. Etaloninio tirpalo, kurio reikia įpilti, koncentracija pasirenkama taip:

a) dviguba ar triguba nei fluoridų koncentracija analizuojamojoje terpėje;

b) analizuojamosios terpės tūris turi likti beveik nepakitęs (jis gali padidėti ne daugiau kaip 1 %).

PASTABA. Sąlyga b supaprastina skaičiavimus (žr. 36.5 p.).

Apytikslė analizuojamosios terpės koncentracija nustatoma iš kalibravimo kreivės, kuri braižoma pusiau logaritminėje skalėje, popieriuje kai naudojamos etaloninių fluorido tirpalų 0,1, 0,2, 0,5, 1,0, 2,0 mg/dm³ vertės.

PASTABA. Jei apytikslė analizuojamosios terpės koncentracija nepatenka į etaloninių tirpalų koncentracijų eilę, mėginys praskiedžiamas.

PAVYZDYS. Jei apytikslis fluorido kiekis analizuojamojoje terpėje (20 cm³) yra 0,25 mg/dm³ F^‑, koncentracija turi būti didinama 0,25 mg/dm³. Norint tai padaryti, naudojamasi lašinimo pipete, kuria galima įlašinti, pavyzdžiui, 0,20 cm³ (= 1 %) etaloninio tirpalo, kuriame yra 25 mg/dm³ F^-, ar 0,050 cm³ etaloninio tirpalo, kuriame yra 100 mg/dm³ F^-;

36.5. Apskaičiavimas

Fluorido kiekis analizuojamojoje terpėje, mg/dm³, apskaičiuojamas pagal tokią formulę:

C_F = [(V_a´C_a) / V_o]´[(1/antilog DE/S)-1)];

čia C_F – fluorido koncentracija analizuojamojoje terpėje, mg/dm³; C_a – į analizuojamąją terpę (V_a) papildomai įpilto fluorido koncentracija, mg/dm³; V_o – pradinis analizuojamosios terpės tūris prieš įpilant papildomai, cm³; V_a – papildomai įpilto tirpalo tūris, cm³; DE – skirtumas tarp E₁ ir E₂ potencialų, gautų pagal 36.4.1ir 36.4.2 p., mV; S – elektrodo nuolinkio koeficientas analizuojamajame tirpale.

Jei V_a yra beveik toks pat kaip V_o (žr. 36.4.2 p.), naudojama tokia supaprastinta formulė:

C_F = C_a´[(1/antilog DE/S)-1)].

Gautąją vertę reikia padauginti iš praskiedimo koeficiento, kadangi buvo įpilta buferinio tirpalo.

37. Anglies dioksido nustatymo metodai

37.1. Įvadas

CO₂ - bespalvės truputį rūgštoko kvapo ir skonio dujos, kurios yra vienas iš pagrindinių alkoholinio rūgimo produktų ir natūrali sudėtinė vyno dalis. CO₂ tankis 1,9 kg/m³, lydymosi temperatūra 56,6 ºC, sublimacijos temperatūra 78,5 ºC. Vienoks ar kitoks anglies dioksido kiekis yra bet kuriame vyne. Visų pirma - tai rūgimo proceso CO₂. Jaunuose vynuose paprastai būna didelis CO₂ kiekis, kuris palaipsniui iš jų išsiskiria išlaikymo, perpylimo procesų ir technologinių apdorojimų metu. Tyliųjų vynų anglies dioksido koncentracija kinta nuo pėdsakų iki 2 g/dm³, mažėjant su vyno amžiumi. Didžiausią reikšmę anglies dioksidas turi būdingų putojančių ir gazuotų vynų savybių susiformavimui.

Jo kiekis putojančiuose vynuose siekia 10g/dm³. Anglies dioksidas užtikrina putojančių vynų burbuliukų išsiskyrimą ir putojimą, jis turi teigiamos įtakos skoniui ir kokybei. Šampanizacijos procese dalis CO₂ sąveikauja su kai kuriomis vyno sudėtinėmis dalimis ir sudaro su jomis įvairių formų ryšius. Putojančiuose vynuose tarp įvairių CO₂ formų susidaro pastoviai kintanti pusiausvyra: CO₂ dujos ↔ CO2 tirpalas ← RCO₂, čia RCO₂ - surištas anglies dioksidas. RCO₂ - nestabilus, jis gali egzistuoti tik esant didelei bendrajai CO₂ koncentracijai putojančiame vyne, esančiame hermetiškai uždarytame inde padidintame slėgyje. Pažeidus hermetiškumą, surištoje būklėje esantis anglies dioksidas atsiskiria ir iš vyno išeina anglies dioksido dujų burbuliukai. CO₂ kiekis vyne nustatomas masės, titrimetriniu arba tūriniu metodu.

37.2. Metodų esmė:

37.2.1. Pamatinis metodas:

37.2.1.2. Ramus vynas (CO₂ slėgis ≤ 0,5´10⁵ Pa). Vyno mėginys atvėsinamas iki maždaug 0 °C, sumaišomas su pakankamu kiekiu natrio hidroksido, kad pH būtų 10-11 ir titruojamas rūgšties tirpalu naudojant karboanhidrazę. Anglies dioksido kiekis apskaičiuojamas pagal rūgšties tirpalo kiekį, suvartotą pH sumažinti nuo 8,0 (hidrokarbonato jonas) iki 4,0 (karbonato rūgštis). Tokiomis pačiomis sąlygomis titruojamas dekarbonizuotas vynas, siekiant nustatyti vyno rūgštims neutralizuoti reikalingą natrio hidroksido tirpalo kiekį;

37.2.1.3. Putojantis ir pusiau putojantis vynas. Vyno mėginys atvėsinamas beveik iki užšalimo temperatūros ir iš butelio paimamas tam tikras jo kiekis, kuris bus naudojamas dekarbonizuotam tuščiajam mėginiui paruošti, o į butelyje likusį vyną įpilama šarmo tam, kad būtų galima sujungti visą CO₂ karbonato forma. Titruojama rūgšties tirpalu esant karboanhidrazės ir anglies dioksido kiekis apskaičiuojamas pagal rūgšties tirpalo kiekį, suvartotą pH sumažinti nuo 8,6 (hidrokarbonatas) iki 4,0 (karbonato rūgštis). Tokiomis pačiomis sąlygomis titruojamas dekarbonizuotas vynas, siekiant nustatyti vyno rūgštims neutralizuoti reikalingą natrio hidroksido tirpalo kiekį;

37.2.2. Įprastinis putojančio ir pusiau putojančio vyno analizės metodas

Manometrinis metodas: anglies dioksido viršslėgis matuojamas pačiame butelyje afrometru;

37.3. Pamatinis metodas:

37.3.1. Ramus vynas (CO₂ slėgis ≤ 0,5´10⁵ Pa):

37.3.1.1. Įranga ir priemonės

Magnetinis maišiklis ir pH – matavimo prietaisas;

37.3.1.2. Reagentai ir tirpalai

0,1 M natrio hidroksido tirpalas; 0,05 M sieros rūgšties tirpalas; karboanhidrazės tirpalas, 1 g/dm³;

37.3.1.3. Analizė

Atšaldomas vyno mėginys ir 10 cm³ pipetės vynui paimti iki maždaug 0 ºC temperatūros. Į 100 cm³ talpos cilindro stiklinę įpilama 25 cm³ 0,1 M natrio hidroksido tirpalo; įlašinami 2 lašai karboanhidrazės tirpalo, 1 g/dm³. Atšaldyta pipete supilama 10 cm³ vyno. Stiklinė pastatoma ant magnetinio maišyklio, į ją pamerkiamas pH-metro elektrodas, magnetinis kūnas ir maišoma. Kai skystis pasiekia aplinkos temperatūrą, lėtai titruojama 0,05 M sieros rūgšties tirpalu kol pH taps 8,6. Užrašoma biuretės vertė ir toliau titruojama 0,05 M sieros rūgštimi, kol pH taps 4,0. Suvartotas 0,05 M sieros rūgšties tirpalo kiekis, reikalingas sumažinti pH nuo 8,6 iki 4,0 pažymimas n, cm³.

Iš maždaug 50 cm³ vyno, maišomo vakuume 3 min ir šildomo 25 ⁰C temperatūros vandens vonioje, pašalinamas anglies dioksidas. Tos pačios operacijos pagal aukščiau aprašytą metodiką atliekamos su 10 cm³ dekarbonizuoto vyno; suvartotas 0,05 M sieros rūgšties tirpalo kiekis pažymimas n’, cm³;

37.3.1.4. Rezultatų apskaičiavima ir išraiška

1 cm³ 0,05 M sieros rūgšties tirpalo atitinka 4,4 mg anglies dioksido. Anglies dioksido kiekis vyne, g/dm³, apskaičiuojamas pagal formulę 0,44 (n–n’) ir išreiškiamas dviejų ženklų po kablelio tikslumu.

PASTABA. Tiriant vynus, kuriuose CO₂ yra mažiau negu 1 g/dm³, CO₂ hidratacijos katalizei nereikia pridėti karboanhidrazės;

37.3.2. Putojantis ir pusiau putojantis vyna:

37.3.2.1. Įranga ir priemonės

Magnetinis maišyklis ir pH matavimo prietaisas;

37.3.2.2. Reagentai ir tirpalai

Natrio hidroksido tirpalas, 50 g/100 cm³; 0,05 M sieros rūgšties tirpalas; karboanhidrazės tirpalas, 1 g/dm³;

37.3.2.3. Analizė

Ant butelio su tiriamuoju vynu pažymimas vyno lygis. Vynas atšaldomas iki kol pradeda užšalti. Tada maišant butelio turiniui leidžiama truputį sušilti (kol dingsta ledo kristalai).

Butelis greitai atidaromas, į graduotą megintuvėlį ar cilindrą nupilama 45-50 cm³ vyno, kuris bus naudojamas tuščiam mėginiui paruošti. Tikslus paimto vyno tūris V, cm³, nustatomas pagal megintuvėlio ar cilindro skalę vėliau, kai jo temperatūra susilygina su aplinkos temperatūra. Į butelį, išpylus iš jo dalį vyno, įpilama 20 cm³ 50 g/100 cm³ natrio hidroksido tirpalo tam, kad butelis būtų užpildytas iki 750 cm³ ir palaukiama, kol vyno ir aplinkos temperatūros susilygina.

Į 100 ml talpos cilindro formos stiklinę įpilama 30 cm³ distiliuoto virinto vandens ir įlašinami 2 lašai karboanhidrazės tirpalo (1g/dm³). Dar įpilama 10 cm³ pašarminto vyno. Stiklinė pastatoma ant magnetinio maišiklio, į ją pamerkiamas pH-metro elektrodas, magnetinis kūnas ir maišoma.

Lėtai titruojama sieros rūgšties tirpalu: iš pradžių kol pH taps 8,6, paskui kol pH taps 4,0. pH sumažinti nuo 8,6 iki 4,0 suvartotas kiekis pažymimas n.

Anglies dioksidas iš n cm³ tūrio vyno, paimto iš butelio tuščiajam mėginiui paruošti, pašalinamas maišant vyną vakuume 3 min ir šildant kolbą iki 25 ºC temperatūros. Tam, kad pH taptų 10-11, į 30 cm³ virinto distiliuoto vandens įpilama 10 cm³ dekarbonizuoto vyno ir įlašinami 2-3 lašai 50 g/100 cm³ natrio hidroksido tirpalo. Analizė tęsiama pagal anksčiau aprašytą metodiką. Suvartotas titruoti 0,05 M sieros rūgšties kiekis pažymimas n’.

37.3.2.4. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška

1 cm³ 0,05 M sieros rūgšties tirpalo atitinka 4,4 mg anglies dioksido. Iš butelio išpilamas pašarmintas vynas ir 1 cm³ tikslumu išmatuojamas pradinis vyno tūris – įpilama į butelį vandens iki žymos V cm³. Anglies dioksido kiekis, g/dm³, vyne apskaičiuojamas pagal formulę:

.

Rezultatas išreiškiamas dviejų ženklų po kablelio tikslumu;

37.3.3. Perteklinio slėgio apskaičiavimas

Perteklinis slėgis 20 ºC temperatūroje P_vir20 apskaičiuojamas paskaliais, Pa pagal formulę:

;

čia  Q - CO₂ kiekis, g/dm³; A - etilo alkoholio kiekis vyne 20 ºC temperatūroje; S - cukraus kiekis vyne, g/dm³; P_atm - atmosferos slėgis, Pa.

