Suvestinė redakcija nuo 2021-11-04

Įsakymas paskelbtas: Žin. 2004, Nr. 53-1827, i. k. 103301MISAK00000708

LIETUVOS RESPUBLIKOS APLINKOS MINISTRO

Į S A K Y M A S

DĖL LIETUVOS APLINKOS APSAUGOS NORMATYVINIŲ DOKUMENTŲ LAND 54-2003, LAND 55-2003, LAND 56-2003 PATVIRTINIMO

2003 m. gruodžio 24 d. Nr. 708

Vilnius

Pakeistas teisės akto pavadinimas:

Nr. D1-640, 2021-11-03, paskelbta TAR 2021-11-03, i. k. 2021-22799

Vadovaudamasis Lietuvos Respublikos aplinkos monitoringo įstatymo 6 straipsniu, Lietuvos Respublikos aplinkos apsaugos įstatymo 6 straipsnio 5 dalimi ir 25 straipsniu,

Preambulės pakeitimai:

Nr. D1-640, 2021-11-03, paskelbta TAR 2021-11-03, i. k. 2021-22799

1. Tvirtinu Lietuvos Respublikos aplinkos apsaugos normatyvinius dokumentus:

1.1. Neteko galios nuo 2021-11-04

Punkto naikinimas:

Nr. D1-640, 2021-11-03, paskelbta TAR 2021-11-03, i. k. 2021-22799

1.2. LAND 54-2003 „Fitoperifitono tyrimo metodika paviršinio vandens telkiniuose“ (pridedama);

1.3. LAND 55-2003 „Zooplanktono tyrimo metodika paviršinio vandens telkiniuose“ (pridedama);

1.4. Neteko galios nuo 2006-01-13

Punkto naikinimas:

Nr. D1-648, 2005-12-28, Žin. 2006, Nr. 4-123 (2006-01-12), i. k. 105301MISAK00D1-648

1.5. Neteko galios nuo 2021-11-04

Punkto naikinimas:

Nr. D1-640, 2021-11-03, paskelbta TAR 2021-11-03, i. k. 2021-22799

2. Nustatau, kad šie aplinkos apsaugos normatyviniai dokumentai privalomi juridiniams ir fiziniams asmenims, nustatyta tvarka atliekantiems aplinkos tyrimus.

APLINKOS MINISTRAS ARŪNAS KUNDROTAS

PATVIRTINTA

Lietuvos Respublikos aplinkos ministro

2003 m. gruodžio 24 d. įsakymu Nr. 708

FITOPERIFITONO TYRIMO METODIKA

PAVIRŠINIO VANDENS TELKINIUOSE

LAND 54-2003

1. Taikymo sritis

Šiame normatyviniame dokumente pateikiama paviršinio vandens telkinių fitoperifitono tyrimo metodika.

2. Normatyvinės nuorodos

Normatyvinis dokumentas parengtas remiantis šiais dokumentais:

2.1. LST 1426:1996. Vandens savybės. Terminai ir apibrėžimai.

2.2. LST EN 25667-2:2001. Vandens kokybė. Mėginių ėmimas. 2 dalis. Nurodymai, kaip imti mėginius (ISO 5667-2:1991).

2.3. LST EN ISO 5667-3:2001. Vandens kokybė. Mėginių ėmimas. 3 dalis. Nurodymai, kaip konservuoti ir gabenti mėginius (ISO 5667-3:1994).

2.4. LST EN ISO 3696:1996. Analizės vanduo. Apibūdinimas ir bandymo metodai.

2.5. Lietuvos HN 23:2001. Kenksmingų cheminių medžiagų koncentracijų ribinės vertės darbo aplinkos ore. Bendrieji reikalavimai.

3. Terminai ir apibrėžimai

3.1. Paviršinis vanduo – žemės paviršiumi tekantis arba stovintis vanduo.

3.2. Perifitonas (apaugimai) – tai augalai ir gyvūnai, kurie yra prisitvirtinę prie kietų vandens telkinio substratų ir aukštesniųjų augalų bei jų dalių, esančių po vandeniu, ir aptinkamas tik litoralinėje zonoje.

3.3. Fitoperifitonas – augalinė perifitono dalis, kurią sudaro bakterijų, žaliadumblių, titnagdumblių, melsvadumblių ir kitų visuma.

3.4. Litoralė – priekrantė, negili vandens juosta (iki 3,0 m gylio), apaugusi aukštesniaisiais augalais; jai būdingas vandens judėjimas, nepastovi vandens temperatūra, geras apšvietimas.

3.5. Saprobiškumas – organizmų gebėjimas gyventi organinėmis medžiagomis užterštuose vandenyse.

3.6. Saprobiškumo indeksas (S) – skaitmeninis dydis vandens telkinio biocenozei apibūdinti vartojamas telkinio biologinei kokybei nurodyti.