PASTABA. Žemiau siūloma metodika gali būti naudojama kaip įprastinis vyno su mažesniu negu 4 g/dm³ anglies dioksido nustatymo metodas. Reikalingi du vyno tyrimo prietaisai. Vienas iš mėginių atidaromas atvėsinus iki maždaug 5ºC ir tuoj pat įpilama 5 cm³ natrio hidroksido tirpalo (50g/100 cm³) į 375 cm³ mėginio. Iškart uždaroma ir pamaišoma. 10 cm³ šito vyno įpilama į stiklinę su 40 cm³ vandens ir įlašinami 3 lašai karboanhidrazės tirpalo (0,1 mg/cm³). 0,02275 M sieros rūgšties tirpalu titruojama iki pH 8,6, o po to iki pH 4,0, panaudotas titravimui nuo 8,6 iki 4,0 tirpalo kiekis pažymimas n. Tuo pat metu iš paimto antram mėginiui 25 cm³ vyno pašalinamas anglies dioksidas, maišant vakuume 1 min. Į 500 cm³ talpos inde, kuriame yra 3 lašai karboanhidrazės tirpalo; pripilama 0,33 cm³ natrio hidroksido tirpalo (50 g/100 cm³). Paimama 10 cm³ dekarbonizuoto vyno ir analizuojama pagal aprašytas aukščiau operacijas. Panaudotos 0,02275 M sieros rūgšties kiekis, kuris atitinka 200 mg/dm³ anglies dioksido, pažymimas n’. Anglies dioksido kiekis (mg/dm³) tiriamajame vyne nustatomas pagal formulę: (n – n’)´200´1,013;

37.4. Įprastinis putojančio ir pusiau putojančio vyno analizės metodas:

37.4.1. Apibrėžimas

Viršslėgis – tai slėgis, kuris susidaro dėl anglies dioksido pertekliaus uždarame inde. Jis išreiškiamas paskaliais;

37.4.2. Metodo esmė

Viršslėgis išmatuojamas manometru, nusistovėjus temperatūrai purtant butelį;

37.4.3. Įranga ir priemonės

Afrometras – pietaisas, kuriuo matuojamas slėgio perteklius putojančio vyno buteliuose, vadinamas afrometru. Jo konstrukcija skiriasi, pagal tai, kaip uždarytas butelis (metaliniu dangteliu, užsukamu kamščiu, kamščiamedžio arba polietileno kamščiu).

Afrometras buteliams su dangteliu ir užsukamu kamščiu susideda iš trijų dalių (37.1 pav.) - apatinės, vidurinės ir viršutinės. Apatinė afrometro dalis - tai speciali apkaba, tvirtinama ant butelio tipą. Apkaba turi sriegį, kuriuo susijungia su vidurine dalimi. Vidurinė afrometro dalis sujungia visas manometro dalis į vieną konstrukciją. Tai - speciali veržlė su išoriniu ir vidiniu sriegiu viršutinei daliai centruoti. Viršutinė afrometro dalis - tai adatos varžtas nešiklis. Be to, ji turi žiedą, kuriuo adata rankiniu būdu įsukama į dangtelį arba užsukamą kamštį. Adata per šoninę angą ir vidinį kanalą sujungta su esančiu ant varžto manometru.

Afrometras, skirtas nustatyti dujų slėgiui buteliuose su kamščiamedžio arba polietileno kamščiu (37.2 pav.), susideda iš dviejų dalių: pirmosios, analogiškos aukščiau aprašytos konstrukcijos viršutinei daliai, tik su pagal kamščio ilgį prailgintu varžtu ir adata. Adata neturi šoninės angos, o jos apatinė dalis sukonstruota kaip specialus į adatos tuščiavidurį kanalą įstatomas kaištelis, kuris įkrenta į vyną pradūrus kamštį. Antroji afrometro dalis - tai mova, kuri pritvirtina pirmąją dalį prie butelio kaklelio.

Abiejų afrometro tipų manometrai gali būti mechaniniai su Burdono vamzdžiu arba skaitmeniniai su pjezoelektriniu skaitikliu. Burdono vamzdis turi būti iš nerūdijančio plieno.

Manometrai graduojami paskaliais, Pa. Kaip putojančio vyno matavimo vienetą patogiau vartoti 10⁵ Pa arba kilopaskalį, kPa.

Manometrai gali būti įvairių klasių. Prietaiso klasė parodo jo tikslumą ir galimybes, kurios išreikštos skalėje (pvz., I klasės 1000 kPa manometru galima matuoti slėgį iki 1000 ±10 kPa). I klasė rekomenduojama labai tiksliems matavimams atlikti;

37.4.4. Afrometrų tikrinimas

Afrometrai turi būti tikrinami ne rečiau kaip 1 kartą per metus. Tikrinama naudojantis etalonų banku. Jie leidžia palyginti tikrinamą manometrą su aukščiausios klasės kartu įmontuotu etaloniniu prietaisu. Kontroliuojama lyginant dviejų prietaisų rodmenis, kai slėgiai sankryžiniai. Esant rodmenų skirtumų, reguliavimo varžtu pakoreguojama. Atitinkamos tarnybos turi turėti tokį etalonų banką.

37.1 pav. Afrometras kronen-kamščiams		37.2 pav. Afrometras kamščiamedžio arba plastmasės kamščiams

37.4.5. Analizė

Matuojama buteliuose, kurių temperatūra buvo pastovi 24 h:

37.4.5.1. Buteliai su užsukamais kamščiais

Apatinė afrometro dalis uždedama ant butelio vainikėlio. Veržlė sukama tol, kol adata pasiekia butelį. Kad būtų prarandama kuo mažiau dujų, užsukamas kamštis gręžiamas kiek galima greičiau, kad apsauginė tarpinė greičiau susiliestų su užsukamu kamščiu. Butelis stipriai supurtomas, kad slėgis jo nustatymo metu būtų pastovus;

37.4.5.2. Buteliai su kamščiamedžio arba plastmasės kamščiais

Smaigalys pastatomas ant adatos galiuko ir keturiais varžtais visas prietaisas įtvirtinamas ant kamščio. Viršutinė prietaiso dalis įsukama į kamštį, kol kiaurai jį pereina. Kad nebūtų kliūčių matuojant slėgį, adata turi smaigaliu įkristi į butelį. Tada stipriai supurtoma, kad susidarytų pastovus slėgis, ir užrašoma slėgio vertė. Po matavimų smaigalį reikia išimti;

37.4.6. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška

Perteklinis slėgis (P_vir·20) 20 ºC temperatūroje išreiškiamas Pa arba kPa. Jis turi atitikti manometro tikslumą (pvz.: 6,3´10⁵ Pa, arba 630 kPa, bet ne 6,33´10⁵ Pa, arba 633 kPa, 1000 kPa visos skalės 1-os klasės manometrui). Jeigu temperatūra nėra lygi 20 ºC, reikia išmatuotą slėgį padauginti iš koeficiento P_vir·20/P_vir, kurio vertės duotos 37.1 lentelėje.

Ryšys tarp slėgio ir putojančiame vyne esančio anglies dioksido kiekio. Pamatavus perteklinį slėgį 20 ºC temperatūroje (P_vir·20) apskaičiuojamas absoliutusis slėgis 20 ºC temperatūroje (P_{abs ·20}) pagal formulę:

P_{abs ·20} = P_atm + P_vir·20,

čia      P_atm –atmosferos slėgis, Pa.

Anglies dioksido kiekis vyne apskaičiuojamas pagal žemiau pateiktas formules:

CO₂, dm³/dm³ vyno:

0,987´10^-5´P_{abs ·20} ´(0,86 – 0,01 A)´(1- 0,00144 S).

CO₂, g/dm³ vyno:

1,951´10^-5´P_{abs ·20}´(0,86 – 0,01 A)´(1 – 0,00144 S);

čia A – etilo alkoholio kiekis vyne 20 ºC temperatūroje; S - cukraus kiekis vyne, g/dm³.

37.1 lentelė. Putojančio vyno koeficientai P_vir·20/P_vir

t, °C	Pvir·20/Pvir	t, °C	Pvir·20/Pvir	t, °C	Pvir·20/Pvir
0	1,85	9	1,40	18	1,06
1	1,80	10	1,36	19	1,03
2	1,74	11	1,32	20	1,00
3	1,68	12	1,28	21	0,97
4	1,64	13	1,24	22	0,95
5	1,59	14	1,20	23	0,93
6	1,54	15	1,16	24	0,91
7	1,50	16	1,13	25	0,88
8	1,45	17	1,09

38. Cianido darinių nustatymo metodai

38.1. Metodų esmė:

38.1.1. Greitasis nustatymo metodas

Vynų, kurie buvo apdoroti kalio dvivalenčiu heksacianoferatu, analizė. Patikrinimas, ar nėra trivalentės geležies dvivalenčio heksacianoferato suspensijos nuosėdose. Patikrinimas, ar nesusidarė trivalentės geležies dvivalenčio heksacianoferato, įpylus į parūgštintą vyną trivalentės geležies druskos. Patikrinimas, ar susidarė geležis, įpylus į parūgštintą vyną šarminio dvivalenčio heksacianoferato ir trivalenčio heksacianoferato mišinio;

38.1.2. Įprastinis metodas

Bendrojo vandenilio cianido kiekio, kuris išsiskiria hidrolizės rūgštinėje terpėje metu ir atskiriamas distiliuojant, argentometrinis nustatymas;

38.2. Greitasis nustatymo metodas - kalio dvivalenčiu heksacianoferatu apdorotas vynas:

38.2.1. Iranga ir priemonės

Reikia turėti vieną iš žemiau išvardytų prietaisų: centrifūgą, kurios išcentrinė jėga būtų nuo 1200 iki 1500 g; filtravimo įrangą su membraniniais filtrais (skylučių skersmuo 0,45 mm);

38.2.2. Reagentai:

38.2.2.1. Druskos rūgštis, praskiesta santykiu 1:2 (t/t). Vartojama geležies neturinti druskos rūgštis, HCl (r₂₀ = 1,18-1,19 g/cm³);

38.2.2.2. 15 % (m/t) trivalentės geležies amonio sulfato, Fe₂(SO₄)₃, (NH₄)₂SO₄´24H₂O, tirpalas;

38.2.2.3. 10 % (m/t) kalio dvivalenčio heksacianoferato, K₄[Fe(CN)₆]´3H₂O, tirpalas;

38.2.2.4. 10 % (m/t) kalio trivalenčio heksacianoferato, K₃[Fe(CN)₆], tirpalas: ruošiamas tik prieš pat vartojimą;

38.2.3. Analizė:

38.2.3.1. Trivalentės geležies dvivalenčio heksacianoferato pėdsakų suspensijoje aptikimas

Suplakus mėginį, į 30 cm³ kūginį centrifugavimo mėgintuvėlį įpilama 20 cm³ vyno ir 1 cm³ praskiestos druskos rūgšties (38.2.2.1 p.). Centrifuguojama 15 min ar filtruojama per membraninį filtrą, kurio akučių skersmuo yra 0,45 mm. Nuosėdose, kurios buvo gautos po centrifugavimo ar filtravimo, neturi būti mėlynų dalelių;

38.2.3.2. Dvivalenčio heksacianoferato jonų pėdsakų tirpale aptikimas

Į centrifugatą ar filtratą, gautą atlikus 38.2.3.1 p. aprašytą analizę, įlašinamas vienas trivalentės geležies amonio sulfato tirpalo (38.2.2.2 p.) lašas. Sumaišoma ir paliekama pastovėti mažiausiai 24 h Centrifuguojama 15 min ar filtruojama per membraninį filtrą, kurio akučių skersmuo yra 0,45 mm. Nuosėdose, kurios buvo gautos po centrifugavimo ar filtravimo, neturi būti mėlynų trivalentės geležies dvivalenčio heksacianoferato dalelių;

38.2.3.3. Geležies jonų vyne nustatymas

Į mėgintuvėlį įpilama 20 cm³ vyno, 1 cm³ druskos rūgšties (38.2.2.1 p.), įlašinamas vienas kalio dvivalenčio heksacianoferato tirpalo (38.2.2.3 p.) ir vienas kalio trivalenčio heksacianoferato tirpalo (38.2.2.4 p.) lašas. Mažiau nei po 30 min turi atsirasti mėlyna spalva ar mėlynos nuosėdos. Po centrifugavimo ar filtravimo per membraninį filtrą, kurio akučių skersmuo yra 0,45 mm, ir praskalavimo su 5 cm³ vandens du kartus centrifugavimo mėgintuvėlyje ar ant membraninio filtro turi likti mėlynų nuosėdų;

38.3. Įprastinis metodas:

38.3.1. Įranga ir priemonės:

38.3.1.1. Distiliavimo aparatas, kurį sudaro 500 cm³ talpos apvaliadugnė kolba, sujungta vamzdžiu, kurio sujungimai yra matinio stiklo, su viršutiniu vertikaliai pastatyto, kuris yra bent 350 mm ilgio kondensatoriaus galu. Prie apatinio kondensatoriaus galo prijungtas antgalis, kuriuo distiliatas teka į 50 cm³ talpos kolbą, visiškai panardintą į ledinį vandenį;

38.3.1.2. Elektrinė verdančio vandens vonia (reguliuojama termostatu);

38.3.2. Reagentai:

38.3.2.1. Sieros rūgštis, praskiesta santykiu 1:5 (t/t). Labai atsargiai į reikiamą kiekį vandens įpilama 200 cm³ sieros rūgšties, H₂SO₄ (r₂₀ = 1,84 g/cm³), kad susidarytų 1 dm³ tirpalo;

38.3.2.2. Dvivalenčio vario chloridas, CuCl₂ × 2H₂O;

38.3.2.3. Fenolio raudonojo tirpalas. Ištirpinama 0,05 g fenolio raudonojo 1,4 cm³ 0,1 M natrio hidroksido tirpalo ir iki 1000 cm³ praskiedžiama natrio hidroksido tirpalu;

38.3.2.4. Kalio jodido tirpalas, KJ. Vandenyje ištirpinama 250 g KJ, kad susidarytų 1 dm³ tirpalo;

38.3.2.5. 0,001 M sidabro nitrato tirpalas. Į 10 cm³ 0,1 M sidabro nitrato, AgNO₃, tirpalo įpilama 0,5 cm³ koncentruotos azoto rūgšties, HNO₃, (r₂₀ = 1,40 g/cm³) ir praskiedžiama vandeniu, kad susidarytų 1 dm³ tirpalo;

38.3.2.6. 1 M natrio hidroksido tirpalas be geležies;

38.3.3. Analizė:

38.3.3.1. Įpilama 100 cm³ filtruoto vyno (arba nefiltruoto vyno, jei reikia nustatyti ir vandenilio cianidą, esantį bet kokiose melsvose drumzlėse), įdedama maždaug 5 mg dvivalenčio vario chlorido (38.3.2.2 p.) ir įpilama 10 cm³ praskiestos sieros rūgšties (38.3.2.1 p.). Į surinkimo kolbą įpilama 5 cm³ natrio hidroksido tirpalo (38.3.2.6 p.). Distiliuojama tol, kol 50 cm³ talpos surinkimo kolba pasidaro pilna;

38.3.3.2. Distiliatas supilamas į 400 cm³ laboratorinę stiklinę, kuri įstatoma į verdančio vandens vonią. Pagreitinamas garavimas: į šarminio tirpalo paviršių nukreipiama gana stipri ventiliatoriaus šalto oro srovė. Tūrį reikia sumažinti 5-7 cm³, o tai užtrunka apie 30 min (svarbu, kad niekuomet neliktų mažiau kaip 5 cm³ skysčio);

38.3.3.3. Jei reikia, atvėsintas skystis filtruojamas ir supilamas į mėgintuvėlį, kurio skersmuo 20 mm, o ilgis 180 mm, arba supilamas tiesiai į jį. Stiklinė ir filtras, jei buvo naudojamas, išplaunami keliais kubiniais centimetrais vandens ir viskas supilama į mėgintuvėlį;

38.3.3.4. Stiklinis mėgintuvėlis padedamas ant juodo pagrindo ir į jį iš šono nukreipiamas baltos šviesos spindulys. Skystis turi būti visiškai skaidrus;

PASTABA. Kai kurių rūšių vyno, pavyzdžiui, likerio ir kitų, distiliatas po filtravimo niekada nebūna skaidrus. Tokiais atvejais distiliatą reikia supilti į 200 cm³ talpos distiliavimo kolbą, pripilti distiliuoto vandens, kad būtų 30 cm³ tirpalo, ir distiliuoti, kol tirpalas taps šarminis. Pirmus 15 cm³ distiliato reikia išpilti. Kolbos turinys atvėsinamas, parūgštinamas maždaug 5 cm³ skiestos sulfato rūgšties ir distiliavimas pakartojamas. Distiliatas surenkamas į kolbą, kurioje yra 5 cm³ 1 M natrio hidroksido tirpalo. Reikia nudistiliuoti apie 5 cm³ skysčio ir jis taps skaidrus;

38.3.3.5. Įlašinami du lašai fenolio raudonojo tirpalo (38.3.2.3 p.), kuris palengvina stebėjimą ekvivalentiniame taške (šis priedas pasirenkamas dėl to, jog manoma, kad kartais lengviau stebėti drumstumo atsiradimą rausvame tirpale negu bespalviame), ir vienas lašas kalio jodido tirpalo (38.3.2.4 p.). Tada titruojama 0,001 M sidabro nitrato tirpalu (38.3.2.5 p.), kol pasirodo nedidelės, tačiau pastovios drumzlės. Sakykim, kad n – suvartotas titruoto tirpalo kiekis šiam rezultatui pasiekti;

38.3.3.4. Paruošiamas panašus mėgintuvėlis tuščiajam bandymui, kuriame yra 5 cm³ natrio hidroksido tirpalo (38.3.2.6 p.), du lašai fenolio raudonojo tirpalo (38.3.2.3 p.), vienas lašas kalio jodido tirpalo (38.3.2.4 p.) ir vandens, kad būtų tiek tirpalo, kiek ir tiriamajame mėgintuvėlyje. Įpilamas reikiamas sidabro nitrato tirpalo (38.3.2.5 p.) kiekis, kad drumstumas būtų toks kaip ir tiriamajame mėginyje. Sakykim, kad suvartotas kiekis yra n’ (n’ lygus 0,05 ar 0,1 cm³, jei vartojama mažiau negu 10 cm³ vandens; norint gauti įžiūrimą baigmės tašką, kiekis turi būti kuo mažesnis, o pagrindinės procedūros metu reikia vengti, kiek įmanoma, skiedimų);

38.3.4. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška

1 cm³ 0,001 M sidabro nitrato tirpalo atitinka 54 mg vandenilio cianido, HCN. Bendrasis vandenilio cianido kiekis, esantis 1 dm³ vyno, apskaičiuojamas taip: 0,54 (n – n’) mg. Rezultatas užrašomas dviejų skaičių po kablelio tikslumu. Reikia atsižvelgti tik į tuos rezultatus, kur (n – n’) skirtumas yra didesnis už 0,5 cm³. Jei (n – n’) skirtumas didesnis negu 10 cm³, procedūra kartojama naudojant 0,01 M sidabro nitrato tirpalą.

39. Alilizotiocianato nustatymo metodas

39.1. Metodo esmė

Vyne esantis alilizotiocianatas surenkamas distiliavimo metu ir identifikuojamas naudojant dujų chromatografiją;

39.2. Reagentai:

39.2.1. Absoliutusis etilo alkoholis;

39.2.2. Etaloninis tirpalas: alilizotiocianato absoliučiajame alkoholyje tirpalas, kuriame yra 15 mg/dm³ alilizotiocianato;

39.2.3. Šaldomasis mišinys, kurį sudaro etilo alkoholis ir sausasis ledas (temperatūra -60 ^oC);

39.3. Iranga ir priemonės:

39.3.1. Distiliavimo aparatas (39.1 pav.). Per aparatą nuolat leidžiama azoto srovė;

39.3.2. Šildomasis apvalkalas, reguliuojamas termostatu;

39.3.3. Debitmatis;

39.3.4. Dujų chromatografas su liepsnos jonizacijos detektoriumi, kuris turi selektyvųjį filtrą sieros junginiams (bangos ilgis 394 nm), ar kitu tinkamu detektoriumi;

39.3.5. Nerūdijančio plieno chromatografijos kolonėlė, kurios vidinis skersmuo 3 mm ir ilgis 3 m, užpildyta 10 % Carbowax 20M ant Chromosorb WHP, 80-100 meš;

39.3.6. 10 ml mikrošvirkštas;

39.4. Analizė:

39.4.1. Į distiliavimo kolbą įpilama 2 dm³ vyno, o į du surinkimo mėgintuvėlius – keli kubiniai centimetrai etilo alkoholio (39.2.1 p.), kad akyta dujų dispersijos mėgintuvėlių dalis būtų visiškai apsemta. Abu mėgintuvėliai iš išorės aušinami šaldomuoju mišiniu. Kolba ir surinkimo mėgintuvėliai sujungiami ir per distiliavimo aparatą pradedamas leisti azotas, kurio tekėjimo greitis 3 dm³/h. Per šildomąji apvalkalą vynas pašildomas iki 80 ^oC temperatūros, nudistiliuojamas ir surenkama 45-50 cm³ distiliato;

39.4.2. Stabilizuojamas chromatografas. Rekomenduojama laikytis tokių sąlygų: čiurkšlinio siurblio temperatūra 200 ^oC; kolonėlės temperatūra 130 ^oC; helio (dujų nešiklio) tekėjimo greitis 20 cm³/min;

39.4.3. Mikrošvirkštu įšvirkščiamas toks etaloninio tirpalo kiekis, kad chromatogramoje galima būtų lengvai identifikuoti alilizotiocianato smailę. Tokiu pat būdu į chromatografą įšvirkščiamas distiliato mėginys. Svarbu, kad gautos smailės sulaikymo kolonėlėje laikas būtų lygus alilizotiocianato smailės sulaikymo laikui. Aukščiau aprašytomis sąlygomis dėl pačiame vyne esančių junginių chromatogramoje neturi atsirasti trukdančių smailių;

39.1 pav. Aparatas distiliuoti azoto srautu

40. Vyno spalvos savybių įvertinimo (chromatinis apibūdinimas) metodai

40.1. Įvadas

Vyno spalvos savybės ir jų ryšys su vyno kokybe

Vyno spalvos įvertinimas (chromatinis apibūdinimas) visų pirma nustato kokybę, amžių ir technologijos ypatumus. Jaunas baltasis vynas yra gelsvos arba gelsvai žalsvos (geltonai šiaudinės) spalvos. Seno išlaikyto vyno spalva tampa intensyvesnė ir, oksiduojantis fenolinio komplekso medžiagoms, įgyja auksiškai gintarinius atspalvius.

Jaunas raudonasis vynas yra intensyvios avietinės spalvos su melsvai violetiniu atspalviu. Laikant vyną, jo spalva blunka, melsvai violetinis atspalvis dingsta ir atsiranda geltonai rudas atspalvis.

Spirituoto baltojo vyno spalva yra tamsesnė, palyginti su baltojo stalo vyno spalva. Desertinio baltojo vyno spalvos primena skirtingo intensyvumo arbatos užpilo spalvas.

Spirituotas raudonasis ir rausvas vynas gali būti įvairių pagal intensyvumą spalvų: nuo rožinės arba raudonai rožinės iki labai tamsios, sodrios bordo spalvos.