3.7. Saprobinis valentingumas – rūšies gebėjimo prisitaikyti prie aplinkos sąlygų laipsnis.

3.8. Mėginio fiksavimas – tiriamųjų mėginio savybių išsaugojimas per laikotarpį nuo mėginio paėmimo iki analizavimo, pridedant fiksavimo reagentų.

3.9. Taksonas – sistematinė (taksonominė) kategorija, apimanti giminingų organizmų grupę; augalų, gyvūnų arba grybų sistematikos vienetas: rūšis, gentis, šeima, klasė ir t. t.

4. Principas

Vandens telkinio kokybės įvertinime fitoperifitonas yra vienas iš svarbiausių ingredientų. Fitoperifitoną sudarantys organizmai atspindi būtent tos tyrimo vietos sąlygas, nes nėra atnešti srovės atsitiktinai iš kitų vietų, kaip tai atsitinka su planktonu.

Vandens kokybė nustatoma pagal:

a) fitoperifitono rūšinę sudėtį;

b) kiekvienos rūšies pasitaikymo dažnumą.

Įvertinant vandens kokybę pagal fitoperifitono tyrimo rezultatus, naudojamasi V. Sladečeko modifikuota R. Pantle ir H. Buck metodika [3.4], V. Sladečeko saprobinio valentingumo sąrašais [11.12].

Laikantis šių metodinių principų fitoperifitono tyrimų rezultatai išreiškiami skaitmenine forma ir leidžia palyginti tarpusavyje vandens telkinių kokybės būklę, kai kiekvieno jų saprobiškumo indeksai (S) apskaičiuoti pagal formulę.

5. Reagentai ir medžiagos

Leidžiama naudoti tik apibrėžtos analizinės kvalifikacijos reagentus ir distiliuotą vandenį, atitinkantį 3 kokybės laipsnį (2.4).

5.1. Lugol'o tirpalas, skirtas mikroskopavimui;

5.2. kalio jodidas (KI);

5.3. jodas kristalinis (I₂);

5.4. etanolis, etilo alkoholis, (CH₃CH₂OH), 96 tūrio %;

5.5. kedro aliejus, skirtas mikroskopavimui.

6. Naudojama įranga, prietaisai ir indai

6.1. Mikroskopas, didinantis iki 1000 kartų;

6.2. binokuliarinis stereoskopinis mikroskopas, didinantis iki 100 kartų;

6.3. objektiniai stikleliai (2 mm storio);

6.4. dengiamieji stikleliai (0,17 mm storio);

6.5. preparavimo adatėlės;

6.6. pincetai;

6.7. skalpeliai, gremžtukai;

6.8. įvairūs šepetėliai, pvz., dantų šepetukas;

6.9. pipetės;

6.10. Petri lėkštelės;

6.11. piltuvėliai;

6.12. plastikinė (plastmasinė) vonelė;

6.13. tamsaus stiklo buteliukai, 250 ml talpos;

6.14. batisto audinys, servetėlės;

6.15. plastmasinė dėžė, skirta indams su mėginiais transportuoti;

6.16. mėginių registracijos žurnalas;

6.17. spinta arba patalpa mėginių laikymui tamsoje;

6.18. pieštukas.

7. Darbų sauga

Atliekant tyrimus reikia vadovautis bendraisiais darbų saugos reikalavimais.

8. Mėginys

8.1. Indų paruošimas

Indai, į kuriuos talpinamas tiriamasis mėginys, turi būti tamsaus stiklo, 250 ml talpos buteliukai. Indai turi būti gerai išplauti nejoninių ir anijoninių ploviklių mišiniu ir išskalauti vandeniu.

8.2. Fiksavimo tirpalų paruošimas

8.2.1. Lugol'o tirpalo paruošimas

Į stiklinę su 1000 ml žyma įpilama 600 ml distiliuoto vandens. Nuolat maišant magnetine maišykle ištirpinama 20 g KJ, po to pridedama 10 g kristalinio jodo ir maišoma, kol jodas ištirpsta. Skiedžiama distiliuotu vandeniu iki 1000 ml tūrio, tirpalas gerai išmaišomas.

8.3. Mėginių ėmimas

Mėginiai imami pagal LST EN 25667-2:2001 (2.2).

8.1. Mėginio ėmimo vieta

Fitoperifitono mėginį imant nuo po vandeniu esančio kieto substrato, upės tėkmėje, gaunami patikimiausi rezultatai. Jokiu būdu negalima imti ten, kur stovintis vanduo.

Fitoperifitono mėginį kiekvieną kartą reikia imti toje pačioje vietoje ir nuo tų pačių substratų, kad vėliau, lyginant gautus duomenis, jie būtų patikimesni. Tinkamiausi substratai yra akmenys ir betoniniai įrenginiai.

8.2. Mėginio ėmimo seka

8.2.1. Fiksuotas mėginys

8.2.1. Įbridus į vandenį, surandame fitoperifitono mėginiui tinkamą kietą paviršių, pvz., akmenį (tinka akmenys su žalsvu arba pilku apnašu), nuo kurio aštriu peiliu, skalpeliu ar gremžtuku atsargiai nugremžiamas kietas paviršius;

8.2.2. Jei nėra kieto paviršiaus, surandame po vandeniu panirusias aukštesniųjų augalų dalis ir jas minkštu šepetėliu atsargiai nuplauname į indą su vandeniu (pvz., į plastmasinę vonelę ar stiklainį). Jeigu randami smulkūs augalai, jų dalys talpinamos į stiklainį su vandeniu ir kruopščiai kratoma. Po to jie iš stiklainio išimami ir išmetami, o nuoplovos saugomos tyrimui.

8.2.3. Nuogramdos ar nuoplovos sudedamos į tamsaus stiklo butelį ir užpilamos vandens telkinio vandeniu.

Taip surinkti mėginiai vietoje fiksuojami Lugol'o tirpalu, imant jo 1 mėginio tūrio.

Prie butelių pritvirtinamos etiketės, užrašomas mėginio numeris, telkinio pavadinimas, vieta ir data.

Mėginiai saugomi tamsioje vietoje.

8.2.2. Nefiksuotas mėginys

Fitoperifitono mėginiui gali būti surenkami apaugę akmenukai ar aukštesniųjų augalų pasinėrusios dalys į buteliuką, užpilami telkinio vandeniu, bet nefiksuojami. Toks mėginys turi būti per 6 val. atvežtas į laboratoriją ir tiriamas tuoj pat, nugremžiant kietą tiriamo substrato paviršių ir pasigaminant preparatą.

9. Procedūra

9.1. Mėginio paruošimas tyrimui

Ant objektinio stiklelio užlašinamas tiriamojo mėginio lašas, kuris uždengiamas dengiamuoju stikleliu. Darbui naudojami švariai nuplauti objektiniai ir dengiamieji stikleliai, kurie laikomi 96 tūrio % etanolyje. Objektinis stiklelis yra švarus, jei ant jo vandens lašelis nesilaiko rutuliuku, o plonu sluoksniu pasklinda jo paviršiuje. Dengiamasis stiklelis uždengiamas ypač atidžiai, stebint, kad vandens laše nesusidarytų oro burbuliukų.

9.2. Tyrimo seka

9.2.1. Rūšinės sudėties nustatymas

Fitoperifitono rūšinės sudėties nustatymui mėginys peržiūrimas mikroskopu, didinančiu iki 1000 kartų. Mėginys peržiūrimas tol, kol neberandama naujų rūšių. Paprastai užtenka peržiūrėti 3-4 preparatus. Dumblių rūšys identifikuojamos, naudojantis vadovais apibūdintojais [1, 2, 5, 6, 7-9]. Gali būti naudojami ir kiti vadovai apibūdintojai.

9.2.2. Mėginio saprobiškumo indekso nustatymas

Vienas iš metodų, naudojamas vandens kokybei nustatyti pagal fitoperifitoną yra R. Pantle ir H. Buck indikatorinių organizmų metodas, modifikuotas V. Sladečeko [3.4].

Šio metodo dėka tyrimų rezultatai išreiškiami saprobiškumo indeksu.

Saprobiškumo indekso (S) nustatymui reikia žinoti kiekvienos mėginyje rastos rūšies indikatorinę reikšmę ir jos sutinkamumo dažnumą tiriamajame mėginyje. Indikatorinės fitoperifitono individų reikšmės (s) nustatomos naudojantis saprobinių organizmų sąrašais [11.12] o rūšies sutinkamumo dažnumas (h) apskaičiuojamas, naudojantis šešių pakopų sutinkamumo dažnumo skale (1 lentelė).

Indikatorinių rūšių sutinkamumo dažnumo skalė

1 lentelė

Rūšies sutinkamumo

dažnumas, h

1 – Keletas (vienetiniai egzemplioriai mėginyje)

2 – Labai retai (vienetai kiekviename preparate)

3 – Retai (keliuose matymo laukuose)

5 – Neretai (ne visuose matymo laukuose)

7 – Dažnai (kiekviename matymo lauke)

9 – Labai dažnai (daug kiekviename matymo lauke)

Saprobiškumo indeksas (S) skaičiuojamas pagal formulę:

å (s ´ h)

S = ---------------------,

å h

kur:

s – indikatorinio organizmo saprobinis valentingumas;

h – indikatorinio organizmo sutinkamumo dažnumas.

Saprobiškumo indeksas (S) apskaičiuojamas 0,01 dalies tikslumu. Pagal mėginio saprobiškumo indeksą nustatoma vandens telkinio ar tirtos vietos saprobiškumo zona (2 lentelė).