Iš vyno spalvos galima spręsti apie jo amžių ir sudėtį. Pavyzdžiui, ryškios, „gyvos“ spalvos vynas būna labai ryškaus rūgštingumo (gaivaus skonio), t. y. jo pH vertė yra nedidelė. Blankių spalvų vynas paprastai būna nepakankamai rūgštus. Intensyvi sodri spalva parodo, kad vyne yra daug ekstrakto. Spalvos ypatumai gali parodyti vyno trūkumus: juodas, blyškus arba rūdžių atspalvis rodo vyno ydas, perlamutrinis atspalvis - vyno ligas. Iš vyno spalvos galima spręsti apie technologiją: misos išlaikymą ant išspaudų, rūgimo režimą, perpylimo režimą ir t. t.;

40.2. Apibrėžimas

Vyno spalvos savybių apibūdinimas - tai jo skaidrumo ir spalvingumo įvertinimas. Skaidrumas atitinka šviesos pralaidumo laipsnį. Jo dydis atvirkščiai proporcingas vyno spalvos intensyvumui. Spalvingumas atitinka atspalvį apibūdinanti vyraujantį bangos ilgį ir grynumą. Sąlygiškai ir dėl žymėjimo patogumo raudonojo ir rausvojo vyno spalvos savybių apibūdinimas išreiškiamas spalvos ir atspalvio intensyvumu, nustatytu pagal tam skirtą metodą.

40.3. Metodų esmė:

40.3.1. Pamatinis metodas

Tai yra spektrofotometrijos metodas, kuriuo galima apskaičiuoti tristimulines vertes ir trichromatinius koeficientus, reikalingus spalvai pažymėti pagal Tarptautinės šviesos technikos komisijos nustatytus terminus;

40.3.2. Įprastinis metodas (taikomas raudoniesiems ir rausviesiems vynams)

Tai yra spektrofotometrijos metodas, pagal kurį spalvos savybės apibūdinamos sąlygiškai: spalvos intensyvumas išreiškiamas kaip vyno optinių tankių, išmatuotų 1 cm storio kiuvetėje, esant 420, 520 ir 620 nm bangos ilgiams, suma; atspalvis išreiškiamas optinių tankių santykiu, bangos ilgiams esant 420 ir 520 nm;

40.4. Pamatinis metodas:

40.4.1. Įranga ir priemonės:

40.4.1.1. Spektrofotometras, kuriuo galima matuoti šviesos absorbciją nuo 300 iki 700 nm;

40.4.1.2. 0,1 cm, 0,2 cm, 0,5 cm, 1cm, 2 cm ir 4 cm storio stiklo kiuvetės (po dvi kiekvieno storio);

40.4.2. Mėginių paruošimas

Drumstas vynas nuskaidrinamas centrifuguojant. Iš jaunų arba putojančių vynų anglies dioksidas pašalinamas purtant vakuume;

40.4.3. Analizė

Parenkamas kiuvečių storis b taip, kad matuojamas optinis tankis (šviesos absorbcija) būtų nuo 0,3 iki 0,7. Baltajam vynui naudojamas 2 cm (arba 4 cm), rausvajam – 1 cm, o raudonajam – 0,1 cm (arba 0,2 cm) storio kiuvetės. Norint nustatyti absorbcijos skalės nulinę vertę, bangos ilgiams esant 445, 495, 550 ir 625 nm, tokio pat storio palyginamoji kiuvetė užpildoma distiliuotu vandeniu. Tiriamųjų vyno mėginių optiniai tankiai A₄₄₅, A₄₉₅, A₅₅₀, A₆₂₅ išmatuojami 0,001 tikslumu;

40.4.4. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška

40.1 lentelėje randami išmatuoti optinių tankių dydžiai ir nustatomos atitinkamos šviesos pralaidumo vertės (T), t. y. T₄₄₅, T₄₉₅, T₅₅₀, T₆₂₅. Apskaičiuojami dydžiai, išreikšti dešimtainėmis trupmenomis, trijų koordinačių sistemoje X, Y, Z:

X = 0,42´T₆₂₅ + 0,35´T₅₅₀ + 0,21´T₄₄₅;

Y = 0,20´T₆₂₅ + 0,63´T₅₅₀ + 0,17´T₄₉₅;

Z = 0,24´T₄₉₅ +0,94´T₄₄₅.

Apskaičiuojamos spalvos koordinatės x ir y:

; .

40.1 lentelė. Absorbcijos dydžių pertvarkymo į pralaidumo dydžius duomenys

	0	1	2	3	4	5	6	7	8	9
0	23	22	22	21	21	20	20	19	19	19
	1000	977	955	933	912	891	871	851	832	813
1	18	18	17	17	16	16	16	15	15	15
	794	776	759	741	724	708	692	976	661	646
2	14	14	14	14	13	13	13	12	12	12
	631	617	603	589	575	562	549	537	525	513
3	11	11	11	11	10	9	9	10	10	9
	501	490	479	468	457	447	436	427	417	407
4	9	9	9	8	8	8	8	8	7	8
	398	389	380	371	363	355	347	339	331	324
5	7	7	7	7	6	7	6	6	6	6
	316	309	302	295	288	282	275	269	263	257
6	6	5	6	5	5	5	5	5	5	5
	251	245	240	234	229	224	219	214	209	204
7	4	5	4	4	4	4	4	4	4	4
	199	195	190	186	182	178	174	170	166	162
8	3	4	3	4	4	3	3	3	3	3
	158	155	151	148	141	141	138	135	132	129
9	3	3	3	2	3	2	3	2	3	2
	126	123	120	117	115	112	110	107	105	102

40.4.5. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška:

40.4.5.1. Santykinis ryškumas: santykinis ryškumas Y išreiškiamas procentais (juodaos spalvos Y = 0 %, bespalvės terpės Y = 100 %);

40.4.5.2. Spalvingumas

Spalvingumas išreiškiamas vyraujančiu bangos ilgiu ir grynumu. Šie rodikliai nustatomi iš spalvingumo diagramos, kuri yra apribota spektro trajektorija (40.1 pav.). Taškas O atitinka panaudotos baltos šviesos šaltinį, kuris šiuo atveju yra standartinis apšvietiklis C ir jo koordinatės x₀ = 0,3101 ir y_o = 0,3163 (tai yra vidutinio intensyvumo dienos šviesa);

40.1 pav. Spalvingumo diagrama su visų spalvų lokusu

Vyraujantis bangos ilgis. Diagramoje pažymimas taškas C, kurio koordinatės x ir y.

Jeigu taškas C yra už trikampio AOB ribų, brėžiama tiesė per tašką O iki taško C ir pratęsiama. Ji kerta Spectrum locus taške, kuris atitinka dominuojantį bangos ilgį. Jeigu taškas C yra trikampio AOB viduje, brėžiama tiesė iš taško C iki taško O tol, kol ji kirs Spectrum locus taške, kuris atitinka vyno papildomos spalvos bangos ilgį. Šio bangos ilgio vertė pažymima indeksu „C“.

Grynumas. Jeigu taškas C yra už trikampio AOB ribų, grynumas išreiškiamas tokiu santykiu:

Atstumas nuo taško C iki taško O

_______________________________ ·100 %.

Atstumas nuo taško O iki taško S

Jeigu taškas C yra trikampio AOB viduje, grynumas išreiškiamas santykiu:

Atstumas nuo taško C iki taško O

_______________________________ ·100 %.

Atstumas nuo taško O iki taško P

Taškas P yra toks taškas, kuriame tiesė OC kerta purpurinės srities tiesę. Grynumas gali būti nustatomas tiesiogiai iš spalvingumo diagramų pagal žinomus x ir y (40.2, 40.3, 40.4 pav.);

40.4.5.3. Rezultatai

Skaidrumas, spalvingumas (išreikštas vyraujančiu bangos ilgiu) ir grynumas kartu nulemia vyno spalvą. Jie turi būti pažymėti tyrimo ataskaitoje (sertifikate) kartu su optinio atstumo (kiuvetės storio) dydžiu, kuriam esant buvo atlikti matavimai.

40.5. Įprastinis metodas:

40.5.1. Įranga ir priemonės:

40.5.1.1. Spektrofotometras, kuriuo galima matuoti optinį nuo 300 iki 700 nm;

40.5.1.2. 0,1 cm, 0,2 cm, 0,5 cm, 1cm, ir 2 cm storio stiklo kiuvetės (po dvi kiekvieno storio);

40.5.2. Mėginių paruošimas

Drumstas vynas nuskaidrinamas centrifuguojant; iš jaunų arba putojančių vynų anglies dioksidas pašalinamas purtant vakuume;

40.5.3. Analizė

Parenkamas kiuvečių storis b taip, kad matuojamas optinis tankis būtų nuo 0,3 iki 0,7. Norint nustatyti absorbcijos skalės nulinę vertę, bangos ilgiams esant 420, 520 ir 620 nm, tokio pat storio palyginamoji kiuvetė užpildoma distiliuotu vandeniu. Išmatuojami tiriamųjų vyno mėginių optiniai tankiai A₄₂₀, A₅₂₀, A₆₂₀;

40.5.4. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška

Apskaičiuojamas mėginių optinis tankis, kai kiuvetės storis 1 cm, dalijant išmatuotas A₄₂₀, A₅₂₀, A₆₂₀ vertes iš kiuvetės, kurioje buvo atlikti matavimai, storio. Apskaičiuojamas intensyvumas 0,001 tikslumu pagal formulę:

I = A₄₂₀ + A₅₂₀ + A₆₂₀.

Apskaičiuojamas atspalvis 0,001 tikslumu pagal formulę:

N = A ₄₂₀/A ₅₂₀.

40.2 pav. Čerpių spalvos su purpuriniu atspalviu raudonojo vyno spalvingumo diagrama

a

40.3 pav. Grynos raudonos spalvos vyno spalvingumo diagrama

b	40.4 pav. Purpurinio atspalvio raudonojo vyno spalvingumo diagrama

41. Folin-Ciocalteu rodiklio nustatymo metodai

41.1. Apibrėžimas

Folin-Ciocalteu rodiklis – tai rezultatas, gautas taikant žemiau aprašytą metodą;

41.2. Metodo esmė

Visus fenolio junginius vyne oksiduoja Folin-Ciocalteu reagentas. Šį reagentą sudaro volframo rūgšties, H₃PW₁₂O₄₀, ir fosfomolibdeno rūgšties, H₃PMo₁₂O₄₀, mišinys, kuris po fenolių oksidacijos redukuojamas į mėlynos spalvos volframo, W₈O₂₃, ir molibdeno, Mo₈O₂₃, oksidų mišinį. Gautai mėlynai spalvai būdingas maksimalus optinis tankis, kai bangos ilgis yra 750 nm, kuris yra proporcingas bendrajam esančių fenolio junginių kiekiui;

41.3. Reagentai:

41.3.1. Folin-Ciocalteu reagentas. Šį reagentą galima nusipirkti jau paruoštą vartoti. Tačiau jį galima pasigaminti: 700 cm³ distiliuoto vandens ištirpinama 100 g natrio volframato, Na₂WO₄´2H₂O, ir 25 g natrio molibdato, Na₂MoO₄´2H₂O. Įpilama 50 cm³ 85 % fosforo rūgšties (r₂₀ = 1,71 g/cm³) ir 100 cm³ koncentruotos druskos rūgšties (r₂₀ = 1,19 g/cm³). Užvirinama ir pavirinama 10 h kolboje su grįžtamuoju šaldytuvu. Tada įdedama 150 g ličio sulfato, Li₂SO₄´H₂O, įlašinama keli lašai bromo ir dar kartą pavirinama 15 min. Leidžiama atvėsti ir praskiedžiama distiliuotu vandeniu iki 1 dm³;

41.3.2. 20 % (m/t) bevandenio natrio karbonato Na₂CO₃ tirpalas;

41.4. Įranga ir priemonės:

41.4.1. 100 cm³ talpos matavimo kolbos;

41.4.2. Spektrofotometras, kuriuo galima matuoti, kai bangos ilgis 750 nm;

41.5. Analizė:

41.5.1. Raudonasis vynas. Į 100 cm³ talpos matavimo kolbą būtinai paeiliui supilami žemiau išvardyti skysčiai:

- 1 cm³ santykiu 1:5 praskiesto vyno;

- 50 cm³ distiliuoto vandens;

- 5 cm³ Folin-Ciocalteu reagento;

- 20 cm³ natrio karbonato tirpalo (41.3.2 p.);

- praskiedžiama distiliuotu vandeniu iki 100 cm³.