Saprobiškumo zonų lentelė

2 lentelė

Saprobiškumo zona	Saprobiškumo indekso skaitinės reikšmės
Ksenosaprobinė (x)	nuo 0 iki 0,50
Oligosaprobinė (o)	nuo 0,51 iki 1,50
Beta-mezosaprobinė (b)	nuo 1,51 iki 2,50
Alfa-mezosaprobinė (a)	nuo 2,51 iki 3,50
Polisaprobinė (p)	nuo 3,51 iki 4,00

Saprobiškumo indekso skaičiavimo pavyzdys pateiktas 3 lentelėje:

3 lentelė

Rūšies pavadinimas	Saprobiškumo zona	Rūšies saprobinis valentingumas, s	Rūšies sutinkamumo dažnumas, h	s ´ h
Navicula radiosa	o-b	1,6	2	3,2
Nitzchia liniaris	o-b	1,5	2	3,0
Pediastrum duplex	b	1,7	3	5,1
Stephanodiscus hanthschii	a	2,7	5	13,5
Trachelomonas volvocina	b	2,0	5	10,0
Suma (å)			å 17	å 34,8

å (s ´ h) 34,8

S = ^{_____________} = ^______= 2,04;

å h 17

S = 2,04.

Pagal gautą mėginio saprobiškumo indekso skaitinę reikšmę (S – 2,04) nustatome tirtos vietos saprobiškumo zoną (3 lentelė) [10].

Tirta vandens telkinio vieta pagal fitoperifitono organizmus priklauso Beta-mezosaprobinei (β) zonai.

10. Duomenų pateikimas

Fitoperifitono tyrimų duomenys pateikiami lentelėse. Jose turi būti pateikta ši informacija:

telkinio pavadinimas;

mėginio ėmimo vieta;

data, val.;

vandens temperatūra, ^oC;

mėginyje nustatytų rūšių sąrašas;

kiekvienos rūšies saprobinis valentingumas (s);

rūšies sutinkamumo dažnumas (h);

bendras rūšių skaičius mėginyje;

mėginio saprobiškumo indeksas (S).

Bibliografija

1. Flora słodkowodna Polski. – Polska Akademia Nauk. Panstvowe wydawnictwo naukowe. – Warszawa, 1964-1969. T. 1-2-3-4-5.

2. Liebmann. Handbuch der Frischwasser und Abwasser. – Jena, 1962.

3. Pantle R., Buck H. Die biologische Uberwachung der Gewasser und die

Darstellung der Ergebnisse. – Gas und Wasserfach, 1955, H, 96 (18).

4. Sladecek V. System of Water Quality from the Biological Point of View. – Arch Hydrobiol., 1973, Bein. 7, 1-218.

5. Toini Tikkanen, Torbjorn Willen. Vaxtplanktonflora. Naturvardsverket, 1992.

6. Васильева И. И. Эвгленовые и желтозеленые водоросли Якутии. – Изд. «Наука», 1987.

7. Определитель низших растений в пяти томах. – Изд. «Советская наука», 1977.

8. Опрелелитель пресневодных водорослей СССР. – Изд. «Советская наука», 1951.

9. Пресноводные диатомовые и синезеленые водоросли водоемов Якутии. – Изд. «Наука», М., 1975.

10. Руководство по методам гидробиологического анализа повертностных вод и донных отложений. – Гидрометеоиздат, 1983.

11. Унифицированные методы исследования качества вод: Часть III. Mетоды биологического анализа вод, М., 1977.

12. Унифицированные методы исследования качества вод: Часть III. Mетоды биологического анализа вод, М., 1983.

______________

PATVIRTINTA

Lietuvos Respublikos aplinkos

ministro 2003 m. gruodžio 24 d.

įsakymu Nr. 708

ZOOPLANKTONO TYRIMO METODIKA

PAVIRŠINIO VANDENS TELKINIUOSE

LAND 55-2003

1. Taikymo sritis

Šiame normatyviniame dokumente pateikiama paviršinio vandens telkinių tyrimo metodika pagal zooplanktoną.

2. Normatyvinės nuorodos

2.1. LST 1426:1996. Vandens savybės. Terminai ir apibrėžimai.

2.2. LST EN 25667-2:2001. Vandens kokybė. Mėginių ėmimas. 2 dalis. Nurodymai, kaip imti mėginius (ISO 5667-2:1991).

2.3. LST EN ISO 5667-3:2001. Vandens kokybė. Mėginių ėmimas. 3 dalis. Nurodymai, kaip konservuoti ir gabenti mėginius (ISO 5667-3:1994).

2.4. Lietuvos HN 23:2001. Kenksmingų cheminių medžiagų koncentracijų ribinės vertės darbo aplinkos ore. Bendrieji reikalavimai.