Sumaišoma ir palaukiama 30 min, kol reakcija baigsis. Nustatomas optinis tankis 1 cm storio kiuvetėje, kai bangos ilgis 750 nm. Palyginamasis mėginys - distiliuotas vanduo. Jei gauta optinio tankio vertė nėra apytiksliai 0,3, būtina atitinkamai praskiesti;

41.5.2. Baltasis vynas. Atliekama tokia pati analizė kaip ir 41.5.1 p. su 1 cm³ neskiesto vyno;

41.5.3. Rektifikuota koncentruota misa:

41.5.3.1. Mėginio paruošimas

Vartojamas tirpalas, kuriame cukraus koncentracija yra 25 % (m/m) (25^o pagal Brikso skalę) bei kuris buvo paruoštas pagal 24.4.1.2 p. aprašytą būdą;

41.5.3.2. Matavimas

Atliekama tokia pati procedūra, kaip ir su raudonuoju vynu (41.5.1 p.), naudojant 5 cm³ mėginį, paruoštą, kaip nurodyta 41.5.3.1 p. Išmatuojamas optinis tankis, palyginimui naudojant paruoštą 5 cm³ 25 % (m/m) invertuotojo cukraus tirpalą;

41.6. Rezultatų apskaičiavimą ir išraiška:

41.6.1. Apskaičiavimas

Rezultatas išreiškiamas rodikliu, gautu dauginant optinio tankio vertę iš 100, jei tai - raudonasis vynas, praskiestas santykiu 1:5 (arba atitinkamu koeficientu, jei praskiedimo santykis kitoks), arba iš 20, jei tai - baltasis vynas. Jei tai - rektifikuota koncentruota misa, dauginama iš 16;

41.6.2. Pakartojamumas

Skirtumas tarp dviejų matavimų, kurie atliekami tuo pat metu ar labai greitai vienas po kito to paties analitiko, rezultatų turi būti ne daugiau kaip 1.

PASTABA. Norint gauti gerą rezultatų pakartojamumą, reikia naudoti ypač švarią įrangą (matavimo kolbas ir spektrofotometro kiuvetes).

42. Specialieji rektifikuotos koncentruotos vynuogių misos analizės metodai

42.1. Bendrasis katijonų kiekis:

42.1.1. Metodo esmė

Mėginys apdorojamas stipriai rūgštiniu katijonitu. Katijonai pasikeičia su H⁺ jonais. Bendrasis katijonų kiekis apskaičiuojamas pagal bendrojo ištekančių skysčių rūgštingumo ir bendrojo mėginio rūgštingumo skirtumą;

42.1.2. Įranga ir priemonės:

42.1.2.1. Stiklo kolonėlė su išleidžiamuoju čiaupu, kurios vidinis skersmuo yra 10-11 mm, o ilgis apie 300 mm;

42.1.2.2. Prietaisas pH matuoti, kurio skalė sugraduota bent jau kas 0,1 pH vnt;

42.1.2.3. Elektrodai:

- stiklo elektrodas, laikomas distiliuotame vandenyje;

- kalomelio/sočiojo kalio chlorido etaloninis elektrodas, laikomas sočiajame kalio chloride;

- arba mišrus elektrodas, laikomas distiliuotame vandenyje.

42.1.3. Reagentai:

42.1.3.1. Per naktį mirkyta vandenyje stipriai rūgštinio katijonito H⁺ formos derva;

42.1.3.2. 0,1 M natrio hidroksido tirpalas;

42.1.3.3. Popierinis pH indikatorius;

42.1.4. Analizė:

42.1.4.1. Mėginio paruošimas

Vartojamas tirpalas, gautas praskiedus rektifikuotą koncentruotą misą iki 40 %, kaip aprašyta 13.5.1.2 p;

42.1.4.2. Jonitinio filtro paruošimas

Į kolonėlę įpilama maždaug 10 cm³ išbrinkusio jonito, H⁺ formos. Praskalaujamas filtras distiliuotu vandeniu, kol bus pašalinta visa rūgštis. Tikrinti naudojamas popierinis indikatorius;

42.1.4.3. Jonų mainai

Per kolonėlę perleidžiama 100 cm³ rektifikuotos koncentruotos misos tirpalo, paruošto, kaip aprašyta 42.1.4.1p. Greitis – 1 lašas/s. Ištekantis skystis surenkamas į laboratorinę stiklinę. Praskalaujama kolonėlė 50 cm³ distiliuoto vandens. Titruojama ištekančiame skystyje esanti rūgštis (kartu su skalauti naudotu vandeniu) 0,1 M natrio hidroksido tirpalu, kol 20 ^oC temperatūroje pH bus 7. Šarmo tirpalas turi būti pilamas ir nuolat maišomas. Sakykim, kad n, cm³, bus sunaudotas 0,1 M natrio hidroksido tirpalo kiekis;

42.1.5. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška

Bendras ir katijonų kiekis išreiškiamas mekv/kg bendrojo cukrų kiekio ir užrašomas vieno skaičiaus po kablelio tikslumu. Ištekančio skysčio rūgštingumas, mekv/kg rektifikuotos koncentruotos misos: E=2,5´n. Bendras rektifikuotos koncentruotos misos rūgštingumas, mekv/kg (žr. 13.6.1. skirsnį): a. Bendrasis katijonų kiekis, mekv/kg bendrojo cukrų kiekio: [(2,5n – a) / P]× 100; čia P – procentinė bendrojo cukrų kiekio koncentracija (m/m);

42.2. Laidumas:

42.2.1. Metodo esmė

Skysčio stulpelio tarp dviejų lygiagrečių platinos elektrodų elektrinis laidumas jo galuose matuojamas įjungus Wheatstone tiltelio vieną petį. Laidumas kinta kintant temperatūrai, todėl jo vertė nurodoma, kai temperatūra yra 20 °C;

42.2.2. Įranga ir priemonės:

42.2.2.1. Konduktometras, kuriuo galima matuoti laidumą nuo 1 iki 1000 mS cm^-1;

42.2.2.2. Vandens vonia, kurios temperatūra 20 ± 2 °C;

42.2.3. Reagentai:

42.2.3.1. Demineralizuotas vanduo, kurio specifinis laidumas < 2 mS cm^-1 20 ^oC temperatūroje;

42.2.3.2. Etaloninis kalio chlorido tirpalas. Demineralizuotame vandenyje (42.2.3.1 p.) ištirpinama 0,581 g kalio chlorido, KCl, išdžiovinto 105 ^oC temperatūroje iki pastovios masės. Įpilama demineralizuoto vandens (42.2.3.1p.), kad būtų 1 dm³ tirpalo. Šio tirpalo laidumas 20 °C temperatūroje 1000 mS cm^-1. Jo negalima laikyti ilgiau kaip 3 mėnesius;

42.1 lentelė. Laidumui taikomos pataisos, kai temperatūra nėra 20 °C, mS cm^-1

Laidumas	Temperatūra, °C
	20,2	20,4	20,6	20,8	21,0	21,2	21,4	21,6	21,8	22,0^1
	19,8	19,8	19,4	19,2	19,0	18,8	18,6	18,4	18,2	18,0^2
0	0	0	0	0	0	0	0	0	0	0
50	0	0	1	1	1	1	1	2	2	2
100	0	1	1	2	2	3	3	3	4	4
150	1	1	2	3	3	4	5	5	6	7
200	1	2	3	3	4	5	6	7	8	9
250	1	2	3	4	6	7	8	9	10	11
300	1	3	4	5	7	8	9	11	12	13
350	1	3	5	6	8	9	11	12	14	15
400	2	3	5	7	9	11	12	14	16	18
450	2	3	6	8	10	12	14	16	18	20
500	2	4	7	9	11	13	15	18	20	22
550	2	5	7	10	12	14	17	19	22	24
600	3	5	8	11	13	16	18	21	24	26
^1atimti pataisos vertę; ^2pridėti pataisos vertę

42.2.4. Analizė:

42.2.4.1. Analizuojamojo mėginio paruošimas

Vartojamas tirpalas, kuriame bendrojo cukrų kiekio koncentracija yra 25 % (m/m) (25° pagal Brikso skalę), kaip aprašyta 24.5.1. p;

42.2.4.2. Laidumo nustatymas

Analizuojamasis mėginys įmerkiamas į vandens vonią, kad tirpalo temperatūra pasiektų 20 °C. Svarbu, kad temperatūra nepasikeistų daugiau kaip ± 0,1 °C. Su analizuojamuoju mėginiu 2 kartus praskalaujama konduktometrinė kiuvetė. Išmatuojama laidumas ir užrašomas rezultatas mS cm^-1;

42.3. Hidroksimetilfurfurolas (HMF):

42.3.1. Metodų esmė:

42.3.1.1. Kolorimetrijos metodas. Iš furano gauti aldehidai, kurių pagrindinis – hidroksimetilfurfurolas, reaguoja su barbitūro rūgštimi ir paratoluidinu ir susidaro raudonos spalvos junginys, kuris matuojamas kolorimetriškai, kai bangos ilgis 550 nm;

42.3.1.2. Didelio slėgio skysčių chromatografija (HPLC). Atskyrimas kolonėlėje, naudojant atvirkštinių fazių chromatografiją, ir matavimas, kai bangos ilgis 280 nm;

42.3.2. Kolorimetrijos metodas:

42.3.2.1. Įranga ir priemonės

Spektrofotometras, kuriuo galima matuoti, kai bangos ilgis 300-700 nm; 1 cm storio stiklo kiuvetės;

42.3.2.2. Reagentai:

42.3.2.2.1. 0,5 % (m/t) barbitūro rūgšties tirpalas. Distiliuotame vandenyje ištirpinama 500 mg barbitūro rūgšties, C₄O₃N₂H₄, ir truputį pakaitinama ant vandens, kurio temperatūra 100 ^oC vonios, praskiedžiama distiliuotu vandeniu iki 100 cm³ tirpalo. Tokį tirpalą galima laikyti savaitę;

42.3.2.2.2. 10 % (m/t) paratoluidino tirpalas. Į 100 cm³ talpos matavimo kolbą įdedama 10 g paratoluidino, C₆H₄(CH₃)NH₂, tada įpilama 50 cm³ izopropanolio, CH₃CH(OH)CH₃, ir 10 cm³ ledinės acto rūgšties, CH₃COOH (r₂₀ = 1,05 g/cm³). Įpilama izopropanolio, kad būtų 100 cm³ tirpalo. Šį tirpalą reikia gaminti kiekvieną dieną;

42.3.2.2.3. 1 % (m/t) etanalio (acetaldehido), CH₃CHO, vandeninis tirpalas. Paruošiamas tik prieš pat vartojimą;

42.3.2.2.4. 1 g/dm³ koncentracijos hidroksimetilfurfurolo, C₆O₃H₆, vandeninis tirpalas. Nuosekliai praskiedžiama keli tirpalai, kuriuose būtų 5, 10, 20, 30 ir 40 mg/dm³ šios medžiagos. Tirpalas, kuriame yra 1 g/dm³ hidroksimetilfurfurolo, ir skiesti tirpalai turi būti ruošiami tik prieš pat vartojimą;

42.3.2.3. Analizė:

42.3.2.3.1. Mėginio paruošimas

Vartojamas tirpalas, kuris gaunamas skiedžiant rektifikuotą koncentruotą misą iki 40 % (m/t) pagal 13.5.1. p. aprašytą metodiką. Analizė atliekama su 2 cm³ šio tirpalo;

42.3.2.3.2. Kolorimetrinė analizė

Į dvi 25 cm³ talpos kolbas a ir b, kurios turi matinio stiklo kamštelius, įpilama po 2 cm³ mėginio, kuris paruoštas, kaip aprašyta 42.3.2.3.1 p. Į kiekvieną kolbą įpilama po 5 cm³ p-toluidino tirpalo (42.3.2.2.2 p.) ir sumaišoma. Į kolbą b (palyginimui) įpilama 1 cm³ distiliuoto vandens, o į kolbą a – 1 cm³ barbitūro rūgšties (42.3.2.2.1p.). Suplakama, kad tirpalas susimaišytų. Kolbų turinys supilamas į spektrofotometro 1 cm storio kiuvetes. Kai bangos ilgis 550 nm, atliekami kolbos b tirpalo matavimai ir optinio tankio skalėje nustatoma nulinė vertė. Žiūrima, kaip kinta optinio tankio vertė, atliekant kolboje a esančio tirpalo matavimus. Užrašoma maksimali vertė A, kuri gaunama po 2-5 min. Mėginius, kuriuose hidroksimetilfurfurolo koncentracija didesnė už 30 mg/dm³, prieš analizę būtina praskiesti;

42.3.2.3.3. Kalibravimo kreivės sudarymas

Į du 25 cm³ talpos kolbų a ir b rinkinius įpilama po 2 cm³ hidroksimetilfurfurolo tirpalų, kurių koncentracija yra atitinkamai 5, 10, 20, 30 ir 40 mg/dm³ (42.3.2.2.4 p.). Jie apdorojami, kaip aprašyta 42.3.2.3.2 p. Grafikas, parodantis optinio tankio verčių priklausomybę nuo hidroksimetilfurfurolo koncentracijos, mg/dm³, turi būti tiesi linija, praeinanti pro nulį;

42.3.2.4. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška

Hidroksimetilfurfurolo koncentracija rektifikuotoje koncentruotoje misoje išreiškiama mg/kg bendrojo cukrų kiekio. Hidroksimetilfurfurolo koncentracija C, mg/dm³, analizuojamajame mėginyje nustatoma kalibravimo kreivėje pagal mėginio optinio tankio vertę A. Hidroksimetilfurfurolo koncentracija, mg/kg bendrojo cukrų kiekio apskaičiuojama pagal formulę: 250´(C/P); čia P – procentinė bendrojo cukrų kiekio koncentracija (m/m) rektifikuotoje koncentruotoje misoje;

42.3.3. Didelio slėgio skysčių chromatografija:

42.3.3.1. Įranga ir priemonės:

42.3.3.1.1. Didelio slėgio skysčių chromatografas su:

- 5 ar 10 ml kilpiniu mėginio įleidimo įrenginiu;

- spektrofotometro detektoriumi matavimams, kai bangos ilgis 280 nm;

- oktadecilu padengta silikagelio kolonėle (pvz,. Boandapak C18 – Corasil, Waters Ass.);

- savirašiu, geriausia – integratoriumi.

Judančiosios fazės tekėjimo greitis – 1,5 cm³/ min;

42.3.3.1.2. Membraninis filtravimo aparatas, kurio akučių skersmuo 0,45 mm;

42.3.3.2. Reagentai:

42.3.3.2.1. Vandens bidistiliatas;

42.3.3.2.2. Praskiestas ar HPLC grynumo metanolis, CH₃OH;

42.3.3.2.3. Acto rūgštis, CH3COOH, (r₂₀ = 1,05 g/cm³);

42.3.3.2.4. Judrioji fazė: vanduo, metanolis ir acto rūgštis santykiu 40: 9: 1 (t/t), prieš tai filtruoti per membraninį filtrą. Šią judriają fazę reikia ruošti kasdien ir prieš vartojimą iš jos pašalinti dujas;

42.3.3.2.5. Etaloninis hidroksimetilfurfurolo, 25 mg/dm³ (t/t), tirpalas. Į 100 cm³ talpos matavimo kolbą supilami tiksliai pasverti 25 mg hidroksimetilfurfurolo, C₆H₃O₆, ir iki žymės pripilama metanolio (42.3.3.2.2 p.). Tirpalas praskiedžiamas metanoliu santykiu 1:10 ir filtruojama per membraninį filtrą. Šį tirpalą galima laikyti 2-3 mėn. rudo stiklo butelyje šaldytuve;

42.3.3.3. Analizė:

42.3.3.3.1. Mėginio paruošimas

Vartojamas tirpalas, kuris gaunamas skiedžiant rektifikuotą koncentruotą misą iki 40 % (m/t) pagal 13.5.1. p. aprašytą metodiką. Jis filtruojamas per 0,45 mm membraninį filtrą;

42.3.3.3.2. Chromatografinė analizė

Į chromatografą įpurškiama 5 (ar 10) ml mėginio, paruošto, kaip aprašyta 42.3.3.3.1 p., ir 5 (ar 10) ml etaloninio hidroksimetilfurfurolo tirpalo (42.3.3.2.5 p.). Užrašoma chromatograma. Hidroksimetilfurfurolo sulaikymo trukmė yra maždaug 6-7 min;

42.3.3.4. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška

Hidroksimetilfurfurolo koncentracija rektifikuotoje koncentruotoje misoje išreiškiama mg/kg bendrojo cukrų kiekio. Sakykim, kad hidroksimetilfurfurolo koncentracija 40 % (m/t) rektifikuotos koncentruotos misos tirpale yra C, mg/dm³. Hidroksimetilfurfurolo koncentracija, mg/dm³, bendrajame cukrų kiekyje apskaičiuojama pagal formulę: 250´(C / P); čia P – procentinė bendrojo cukrų kiekio koncentracija (m/m) rektifikuotoje koncentruotoje misoje;

42.4. Sunkieji metalai:

42.4.1. Metodų esmė:

42.4.1.1. Greitasis sunkiųjų metalų nustatymo metodas

Sunkieji metalai rektifikuotoje koncentruotoje misoje aptinkami pagal spalvą, kuri atsiranda dėl sulfidų susidarymo. Jie nustatomi lyginant su etaloniniu švino tirpalu, atitinkančiu maksimalią leistiną koncentraciją;

42.4.1.2. Švino kiekio nustatymas atominės absorbcinės analizės metodu

Chelatas, kurį sudaro švinas ir amonio pirolidinditiokarbamatas, ekstrahuojamas su metilizobutilketonu, o optinio tankio vertė matuojama, kai bangos ilgis 283,3 nm. Švino kiekis nustatomas pagal žinomus švino kiekius etaloniniuose tirpaluose;

42.4.2. Greitasis sunkiųjų metalų nustatymo metodas:

42.4.2.1. Reagentai:

42.4.2.1.1. Praskiesta 70 % (m/t) druskos rūgštis: pasveriama 70 g druskos rūgšties, HCl, (r₂₀ = 1,16 – 1,19 g/cm³), ir praskiedžiama vandeniu iki 100 cm³;

42.4.2.1.2. Praskiesta 20 % (m/t) druskos rūgštis: pasveriama 20 g druskos rūgšties, HCl, (r₂₀ = 1,16 – 1,19 g/cm³) ir praskiedžiama vandeniu iki 100 cm³;

42.4.2.1.3. Praskiestas amoniakas: pasveriama 14 g amoniako, NH₃, (r₂₀ = 0,931 – 0,934 g/cm³) ir praskiedžiama vandeniu iki 100 cm³;

42.4.2.1.4. Buferinis tirpalas, kurio pH 3,5: 25 cm³ vandens ištirpinama 25 g amonio acetato, CH₃COONH₄, ir įpilama 38 cm³ praskiestos druskos rūgšties (42.4.2.1.1 p.); jei reikia, praskiesta druskos rūgštimi (42.4.2.1.2 p.) ar praskiestu amoniaku (42.4.2.1.3 p.) pakoreguojamas pH ir praskiedžiama vandeniu iki 100 cm³;

42.4.2.1.5. 4 % (m/t) tioacetamido, C₂H₅SN, tirpalas;

42.4.2.1.6. 85 % (m/t) glicerolio, C₃H₈O₃, tirpalas (n^20o_D = 1,449 – 1,455);

42.4.2.1.7. Tioacetamido reagentas: į 0,2 cm³ tioacetamido tirpalo (42.4.2.1.5 p.) įpilama 1 cm³ mišinio, kurį sudaro 5 cm³ vandens, 15 cm³ 1 M natrio hidroksido tirpalo ir 20 cm³ glicerolio (42.4.2.1.6 p.); 20 s šildoma 100 ^oC temperatūros vandens vonioje; tirpalas ruošiamas tik prieš pat vartojimą;

42.4.2.1.8. Tirpalas, kuriame yra 0,002 g/dm³ švino: 1 g/dm³ švino tirpalo paruošiama taip: vandenyje ištirpinama 0,400 g švino nitrato, Pb(NO₃)₂, ir praskiedžiama vandeniu iki 250 cm³. Prieš pat vartojimą šis tirpalas praskiedžiamas vandeniu santykiu 1:5 00 (t/t). Gautame tirpale bus 0,002 g/dm³ švino;

42.4.2.2. Analizė

10 cm³ vandens ištirpinama 10 g rektifikuotos koncentruotos misos. Įpilama 2 cm³ buferinio tirpalo, kurio pH 3,5, (42.4.2.1.4 p.) ir sumaišoma. Tada įpilama 1,2 cm³ tioacetamido reagento (42.4.2.1.7 p.) ir iškart sumaišoma. Taip pat paruošiamas palyginamasis tirpalas; suvartojama 10 cm³ 0,002 g/dm³ švino tirpalo (42.4.2.1.8 p.). Po 2 min ruda rektifikuotos koncentruotos misos tirpalo spalva neturi būti intensyvesnė negu palyginamojo tirpalo;

42.4.2.3. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška

Pagal aukščiau aprašytos procedūros sąlygas palyginamasis mėginys atitinka maksimalią leidžiamą sunkiųjų metalų koncentraciją, išreikštą 2 mg/kg švino rektifikuotoje koncentruotoje misoje;

42.4.3. Švino kiekio nustatymas atominės absorbcinės analizės metodu:

42.4.3.1. Įranga ir priemonės

Atominės absorbcijos spektrofotometras su oro ir acetileno degikliu; švino tuščiavidurio katodo lempa;

42.4.3.2. Reagentai:

42.4.3.2.1. Praskiesta acto rūgštis: pasveriama 12 g ledinės acto rūgšties (r₂₀ = 1,05 g/cm³) ir praskiedžiama vandeniu iki 100 cm³;

42.4.3.2.2. 1 % (m/t) amonio pirolidinditiokarbamato, C₅H₁₂N₂S₂, tirpalas;

42.4.3.2.3. Metilizobutilketonas, (CH₃)₂CHCH₂COCH₃;

42.4.3.2.4. Tirpalas, kuriame yra 0,010 g/dm³ švino: praskiedžiama 1 g/dm³ švino tirpalo (42.4.2.1.8 p.) iki 1 % (t/t);

42.4.3.3. Analizė:

42.4.3.3.1. Analizuojamo mėginio paruošimas

Mišinyje, kurį sudaro vienodas praskiestos acto rūgšties (42.4.3.2.1p.) ir vandens kiekis, ištirpinama 10 g rektifikuotos koncentruotos misos, ir pripilama tiek šio mišinio, kad būtų 100 cm³. Įpilama 2 cm³ amonio pirolidinditiokarbamato tirpalo (42.4.3.2.2 p.) ir 10 cm³ metilizobutilketono (42.4.3.2.3 p.). Plakama 30 s patalpoje, kur nėra ryškios šviesos. Paliekama kuriam laikui, kad atsiskirtų du sluoksniai. Vartojamas metilizobutilketono sluoksnis;

42.4.3.3.2. Etaloninių tirpalų paruošimas

Paruošiami 3 etaloniniai tirpalai, kuriuose, be 10 g rektifikuotos koncentruotos misos, būtų įpilta 1, 2 ir 3 cm³ tirpalo, kuriame yra 0,010 g/dm³ švino (42.4.3.2.4 p.). Šie tirpalai apdorojami taip kaip ir analizuojamasis tirpalas;

42.4.3.3.3. Palyginamasis tirpalas

Palyginamasis tirpalas paruošiamas taip, kaip nurodyta 42.4.3.3.1 p., tačiau nepilama koncentruotos rektifikuotos misos;

42.4.3.3.4 Analizė

Bangos ilgis nustatomas 283,3 nm. Į liepsną įpurškiamas palyginamasis mėginys (metilizobutilketono atomizavimas) ir optinio tankio skalėje nustatoma nulinė vertė. Nustatomas analizuojamojo mėginio ir etaloninių tirpalų optinių tankių vertės;

42.4.3.4. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška

Švino kiekis, mg/kg rektifikuotos koncentruotos misos, užrašomas vieno skaičiaus po kablelio tikslumu. Nubraižoma optinio tankio vertės priklausomybės nuo švino priedo kiekio etaloniniuose tirpaluose kreivė. Švino kiekis prilyginamas nuliui analizuojamajame mėginyje, į kurį švino nebuvo dėta. Tiesi linija, kuri jungia taškus ekstrapoliuojama tol, kol kerta neigiamą koncentracijų ašies dalį. Atstumas tarp susikirtimo taško ir koordinačių pradžios rodo švino koncentraciją analizuojamajame tirpale.