2.5. LST EN ISO 3696:1996. Analizės vanduo. Apibūdinimas ir bandymo metodai.

3. Terminai ir apibrėžimai

3.1. Paviršinis vanduo – žemės paviršiumi tekantis arba stovintis vanduo.

3.2. Zooplanktonas – vandenyje plūduriuojančių arba skendinčių organizmų (daugiausia smulkių gyvūnų, tačiau gali būti ir stambesnių, menkai gebančių judėti) visuma.

3.3. Biocenozė – sausumos arba vandens baseino plote gyvenančių augalų, gyvūnų ir mikroorganizmų visuma, tarp kurių nuolat vyksta medžiagų ir energijos apytaka ir yra susiformavę palyginti pastovūs tarpusavio santykiai bei ryšiai.

3.4. Distrofinis vanduo – mažai biogeninių ir daug humusinių medžiagų turintis vanduo.

3.5. Eutrofinis vanduo – vanduo, kuriame palankios gyvūnams gyventi sąlygos, gausu biogeninių elementų.

3.6. Saprobiškumas – organizmų gebėjimas gyventi organinėmis medžiagomis užterštuose vandenyse.

3.7. Saprobiškumo indeksas (S) – skaitmeninis dydis vandens telkinio biocenozei apibūdinti, vartojamas telkinio biologinei kokybei nurodyti.

3.8. Saprobinis valentingumas – rūšies gebėjimo prisitaikyti prie aplinkos sąlygų laipsnis.

3.9. Mėginio konservavimas – tiriamųjų mėginio savybių išlaikymas per laikotarpį nuo mėginio paėmimo iki analizavimo, pridedant reagentų ir/arba keičiant fizines sąlygas.

3.10. Sedimentacija – organizmų nusodinimas.

3.11. Biomasė – vienos organizmų rūšies, rūšių grupės ar visos bendrijos individų masė, tenkanti ploto ar tūrio vienetui; dažniausiai reiškiama g/m², g/m³, kg/ha drėgnos ar sausos medžiagos.

3.12. Taksonas – sistematinė (taksonominė) kategorija, apimanti giminingų organizmų grupę; augalų, gyvūnų arba grybų sistematikos vienetas: rūšis, gentis, šeima, klasė ir t. t.

4. Principas

Rūšinė sudėtis ir kiekybinis zooplanktono organizmų išsivystymo laipsnis yra jautrus vandens kokybės indikatorius. Zooplanktono bendrijos pasižymi rūšinės sudėties pastovumu. Aplinkos sąlygų pasikeitimas daro įtaką rūšinei sudėčiai, kiekybiniam išsivystymo lygiui, atskirų taksonominių grupių santykiui ir zooplankterių populiacijų struktūrai. Todėl zooplanktonas gali patikimai atspindėti esamą vandens telkinio būklę.

Vandens kokybė nustatoma pagal:

a) zooplanktono rūšinę sudėtį;

b) kiekvienos rūšies pasitaikymo dažnumą;

c) individų gausumą ir biomasę.

Įvertinant vandens kokybę pagal zooplanktono tyrimo rezultatus, naudojamas R. Pantle ir H. Buck metodas, modifikuotas V. Sladečeko [2.3]. Pagal šį metodą zooplanktono tyrimo rezultatai išreiškiami skaičiumi ir leidžia palyginti tarpusavyje įvairių vandens telkinių kokybės būklę.

5. Reagentai ir medžiagos

Leidžiama naudoti tik apibrėžtos analizinės kvalifikacijos reagentus ir distiliuotą vandenį, atitinkantį 3 kokybės laipsnį (2.5).

5.1. Lugol'o tirpalas, skirtas mikroskopavimui;

5.2. formalinas, 40 % stabilizuotas formaldehido tirpalas;

5.3. kalio jodidas (KI);

5.4. jodas kristalinis (I₂);

5.5. natrio bikarbonatas (NaHCO₃);

5.6. kedro aliejus, skirtas mikroskopavimui.

6. Naudojama įranga, prietaisai ir indai

6.1. Batometras: Rutnerio, Molčanovo arba kitos konstrukcijos;

6.2. mikroskopas, didinantis iki 1000 kartų;

6.3. binokuliarinis, stereoskopinis mikroskopas, didinantis iki 100 kartų;

6.4. okuliarinis mikrometras;

6.5. okuliaro matavimo skalė;

6.6. objektinis mikrometras;

6.7. planktoninis Apšteino tinklelis (akutės dydis 0,064-0,081 mm);

6.8. Bogorovo kamera;

6.9. 50 ml pipetės;

6.10. guminės kriaušės (50, 100 cm³ talpos);

6.11. graduoti stikliniai vamzdeliai, ne mažiau kaip 3 mm vidinio skersmens;

6.12. objektiniai stikleliai (2 mm storio);

6.13. dengiamieji stikleliai (0,17 mm storio);

6.14. preparavimo adatėlės;

6.15. pincetai;

6.16. 10 l talpos emaliuotas arba plastmasinis kibiras;

6.17. tamsaus stiklo graduoti buteliukai, 100 ml talpos;

6.18. cheminės stiklinaitės, 50-100 ml talpos;

6.19. plastmasinė dėžė, skirta indams su mėginiais transportuoti;

6.20. batisto audinys, servetėlės;

6.21. mėginių registracijos žurnalas;

6.22. standus popierius etiketėms;

6.23. lininiai, sintetiniai siūlai, gumelės arba lipni juosta etiketėms pritvirtinti;

6.24. pieštukas.