42.5. Etanolio nustatymas cheminiu būdu:

Šis metodas taikomas alkoholio koncentracijai nustatyti skystyje, kuriame mažai alkoholio: misoje, koncentruotoje misoje ir rektifikuotoje koncentruotoje misoje;

42.5.1. Metodo esmė

Mėginio distiliavimas, etanolio oksidavimas kalio dichromatu ir dichromato pertekliaus nutitravimas dvivalentės geležies tirpalu;

42.5.2. Įranga ir priemonės

Distiliavimo aparatas, kuris aprašytas 3.3.2. p;

42.5.3. Reagentai:

42.5.3.1. Kalio dichromato tirpalas: vandenyje ištirpinama 33,600 g kalio dichromato, K₂Cr₂O₇, ir praskiedžiama, kad susidarytų 1 dm³ tirpalo 20 ^oC temperatūroje. Šio tirpalo 1 cm³ oksiduoja 7,8924 mg alkoholio;

42.5.3.2. Dvivalentės geležies amonio sulfato tirpalas: vandenyje ištirpinama 135 g dvivalentės geležies amonio sulfato, FeSO₄´(NH₄)₂SO₄´6H₂O, įpilama 20 cm³ koncentruotos sieros rūgšties, H₂SO₄, (r₂₀ = 1,84 g/cm³) ir praskiedžiama vandeniu iki 1 dm³. Šis ką tik paruoštas tirpalas yra maždaug dvigubai didesnės molinės koncentracijos negu dichromato tirpalas, todėl jis oksiduojasi lėtai;

42.5.3.3. Kalio permanganato tirpalas: vandenyje ištirpinama 1,088 g kalio permanganato, KMnO₄, ir praskiedžiama iki 1 dm³;

42.5.3.4. Sieros rūgštis, praskiesta santykiu 1:2 (t/t): į 500 cm³ vandens palaipsniui ir nuolat maišant įpilama 500 cm³ sieros rūgšties, H₂SO₄, (r₂₀ = 1,84 g/cm³);

42.5.3.5. Geležies ortofenantrolino reagentas: 100 cm³ vandens ištirpinama 0,695 g geležies sulfato, FeSO₄´7H₂O, bei įpilama 1,485 g ortofenantrolino monohidrato, C₁₂H₈N₂´H₂O. Kad geriau ištirptų medžiagos, tirpalas pakaitinamas. Gautas skaisčiai raudonos spalvos tirpalas yra stabilus;

42.5.4. Analizė:

42.5.4.1. Distiliavimas

Į distiliavimo kolbą įpilama 100 g rektifikuotos koncentruotos misos ir 100 cm³ vandens. Distiliatas surenkamas į 100 cm³ talpos matavimo kolbą ir iki žymės pripilama vandens;

42.5.4.2. Oksidavimas. Į kolbą su matinio stiklo kamšteliu ir praplatintu kakleliu (skalaujant tokį kaklelį nepatiriama nuostolių) įpilama 20 cm³ titruoto kalio dichromato tirpalo (42.5.3.1p.) ir 20 cm³ praskiestos sieros rūgšties (42.5.3.4p.) santykiu 1:2 (t/t). Viskas suplakama. Įpilama 20 cm³ distiliato. Kolba užkemšama, turinys suplakamas ir palaukiama mažiausiai 30 min. Retkarčiais suplakamas (tai - kolba su tiriamuoju mėginiu). Kalio dichromato tirpalas titruojamas dvivalentės geležies amonio sulfato tirpalu (42.5.3.2 p.). Paimama dar viena kolba ir į ją įpilami tokie patys reagentų kiekiai, tik vietoj 20 cm³ distiliato įpilama 20 cm³ distiliuoto vandens (tai - kolba su palyginamuoju mėginiu);

42.5.4.3. Titravimas

Į kolbą su tiriamuoju mėginiu įlašinami 4 ortofenantrolino reagento (42.5.3.5 p.) lašai. Dichromato perteklius titruojamas dvivalentės geležies amonio sulfato tirpalu (42.5.3.2 p.). Kai mišinio spalva iš žaliai mėlynos pasikeičia į rudą, titravimas baigiamas. Norint nustatyti kuo tikslesnį ekvivalentinį tašką, kalio permanganato tirpalu (42.5.3.3 p.) vėl pakeičiama mišinio spalva – iš rudos į žaliai mėlyną. 1/10 dalis šio naudoto tirpalo tūrio atimama iš įpilto dvivalenčio geležies tirpalo tūrio. Sakykim, kad skirtumas – n, cm³. Tas pats kartojama su palyginamojo mėginio kolba. Sakykim, kad čia skirtumas – n’ cm³;

42.5.5. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška

Etanolis išreiškiamas g/kg cukraus ir užrašomas vieno skaičiaus po kablelio tikslumu. n’ cm³ geležies tirpalo redukuoja 20 cm³ dichromato tirpalo, kuris oksiduoja 157,85 mg gryno etilo alkoholio. Vienas cm³ geležies (II) tirpalo turi tokią pat redukcinę gebą kaip ir 157,85 / n’ mg etilo alkoholio. n –n’ cm³ geležies (II) tirpalo turi tokią pat redukcinę gebą kaip ir 157,85 (n – n’) / n’ mg etilo alkoholio. Etilo alkoholio kiekis g/kg rektifikuotos koncentruotos misos apskaičiuojamas pagal formulę: 7,892´[(n’ – n) / n]. Etilo alkoholio kiekis g/kg bendrojo cukrų kiekio apskaičiuojamas pagal formulę: 789,2´[(n’ – n) / n’´P]; čia P – procentinė bendrojo cukrų kiekio koncentracija (m/m).

42.6. Mezo-inozitolis, scylo -inozitolis ir sacharozė:

42.6.1. Metodo esmė

Silanizuotų darinių dujų chromatografija;

42.6.2. Reagentai:

42.6.2.1. Etaloninis tirpalas: ksilitas - maždaug 10 g/dm³ vandeninis tirpalas, į kurį įdėta ant mentelės galiuko natrio azido;

42.6.2.2. Bis(trimetilsilil)trifluoroacetamidas (BSTFA), C₈H₁₈F₃NOSi₂;

42.6.2.3. Trimetilchlorosilanas, C₃H₉ClSi;

42.6.2.4. Piridinas, C₅H₅N;

42.6.2.5. Mezo-inizitolis, C₆H₁₂O₆;

42.6.3. Įranga ir priemonės:

42.6.3.1. Dujų chromatografas;

42.6.3.2. Kapiliarinė kolonėlė (pvz., lydyto silicio, padengta OV-1; dengiamojo sluoksnio storis 0,015 mm; kolonėlės ilgis 25 m, o vidinis skersmuo 0,3 mm);

Chromatografijos sąlygos:

- nešančiosios dujos – vandenilis ar helis;

- nešančiųjų dujų tekėjimo greitis apie 2 cm³/min;

- kilpinio mėginio įleidimo įrenginio ir detektoriaus temperatūra 300 °C;

- temperatūros programavimas: 1 min esant 160 °C, 4 °C/min iki 260 °C, pastovi 260 °C temperatūra 15 min;

- srauto paskirstymo santykis apie 1:20.

42.6.3.3. Integratorius;

42.6.3.4. 10 mdm³ mikrošvirkštas;

42.6.3.5. 50, 100 ir 200 mdm³ mikropipetės;

42.6.3.6. 2 cm³ buteliukas su tefloniniu kamščiu;

42.6.3.7. Krosnelė;

42.6.4. Analizė

Į 50 cm³ talpos kolbą įdedama 5 g rektifikuotos koncentruotos misos mėginio, labai tiksliai pasverto. Įpilama 1 mdm³ etaloninio ksilito tirpalo (42.6.2.1 p.) ir iki žymės pripilama vandens. Viską sumaišoma. Į buteliuką (42.6.3.6 p.) įpilama 100 mdm³ tirpalo ir išgarinama šiltoje oro srovėje. Garinimui pagreitinti galima įpilti 100 mdm³ absoliučiojo etilo alkoholio.

Nuosėdos atsargiai ištirpinamos 100 mdm³ piridino (42.6.2.4 p.). Įpilama 100 mdm³ bis(trimetilsilil)trifluoroacetamido (42.6.2.2 p.) ir 10 mdm³ trimetilchlorosilano (42.6.2.3 p.). Buteliukas užkemšamas tefloniniu kamšteliu ir pakaitinamas 1 h 60 ^oC temperatūroje. Mikrošvirkštu paimama 0,5 mdm³ skaidraus tirpalo ir įleidžiama su pakaitinta tuščiavidure adata pagal nurodytą srauto paskirstymo santykį;

42.6.5. Apskaičiavimas

Palyginamasis tirpalas, kuriame yra 60 g/dm³ gliukozės, 60 g/dm³ fruktozės, 1 g/dm³ mezo-inizitolio ir 1 g/dm³ sacharozės. Pasveriama 5 g šio tirpalo ir atliekama visa procedūra, kuri aprašyta 42.6.4 p. Mezo-inizitolio ir sacharozės kiekiai nustatomi iš chromatogramos ar integratoriaus duomenų lyginant su vidinio etalono ksilito smailės plotu. Scylo-inozitolio, kurio negalima nusipirkti ir kurio sulaikymo kolonėlėje laikas yra tarp paskutinio gliukozės izomero smailės ir mezo-inizitolio smailės, kiekis apskaičiuojamas taip kaip ir mezo-inizotolio;

42.6.6. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška.

Mezo-inizotolis ir scylo-inozitolis išreiškiami mg/kg cukraus. Sacharozė išreiškiama g/kg misos;

43. Metilo alkoholio nustatymo metodas

43.1. Pirmasis spektrofotometrijos metodas:

43.1.1. Metodo esmė

Metodas pagrįstas vyne esančio metilo alkoholio oksidavimu kalio permanganatu rūgštinėje terpėje iki formaldehido, kuris su chromotropo rūgšties dinatrio druska sudaro rožiškai violetinės spalvos junginius;

43.1.2. Įranga ir priemonės:

43.1.2.1. Vandens vonia;

43.1.2.2. 0,01 g tikslumo laboratorinės svarstyklės;

43.1.2.3. 400 cm³ arba 600 cm³ talpos laboratorinės stiklinės;

43.1.2.4. Spektrofotometras, kuriuo galima matuoti tirpalų šviesos absorbciją, kai bangos ilgis 540 nm;

43.1.2.5. 10 mm storio spektrofotometro kiuvetės;

43.1.2.6. Stiklinis termometras, sugraduotas iki 100°C: padalos vertė 0,1 °C arba 0,5 °C;

43.1.2.7. 0,5 cm³; 1 cm³; 2 cm³; 5 cm³ ir 10 cm³ pipetės;

43.1.2.8. 10 cm³ ir 25 cm³ matavimo cilindrai;

43.1.2.9. 50 cm³ ir 100 cm³ matavimo kolbos;

43.1.2.10. 100 cm³ arba 250 cm³ apvaliadugnė arba plokščiadugnė kolba;

43.1.2.11. 100 cm³ talpos kūgio kolbos;

43.1.2.12. Stiklinis rutulinis šaldytuvas;

43.1.3. Reagentai ir tirpalai:

43.1.3.1. Koncentruota sieros rūgštis (chemiškai gryna);

43.1.3.2. Ortofosforo rūgštis;

43.1.3.3. Rektifikuotas etilo alkoholis;

43.1.3.4. Metilo alkoholis;

43.1.3.5. Kalio permanganato tirpalas: pasveriama 3 g kalio permanganato kūgio kolboje, įpilama 50 cm³ distiliuoto vandens ir ištirpinama šildant vandens vonioje. Įpilama 15 cm³ ortofosforo rūgšties. Atvėsęs tirpalas perpilamas į 100 cm³ talpos matavimo kolbą ir pripilama distiliuoto vandens iki žymės. Paruoštas tirpalas laikomas tamsiame stiklio butelyje;

43.1.3.6. Kalio metabisulfitas, natrio metabisulfitas arba rūgštusis natrio sulfitas;

43.1.3.7. 5 % chromotropo rūgšties dinatrio druskos tirpalas. Paruoštas tirpalas laikomas tamsiame butelyje šaldytuve ne ilgiau kaip 5 paras;