7. Darbų sauga

Atliekant tyrimus reikia vadovautis bendraisiais darbų saugos reikalavimais.

8. Mėginys

8.1. Indų paruošimas

Indai, į kuriuos pilamas tiriamasis mėginys, turi būti stikliniai, išplauti nejoninių ir anijoninių ploviklių mišiniu ir išskalauti vandeniu.

8.2. Konservavimo tirpalų paruošimas

8.2.1. Lugol'o tirpalo paruošimas

8.2.2. Neutralaus formalino paruošimas

Formalinas neutralizuojamas lašinant sotų natrio bikarbonato tirpalą, nuolat maišant magnetine maišykle iki neutralios reakcijos.

8.3. Mėginių tipai ir jų ėmimas

Mėginiai imami pagal LST EN 25667-2:2001 (2.2).

Zooplanktono kiekybiniams mėginiams semti naudojamas planktoninis Apšteino tinklelis. Gali būti ir kitų konstrukcijų [6, 11].

8.3.1. Mėginio ėmimas upėse

Upėje vanduo semiamas prieš srovę 0,5 m gylyje 10 litrų talpos kibiru, filtruojamas per Apšteino tinklelį. Iš viso perfiltruojama 50 l vandens (5 x 10 l). Zooplanktono mėginys koncentruojamas Apšteino tinklelio stiklinaitėje, iš kurios turinys, atsukus kranelį, išpilamas į 100 ml talpos graduotą tamsaus stiklo buteliuką [6].

8 3.2. Mėginio ėmimas ežeruose ir vandens saugyklose

Sudėtiniai mėginiai imami batometru.

Kiekvienoje stotyje sudėtiniai mėginiai batometru imami tolygiais intervalais nuo ežero paviršiaus iki dugno, kaip parodyta 1 lentelėje.

Zooplanktono sudėtinio mėginio dalių skaičius ir vandens gylis

1 lentelė

Ežero gylis

Sudėtinio mėginio dalių skaičius

Horizontai, kuriuose imamos sudėtinio mėginio dalys

<2 m

2-4 m

4-8 m

8-15 m

>15 m

po mėginį iš kas trečio metro

(prieš tai paėmus visus mėginius iki 15 m gylio)

0,2; 1,5

0,2; 2,0; 3,5

0,2; 2,5; 4,5; 7,5

0,2; 3,5; 7,0; 10,5; 14,5

0,2; 3,5; 7,0; 10,5; 14;

18; 21; 24; 27; 30; 33; 36; 39; 42 ir t. t.

Pirmoji sudėtinio mėginio dalis visada paimama iš 0,2 m gylio, o paskutinė – 0,5 m virš ežero dugno.

Sudėtinio mėginio dalys iš visų gylių supilamos kartu į vieną indą, vėliau smarkiai maišant paimamas tam tikras kiekis filtravimui.

Imamas mėginio kiekis priklauso nuo zooplanktono gausumo, tad „maistinguose“ (eutrofiniuose) ežeruose paimama 4,5 l filtravimui, o „nemaistinguose“ (distrofiniuose) ežeruose – 9 l filtravimui.

Perfiltruotą vandenį iš stiklinaitės, esančios Apšteino tinkliuko gale, supilame į 100 ml buteliuką, praskalautą vandens telkinio vandeniu.

8.4. Mėginio konservavimas ir laikymas

Paimtas zooplanktono mėginys iš karto konservuojamas Lugol'o tirpalu, imant jo 1 % mėginio tūrio arba 40 % formaldehidu (formalinu), imant jo 4 % mėginio tūrio.

Naudojamas formalinas turi būti be nuosėdų, be to, rekomenduojama mėginius fiksuoti neutralizuotu formalinu, kadangi, esant rūgščiai terpės reakcijai, gali ištirpti ypač švelnūs zooplanktono individų šarveliai.

Prie buteliukų pritvirtinamos etiketės, užrašomas mėginio numeris, telkinio pavadinimas, vieta, data, vandens temperatūra ir kiti duomenys bei pastebėti gamtos reiškiniai.

Zooplanktono mėginiai saugomi tamsioje vietoje ne mažiau kaip 10 parų, kad visiškai įvyktų zooplanktono sedimentacija.

9. Procedūra

9.1. Mėginio paruošimas tyrimui

Po zooplanktono sedimentacijos (t. y. 10 parų) specialiai paruošta pipete (jos gale yra pritvirtintas tinklelis, kurio akutės dydis 0,064-0,081 mm), naudojantis gumine kriauše, nusiurbiamas viršutinis tiriamojo mėginio vandens sluoksnis. Graduotame buteliuke paliekama 10 ml mėginio tūrio, kuris visas supilamas į Bogorovo kamerą.

9.2. Tyrimo seka

9.2.1. Rūšinės sudėties nustatymas

Bogorovo kameroje esantis zooplanktono mėginys peržiūrimas binokuliariniu stereoskopiniu mikroskopu. Tiksliam rūšies nustatymui individas pipete perkeliamas ant objektinio stiklelio, kuris uždengiamas dengiamuoju stikliuku, ir preparatas peržiūrimas mikroskopu, didinančiu iki 1000 kartų. Zooplanktono rūšys identifikuojamos naudojantis vadovais apibūdintojais [7-10]. Gali būti naudojami ir kiti vadovai apibūdintojai.

9.2.2. Kiekybinis zooplanktono apskaitos metodas

Naudojant binokuliarinį stereoskopinį mikroskopą, identifikuoti organizmai suskaičiuojami Bogorovo kameroje. Duomenys įrašomi į blanką.

Paprastai visą zooplanktono mėginį supilame į Bogorovo kamerą, peržiūrime ir skaičiuojame neskiestą.

Tačiau, jei individų mėginyje yra gausiai ir neįmanoma jų suskaičiuoti, mėginys skiedžiamas 10-100 kartų distiliuotu vandeniu taip:

tiriamas vanduo iš Bogorovo kameros išpilamas į švarią stiklinaitę, iš jos pipete paimamas 1 ml turinio ir pilamas į kitą stiklinaitę, kurioje yra įpilta 9 ml distiliuoto vandens. Viskas gerai sumaišoma ir vėl supilama į Bogorovo kamerą. Skiedžiama tiek kartų, kol tampa įmanoma suskaičiuoti zooplanktono individus. Tada atskirai suskaičiuojami kiekvienos rūšies individai, nustatomas zooplanktono gausumas viename m³.

Organizmų gausumas 1 m³ suskaičiuojamas pagal formulę:

x = n×1000,

kur:

x – individų skaičius 1 m³ vandens, vnt./m³;

n – individų skaičius mėginyje, vnt.;

V – perfiltruoto vandens kiekis, l.

Pavyzdžiui, jei 10 ml tiriamo vandens rasti du zooplanktono individai, tai:

x = 2×1000 = 40 vnt./m³

Jeigu mėginys nustatymo metu buvo skiedžiamas, į formulę įvedamas skiedimo skaičius.

9.2.3. Zooplanktono biomasės nustatymas

Individuali zooplanktono individų biomasė yra apskaičiuojama naudojantis literatūra [1, 4, 5, 11].

9.2.4. Mėginio saprobiškumo indekso nustatymas

Vienas iš metodų, naudojamas vandens kokybei nustatyti pagal zooplanktoną, yra R. Pantle ir H. Buck indikatorinių organizmų metodas, modifikuotas V. Sladečeko [2, 3].

Šio metodo dėka įvairių vandens telkinių tyrimo rezultatus, išreikštus saprobiškumo indeksu, galime palyginti tarpusavyje.

Saprobiškumo indekso (S) nustatymui reikia žinoti kiekvienos mėginyje rastos rūšies indikatorinę reikšmę ir jos sutinkamumo dažnumą tiriamajame mėginyje. Indikatorinės zooplanktono individų reikšmės (s) nustatomos naudojantis saprobinių organizmų sąrašais [12, 13], o rūšies sutinkamumo dažnumas (h) apskaičiuojamas naudojantis šešių pakopų sutinkamumo dažnumo skale (2 lentelė).

Indikatorinių rūšių sutinkamumo dažnumo skalė

2 lentelė

Rūšies sutinkamumo dažnumas	Santykinis vienos rūšies individų skaičius nuo bendro individų skaičiaus, išreikštas procentais, %	Rūšies sutinkamumo dažnumas, h
Labai retai	£1	1
Retai	2-3	2
Neretai	4-10	3
Dažnai	11-20	5
Labai dažnai	21-40	7
Masiškai	41-100	9

Saprobiškumo indeksas (S) skaičiuojamas pagal formulę:

å (s ´ h)

S = ---------------------,

å h

kur:

s – indikatorinio organizmo saprobinis valentingumas;

h – indikatorinio organizmo sutinkamumo dažnumas.

Saprobiškumo indeksas (S) apskaičiuojamas 0,01 dalies tikslumu. Pagal mėginio saprobiškumo indeksą nustatoma vandens telkinio ar tirtos vietos saprobiškumo zona.