43.1.4. Pasiruošimas analizei:

43.1.4.1. Paruošiamas pirminis etaloninis metilo alkoholio tirpalas: Į 100 cm³ talpos matavimo kolbą įpilama 1 cm³ metilo alkoholio ir praskiedžiama 5,5 % etilo alkoholiu iki žymės;

43.1.4.2. Sudaroma kalibravimo kreivė:

43.1.4.2.1. Etaloniniams tirpalams paruošti į šešias 50 cm³ talpos matavimo kolbas supilama 0,25 cm³; 0,50 cm³; 0,75 cm³; 1,0 cm³; 1,25 cm³ ir 1,50 cm³ pirminio etaloninio metilo alkoholio tirpalo. Į kiekvieną kolbą pripilama 5,5 % etilo alkoholio iki žymės. Gautuose etaloniniuose tirpaluose bus atitinkamai 0,005 %; 0,01 %; 0,015 %; 0,02 %; 0,025 % ir 0,03 % metilo alkoholio;

43.1.4.2.2. Į šešias 50 cm³ talpos matavimo kolbas, kurios laikomos vandens vonioje su ledu, įpilama po 2 cm³ KMnO₄ tirpalo. Į kiekvieną kolbą įpilama po 1 cm³ paruoštų etaloninių tirpalų. Šie tirpalai palaikomi 30 min. Tada įlašinama tiek kalio ar natrio metabisulfito tirpalo, kad tirpalai visiškai nuskaidrėtų (spalva turi išnykti). Į kiekvieną kolbą įpilama po 1 cm³ 5 % chromotropo rūgšties natrio druskos tirpalo ir lėtai, atsargiai pamaišant - po 15 cm³ sieros rūgšties. Kolbos dedamos 15 min į 60 °C temperatūros vandens vonią Paskui kolbos turinys atvėsinamas ir praskiedžiamas distiliuotu vandeniu iki žymės;

43.1.4.2.3. Išmatuojamas etaloninių metilo alkoholio tirpalų optinis tankis fotoelektrokolorimetru (FEK) 20 mm storio kiuvetėse naudojant žalią šviesos filtrą (l_maks = 540 nm);

43.1.4.2.4. Nubrėžiama kalibravimo kreivė: abscisių ašyje atidedamas etaloninių tirpalų metilo alkoholio kiekis, %, ordinačių - išmatuota optinio tankio vertė. Etaloninių tirpalų optiniai tankiai matuojami naudojant palyginamąjį tirpalą, kuris ruošiamas taip kaip ir etaloniniai tirpalai, tik imamas ne 1 cm³ metilo alkoholio, bet toks pat 5,5 % etilo alkoholio kiekis;

43.1.5. Analizė:

43.1.5.1. Prieš analizę vynas praskiedžiamas distiliuotu vandeniu iki 5,5 % etilo alkoholio kiekio. Gautu tirpalu 50 cm³ matavimo kolba pripildoma iki žymės. Tirpalas perpilamas į distiliavimo kolbą ir pradedama distiliuoti. Distiliavimas baigiamas, kai matavimo kolba užpildoma 80 % tūrio. Tada įpilama distiliuoto vandens iki žymės. Į 50 cm³ talpos matavimo kolbą, kurioje yra 2 cm³ kalio permanganato tirpalo, įpilama 1 cm³ distiliato ir išmatuojamas metilo alkoholio kiekis kaip aprašyta 43.1.4.2 p. Ruošiant palyginamąjį tirpalą, imamas ne 1 cm³ 5,5 % etilo alkoholio, bet toks pats kiekis distiliuoto vandens;

43.1.6. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška:

43.1.6.1. Metilo alkoholio kiekis vyne X, %, apskaičiuojamas pagal formulę:

X = A´K;

čia A – metilo alkoholio kiekis tiriamajame tirpale, kuris randamas iš kalibravimo kreivės,%; K – vyno praskiedimo laipsnis. Galutinis rezultatas - dviejų paeiliui atliktų matavimų rezultatų aritmetinis vidurkis. Paeiliui atliktų matavimų rezultatai išreiškiami 0,001 tikslumu, galutinis rezultatas - 0,01 tikslumu;

43.1.7. Pakartojamumas

Skirtumas tarp dviejų paeiliui atliktų matavimų rezultatų neturi viršyti 0,006%;

43.2. Antrasis spektrofotometrijos metodas:

43.2.1. Metodo esmė

Metilo alkoholis, esantis praskiestame iki 5 % etilo alkoholio koncentracijos vyno distiliate, parūgštintoje fosforo rūgštimi terpėje kalio permanganato tirpalu oksiduojamas iki formaldehido. Formaldehidas, jungdamasis su chromotropo rūgštimi sieros rūgšties terpėje, nudažo tirpalą violetine spalva, kurios intensyvumas matuojamas spektrofotometru, kai bangos ilgis 570 nm.;

43.2.2. Įranga ir priemonės:

43.2.2.1. 20 cm³ talpos mėgintuvėliai su šlifo kamščiais;

43.2.2.2. 1 cm³, 2 cm³, 3 cm³, 4 cm³, 5 cm³ ir 10 cm³ pipetės;

43.2.2.3. Vandens vonia;

43.2.2.4. Spektrofotometras, kuriuo galima matuoti tirpalų šviesos absorbciją, kai bangos ilgis 570 nm;

43.2.2.5. 10 mm storio spektrofotometro kiuvetės;

43.2.2.6. Analizinės svarstyklės;

43.2.2.7. 50 cm³,100 cm³ ir 1000 cm³ talpos matavimo kolbos;

43.2.3. Reagentai ir tirpalai:

43.2.3.1. Chromotropo rūgšties tirpalas: ištirpinama 50 mg chromotropo rūgšties arba jos natrio druskos 35 cm³ distiliuoto vandens. Paruoštas tirpalas dedamas į vandens vonią su ledu ir nedidelėmis porcijomis, atsargiai maišant įpilama 75 cm³ koncentruotos sieros rūgšties;

43.2.3.2. Pagrindinis metilo alkoholio tirpalas: 1 dm³ talpos matavimo kolboje pasveriama 0,5 g metilo alkoholio ir į kolbą įpilama 50 cm³ rektifikuoto etilo alkoholio, paskui - distiliuoto vandens iki žymės;

43.2.3.3. Praskiedimo tirpalas: į 1 dm³ matavimo kolbą įpilama 50 cm³ rektifikuoto etilo alkoholio, paskui - distiliuoto vandens iki žymės;

43.2.3.4. Fosforo rūgšties tirpalas, 50g/100 cm³;

43.2.3.5. Kalio permanganato tirpalas, 5 g/100 cm³;

43.2.3.6. Neutraliojo natrio sulfito tirpalas, 2g/100 cm³;

PASTABA. Chromotropo rūgšties tirpalas ruošiamas prieš pat vartojimą;

43.2.4. Pasiruošimas analizei:

43.2.4.1. Kalibravimo kreivės sudarymas:

43.2.4.1.1. Į šešias 50 cm³ talpos matavimo kolbas įpilama 2,5 cm³; 5 cm³; 10 cm³; 15 cm³; 20 cm³ ir 25 cm³ pagrindinio metilo alkoholio tirpalo, paskui - praskiedimo tirpalo iki brūkšnio. Gautuose etaloniniuose tirpaluose bus atitinkamai 25 mg/dm³, 50 mg/dm³, 100 mg/dm³, 150 mg/dm³, 200 mg/dm³ ir 250 mg/dm³ metilo alkoholio;

43.2.4.1.2. Sumaišoma 0,5 cm³ praskiedimo tirpalo su 0,5 cm³ kiekvieno etaloninio tirpalo. Analizė tęsiama kaip nurodyta ruošiant vyno distiliatą (praskiestą iki 5 % etilo alkoholio koncentracijos). Išmatuojama šių tirpalų absorbcija, kai bangos ilgis 570 nm, tomis pačiomis sąlygomis. Nubraižoma absorbcijos priklausomybės nuo koncentracijos kalibravimo kreivė;

43.2.5. Analizė:

43.2.5.1. Vyno distiliatas praskiedžiamas iki 5 % etilo alkoholio koncentracijos. Įpilama į mėgintuvėlį 0,5 cm³ praskiesto distiliato, įlašinamas 1 lašas fosforo rūgšties, 2 lašai kalio permanganato tirpalo, gerai sumaišoma ir palaikoma 10 min;

43.2.5.2. Kalio permanganatu nuspalvintas tirpalas nuskaidrinamas natrio sulfito tirpalu (paprastai reikia 4 lašų). Įpilama 5 cm³ paruoštos chromotropo rūgšties. Gautas tirpalas pakaitinamas 20 min 70 °C temperatūros vandens vonioje, atvėsinamas ir išmatuojama absorbcija A, kai bangos ilgis 570 nm. Nulinė prietaiso skalės vertė nustatoma naudojant palyginamąjį tirpalą, kuris ruošiamas su 0,5 cm³ praskiedimo tirpalo;

43.2.6. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška

Pagal išmatuotą tiriamojo tirpalo absorbciją, naudojantis kalibravimo kreive, nustatomas metilo alkoholio kiekis, mg/dm³, praskiestame iki 5 % alkoholio koncentracijos vyno distiliate. Gautoji vertė padauginama iš vyno praskiedimo vertės ir gaunamas metilo alkoholio kiekis tiriamajame vyne.

43.3. Chromatografijos metodas:

43.3.1. Metodo esmė

Metilo alkoholio kiekis vyno distiliate nustatomas dujų chromatografijos metodu įpylus į distiliatą etaloninio tirpalo;

43.3.2. Įranga ir priemonės:

43.3.2.1. Dujų chromatografas su liepsnos jonizacijos detektoriumi;

43.3.2.2. 0,010 cm³ talpos švirkštas (Hamilton Co. No. 701 ar ekvivalentus);

43.3.2.3. Chromatografijos analizės parametrai: kolonėlės temperatūra 60 °C, azoto slėgis 0,4´10⁵ Pa, nešančiųjų dujų srauto greitis 35 cm³/min, oro srauto greitis 500 cm³/min;

PASTABA. Bet kuris dujų chromatografijos metodas yra tinkamas, jeigu naudojama chromatografijos kolonėlė gali pilnai atskirti metilo alkoholį nuo etilo alkoholio ir kitų lakiųjų vyno junginių;

43.3.2.4. 100 cm³ talpos matavimo kolbos;

43.3.3. Reagentai ir tirpalai:

43.3.3.1. Butilo alkoholis;

43.3.3.2. Metilo alkoholis;

43.3.3.2. Etaloninis butilo alkoholio tirpalas: pasveriama 0,1g butilo alkoholio 100 cm³ talpos matavimo kolboje ir praskiedžiama iki žymės 10 % koncentracijos etilo alkoholiu;

43.3.3.3. Etaloninis metilo alkoholio tirpalas: pasveriama 0,01g metilo alkoholio 100 cm³ talpos matavimo kolboje ir praskiedžiama iki žymės 10 % koncentracijos etilo alkoholiu;

43.3.4. Analizė:

43.3.4.1. Paruošiamas tiriamasis tirpalas: įpilama 5 cm³ paruošto etaloninio butilo alkoholio tirpalo į 50 cm³ vyno distiliato;

43.3.4.2. Paruošiamas palyginamasis tirpalas: į kolbą įpilama 50 cm³ etaloninių metilo alkoholio ir 5 cm³ butilo alkoholio tirpalų;

43.3.4.3. Paeiliui mikrošvirkštu įšvirkščiama į dujų chromatografo mėginio įleidimo kamerą po 0,002 cm³ tiriamojo ir palyginamojo tirpalų;

43.3.4. Rezultatų apskaičiavimas ir išraiška

Metilo alkoholio kiekis vyne K, mg/dm³, apskaičiuojamas pagal formulę:

;

čia S ir S_x – metilo alkoholio smailių plotai atitinkamai palyginamajame ir tiriamajame tirpaluose; I ir i – butanolio smailių plotai atitinkamai tiriamajame ir palyginamajame tirpaluose.

Kai kurios santrumpos:

m/m - masė masėje (vartojama tirpalams apibūdinti);

m/t - masė tūryje (vartojama tirpalams apibūdinti);

t/t - tūris tūryje (vartojama tirpalams apibūdinti).

______________

---