Saprobiškumo zonų lentelė

3 lentelė

Saprobiškumo zona	Saprobiškumo indekso skaitinės reikšmės
Ksenosaprobinė (x)	nuo 0 iki 0,50
Oligosaprobinė (o)	nuo 0,51 iki 1,50
Beta-mezosaprobinė (b)	nuo 1,51 iki 2,50
Alfa-mezosaprobinė (a)	nuo 2,51 iki 3,50
Polisaprobinė (p)	nuo 3,51 iki 4,00

Saprobiškumo indekso skaičiavimo pavyzdys pateiktas 4 lentelėje:

4 lentelė

	Rūšies pavadinimas	Saprobiš-kumo zona	Rūšies saprobinis valentingumas, s	Rūšies sutinkamumo dažnumas, h	s × h
Rotatoria	Keratella cochlearis	b-0	1,55	1	1,55
„	Keratella quadrata	0-b	1,55	1	1,55
„	Lecane lunaris	0-b	1,35	5	6,75
„	Brachionus calyciflorus	b-a	2,50	2	5,00
„	Synchaeta pectinata	b-0	1,65	2	3,30
„	Asplanchna priodonta	0-b	1,55	1	1,55
Cladocera	Daphnia longispina	b	2,00	7	14,00
„	Chydorus sphaericus	b	1,75	2	3,50
„	Bosmina longirostris	0-b	1,55	3	4,65
Copepoda	Cyslops strenuus	b-a	2,25	2	4,50
„	Cyclops furcifer	0	1,20	2	2,40
				S 28	S 48,75

å (s·h) 48,75

S = ^{______________}= ^____________= 1,74,

å h 28

S = 1,74

Pagal gautą mėginio saprobiškumo indekso skaitinę reikšmę (S-1,74) nustatome tirtos vietos saprobiškumo zoną (3 lentelė) [11].

10. Duomenų pateikimas

Zooplanktono tyrimų duomenys pateikiami lentelėse ir turi apimti šią informaciją:

mėginio numeris;

telkinio pavadinimas;

mėginio ėmimo vieta;

data, val.;

vandens temperatūra;

mėginyje nustatytų rūšių sąrašas;

nustatytas kiekvienos rūšies individų skaičius;

kiekvienos rūšies saprobinis valentingumas, (s);

rūšies sutinkamumo dažnumas, (h);

kiekvienos rūšies individų biomasė;

visų rastų mėginyje rūšių skaičius;

bendras individų gausumas mėginyje, išreikštas tūkst. vnt. m³;

visų rastų mėginyje individų biomasė, išreikšta mg³;

bendras mėginio saprobiškumo indeksas (S).

BIBLIOGRAFIJA

1. Dumont H. J., Van de Velde I. and Dumont S. The dry Weight Estimate of biomass in a selection of Cladocera, Copepoda and Rotifera from the plankton, periphyton and benthos of continenetal waters. – Oecologia (Berl) 1975, 19, 75 – 97.

2. Pantle R., Buck H. Die biologische Uberwachung der Gewasser und die Darstellung der Ergebnisse. – Gas und Wasserfach, 1955, H. 96 (18).

3. Sladeček V. System of Water Quality from the Biological point of view. – Arch. Hydrobiol. 1973, Bein. 7, 1-218.

4. Балушкина Е. В., Винберг Г. Г. Зависимость между длиной и массой тела планктонных ракообразных. – В кн.: Экспериментальные и полевые исследования биологических основ продуктивности озер. – Л., изд. АН СССР, 1979, с. 58-72.

5. Балушкина Е. В., Винберг Г. Г. Зависимость между массой и длиной тела у планктонных животных. – В кн.: Общие основы изучения водных экосистем. Л., Наука, 1979, с. 169-172.

6. Киселев И. А. Планктон морей и континентальных водоемов. – Изд. «Наука» Л., 1969, т. I.

7. Кутикова Л. А. Коловратки фауны СССР (Rotatoria). – Ленинград, 1970.

8. Мануйлова Е. Ф. Ветвистоусые рачки (Cladocera) фауны СССР. – Москва, 1960.

9. Рылов В. М. Фауна СССР. Ракообразные (Cyclopoida пресных вод). т. III, вып. 3. – Зоологический институт Академии Наук СССР, 1948.

10. Определитель пресноводных беспозвоночных Европейской части СССР. – Ленинград, 1977.

11. Руководство по методам гидробиологического анализа поверхностных вод и донных отложений. – Гидрометеоиздат, 1983.

12. Унифицированные методы исследования качества вод: Часть III. Mетоды биологического анализа вод, М., 1977.

13. Унифицированные методы исследования качества вод: Часть III. Mетоды биологического анализа вод, М., 1983.

______________

Pakeitimai: