Suvestinė redakcija nuo 2014-05-01
Įsakymas paskelbtas: Žin. 2000, Nr. 95-3002, i. k. 1002250ISAK00000576
LIETUVOS RESPUBLIKOS SVEIKATOS APSAUGOS MINISTRO
ĮSAKYMAS
DĖL IMUNOHEMATOLOGINIŲ TYRIMŲ ATLIKIMO TVARKOS PATVIRTINIMO
2000 m. spalio 25 d. Nr. 576
Vilnius
1. Tvirtinu:
3. Laikau netekusiais galios:
3.1. TSRS sveikatos apsaugos ministerijos 1988 metų Skystų diagnostinių coliklonų anti-A ir anti-B žmogaus kraujo grupių ABO nustatymui naudojimo instrukciją;
3.2. TSRS sveikatos apsaugos ministerijos 1972 metų Agliutinogenų, agliutininų ir antieritrocitinių imuninių antikūnų tyrimo kraujuje metodinius nurodymus;
3.3. TSRS sveikatos apsaugos ministerijos 1974 metų Kraujo chimeros nustatymo ABO ir Rh sistemose instrukciją;
3.4. TSRS sveikatos apsaugos ministerijos 1974 metų Imuninių ABO sistemos antikūnų nustatymo metodines rekomendacijas;
4. P a v e d u įsakymo vykdymą kontroliuoti viceministrui pagal veiklos sritį
Punkto pakeitimai:
Nr. V-306, 2014-03-03, paskelbta TAR 2014-03-06, i. k. 2014-02814
PATVIRTINTA
l. e. sveikatos apsaugos ministro pareigas
2000 10 25 įsakymu Nr. 576
1 priedas
IMUNOHEMATOLOGINIŲ TYRIMŲ ATLIKIMO TVARKA
I. SKYRIUS BENDROSIOS NUOSTATOS
Pakeistas skyriaus pavadinimas:
Nr. V-306, 2014-03-03, paskelbta TAR 2014-03-06, i. k. 2014-02814
1. Ši tvarka reglamentuoja imunohematologinių tyrimų atlikimą. Ji skirta kraujo komponentų transfuzijų saugumui užtikrinti.
2. Imunohematologiniai tyrimai šiame įsakyme – tai donorui ir recipientui atliekami tyrimai:
II. SKYRIUS RECIPIENTO IMUNOHEMATOLOGINIS IŠTYRIMAS
Pakeistas skyriaus pavadinimas:
Nr. V-306, 2014-03-03, paskelbta TAR 2014-03-06, i. k. 2014-02814
3. Recipiento imunohematologiniai tyrimai atliekami dviem etapais:
3.1. nustatoma recipiento kraujo grupė pagal ABO sistemą:
3.1.1. recipiento identifikacijai šis tyrimas atliekamas dalyvaujant tiriamajam (stacionare – „prie ligonio lovos“),
3.1.4. tyrimo atlikimą stebi ir rezultatą įvertina gydantis (budintis) gydytojas, laboratorijos gydytojas arba medicinos biologas,
3.1.5. tyrimo rezultatas įrašomas į ligos istoriją arba ambulatorinę kortelę ir į formą Nr. 200/a, patvirtinant 3.1.3 ir 3.1.4 punktuose nurodytų darbuotojų asmens spaudu ir parašu,
3.2. recipiento kraujo grupės pagal ABO sistemos antigenus ir rezus priklausomybės nustatymas:
4. Recipiento kraujo bandinių paėmimo imunohematologiniams tyrimams ir pristatymo į laboratoriją tvarka:
4.1. recipiento kraujo grupei pagal ABO sistemos antigenus ir rezus priklausomybei nustatyti imamas veninis kraujas, kuris surenkamas į du sausus, švarius mėgintuvėlius arba į vakuuminius mėgintuvėlius be antikoagulianto arba su juo;
4.2. kraują iš venos ima bendrosios praktikos slaugytoja. Prieš imdama kraują ji turi paklausti recipiento vardo, pavardės. Ant mėgintuvėlio etiketės užrašomi recipiento duomenys, po to imamas kraujas iš venos;
4.3. etiketėje užrašoma:
4.3.4. pirmuoju tyrimu (prie ligonio lovos) nustatytos kraujo grupės pagal ABO sistemos antigenus rezultatas,
4.3.6. asmens sveikatos priežiūros įstaigos pavadinimas, jei kraujo bandinys siunčiamas į kitą asmens sveikatos priežiūros įstaigą,
5. Bandiniai iš skyriaus ar kabineto turi būti pristatyti į laboratoriją ne vėliau kaip per 2 valandas nuo paėmimo, juos laikant kambario temperatūroje. Nesant galimybės bandinį pristatyti nurodytu laiku, jį reikia saugoti +2 – +8°C temperatūroje iki 24 valandų.
6. Kartu su kraujo bandiniu į laboratoriją pristatoma forma Nr. 200/a „Siuntimas laboratoriškai ištirti ir rezultatai“. Visos siuntimo grafos turi būti užpildytos. Siuntime turi būti nurodytas pirmojo tyrimo kraujo grupės pagal ABO sistemos antigenus rezultatas bei bendrosios praktikos slaugytojos ir gydančio (budinčio) gydytojo parašas ir spaudas.
7. Asmens sveikatos priežiūros įstaigų padaliniuose turi būti pildomas Ėminių surinkimo, pristatymo į laboratoriją registracijos žurnalas (Asmens sveikatos priežiūros įstaigų laboratorijų kokybės reikalavimų aprašo, patvirtinto Lietuvos Respublikos sveikatos apsaugos ministro 2007 m. gruodžio 5 d. įsakymu Nr. V-998 ,,Dėl asmens sveikatos priežiūros įstaigų laboratorijų veiklos vertinimo“, 3 priedas)
Punkto pakeitimai:
Nr. V-306, 2014-03-03, paskelbta TAR 2014-03-06, i. k. 2014-02814
8. Laboratorijos darbuotojas užpildo Bandinių surinkimo ir pristatymo į laboratoriją registravimo žurnalą.
9. Imunohematologiniams tyrimams atlikti naudojami Lietuvoje registruoti reagentai. Jie naudojami pagal gamintojo rekomendacijas.
10. Recipiento kraujo grupės pagal ABO sistemos antigenus nustatymo laboratorijoje tvarka:
10.1. recipiento kraujo grupė nustatoma iš dviejų kraujo bandinių. Rekomenduojama tyrimą atskirai atlikti dviem laboratorijos darbuotojams (skubos tvarka gali atlikti vienas darbuotojas), naudojant dviejų skirtingų serijų arba gamintojų reagentus, kryžminės reakcijos būdu;
10.2. grupiniai antigenai nustatomi naudojant IgM klasės antikūnus, tiesioginiu agliutinacijos testu. Tam tikslui naudojami monokloniniai reagentai anti-A, anti-B, anti-A, B;
10.3. tyrimo rezultatai turi sutapti. Sutapus tyrimo rezultatams, tyrimą atlikę darbuotojai įrašo rezultatą į F200/a, pasirašo ir patvirtina asmens spaudais;
11. Recipiento rezus Rh(D) priklausomybės nustatymas:
11.1. tyrimą atskirai atlieka du laboratorijos darbuotojai, naudojant dviejų skirtingų gamintojų arba dviejų skirtingų serijų reagentus (skubos tvarka gali atlikti vienas darbuotojas);
11.2. nustatomas recipiento Rh(D) antigenas. Kiti recipiento Rh sistemos antigenai nustatomi tik pagal indikacijas: atliekant kraujo ir jo komponentų parinkimą ligoniui, kurio kraujyje yra imuninių antikūnų; ruošiant kaulų čiulpų transplantacijai ir kt.;
11.3. Rh(D) antigenas nustatomas naudojant IgM klasės antikūnus, tiesioginiu agliutinacijos testu. Tam naudojamas IgM anti-D monokloninis reagentas;
11.4. jeigu recipiento eritrocitų tiesioginis testas su IgM anti-D monokloniniu reagentu teigiamas, recipiento Rh(D) – teigiamas. Jeigu reakcijos rezultatas neigiamas, recipiento Rh(D)- neigiamas. Recipientų Rh(D) antigeno variantai ir kategorijos įvertinami tik pagal indikacijas;
11.5. nustatant Rh(D) priklausomybę, turi būti atliekama kiekvieno Rh(D) tyrimo kontrolė. Tai atliekama tuo pačiu metodu, naudojant neigiamos kontrolės reagentą. Šios reakcijos rezultatas turi būti neigiamas. Esant teigiamai reakcijai, Rh(D) antigeno nustatymo rezultatas nevertinamas. Tokiu atveju tyrimas kartojamas iš naujo;
11.6. kiekvieną dieną pradedant darbą laboratorijoje atliekama visų reagentų, naudojamų kraujo grupės nustatymui, kontrolė. Monokloninių reagentų anti-A, anti-B, anti-A, B ir anti-D kontrolė atliekama su firmos-gamintojos standartiniais eritrocitais. Kontrolės rezultatai registruojami Kraujo grupių ABO ir Rh(D) kontrolės registravimo žurnale (formoje Nr. 176/a);
12. Imunohematologiniai tyrimai, atliekami prieš transfuziją:
12.1. prieš kraujo komponentų transfuziją laboratorijoje nustatomi recipiento imuniniai antieritrocitiniai antikūnai, atliekama jų identifikacija, recipiento ir donoro kraujo suderinamumo mėginiai;
12.2. šiems imunohematologiniams tyrimams atlikti į laboratoriją pristatomas atskiras recipiento veninio kraujo bandinys su etikete. Etiketės užpildymo tvarka nurodyta 4.3 punkte;
12.3. į laboratoriją kartu su kraujo bandiniu pristatomas užpildytas Eritrocitų masės (konservuoto kraujo) užsakymo ir parinkimo lapas (forma Nr. 474/a). Šiame lape turi būti: bendrosios praktikos slaugytojos, paėmusios kraujo bandinį, vardas ir pavardė, gydančio (budinčio) gydytojo, stebėjusio bandinio paėmimą, vardas, pavardė, parašas ir spaudas.
13. Imuninių antikūnų nustatymas:
13.1. recipiento imuniniai antikūnai nustatomi prieš kiekvieną transfuziją. Tyrimas atliekamas netiesioginio antiglobulino testo būdu, naudojant ne mažiau kaip dviejų O kraujo grupės donorų eritrocitus, kurių fenotipe turi būti šie antigenai: C; c; D; E; e; K; k; Fya; Fyb; Jka; Jkb; S; s; M; N; P; Lea ir Leb;
13.2. reakcijai naudojamas polispecifinis anti-human globulinas (AHG). Tyrimas atliekamas griežtai prisilaikant gamintojo instrukcijos;
13.3. atliekama kiekvieno neigiamo rezultato AHG kontrolės reakcija* *. Reakcijos rezultatas registruojamas Kumbso reakcijos kontrolės registracijos žurnale (formoje Nr. 177/a);
14. Imuninių antieritrocitinių antikūnų identifikacija:
14.1. radus recipiento serume imuninių antikūnų, būtina juos identifikuoti
Punkto pakeitimai:
Nr. V-306, 2014-03-03, paskelbta TAR 2014-03-06, i. k. 2014-02814
14.2. tyrimas atliekamas netiesioginio antiglobulininio testo būdu, naudojant ne mažiau, kaip aštuonių O kraujo grupės donorų eritrocitus, turinčius šiuos antigenus: C; C; c; D; E; e; K; k; Kp; Fya; Fyb; Jka; Jkb; S; s; Lea; Leb; M; N; P ir Lu. Reakcijai naudojamas polispecifinis anti-human globulinas. Tyrimas atliekamas griežtai prisilaikant gamintojo instrukcijos;
15. Recipiento ir donoro kraujo suderinamumo mėginių atlikimo tvarka:
15.1. suderinamumo mėginiai laboratorijoje atliekami trimis etapais:
15.1.1. patikrinama pristatyto recipiento kraujo ir donoro eritrocitų vieneto (jo atskiro fragmento) kraujo grupė pagal ABO sistemos antigenus ir Rh(D),
15.1.2. atliekamas kambario temperatūros mėginys. Šio tyrimo rezultatas turi būti neigiamas (nėra agliutinacijos bei hemolizės),
15.2. suderinamumo mėginiams naudojamas tas pats recipiento kraujo bandinys, iš kurio buvo nustatyti imuniniai antikūnai;
15.3. jeigu antikūnų nustatymo metu imuninių antikūnų rasta nebuvo, transfuzijai parenkamas donoro eritrocitų masės (konservuoto kraujo) vienetas tos pačios kaip recipiento kraujo grupės ABO ir Rh(D);
15.4. suderinamumo mėginiui naudojamas donoro eritrocitų masės (konservuoto kraujo) vieneto specialus fragmentas;
15.5. tyrimas atliekamas naudojant netiesioginį antiglobulino testą pagal gamintojo metodiką. Atliekama kiekvieno neigiamo rezultato AHG kontrolės reakcija**;
15.6. neigiamas netiesioginio antiglobulininio testo rezultatas reiškia, kad ligonio serume nėra imuninių antikūnų prieš parinktų transfuzijai donoro eritrocitų antigenus. Šis eritrocitų masės (konservuoto kraujo) vienetas gali būti perpiltas recipientui;
15.7. suderinamumo mėginio rezultatas registruojamas Suderinamumo mėginių registracijos žurnale (formoje Nr. 178/a);
15.8. eritrocitų masės (konservuoto kraujo), tinkamos transfuzijai, vieneto numeris įrašomas formoje Nr. 474/a, pasirašant tyrimą atlikusiam specialistui;
15.9. jeigu antikūnų nustatymo metu ligonio serume buvo rasta imuninių antikūnų ir buvo nustatytas jų specifiškumas, transfuzijai parenkamas vienetas, kurio eritrocitų fenotipe nėra antigeno, atitinkančio rastą antikūną;
15.10. toliau atliekami suderinamumo mėginiai: kambario temperatūros ir netiesioginis antiglobulino testas;
16. Donoro ir recipiento eritrocitų fenotipavimas:
16.1. fenotipavimas atliekamas eritrocitų masės (konservuoto kraujo) parinkimo metu, jeigu recipiento serume buvo rasta ir identifikuota antikūnų;
III SKYRIUS
DONORO IMUNOHEMATOLOGINIS IŠTYRIMAS
17. Pirmą kartą duodančio kraujo / kraujo sudėtinių dalių donoro imunohematologiniai tyrimai:
17.1. donoro kraujo grupės pagal ABO ir RhD bei Kell antigeno tyrimai atliekami dviem skirtingais metodais iš dviejų skirtingų ėminių;
17.2. pirmasis ėminys gali būti iš kapiliarinio, veninio kraujo, kraujo / kraujo komponento surinkimo sistemos ar kraujo komponento segmento;
17.3. pirmasis tyrimo metodas:
17.3.1. donoro kraujo grupei pagal ABO sistemos antigenus nustatyti naudojami monokloniniai IgM klasės anti-A, anti-B, anti-A,B reagentai;
17.3.4. atliekant tyrimus su monokloniniais reagentais būtina naudoti neigiamos kontrolės reagentą (jo tyrimo rezultatas visada turi būti neigiamas);
17.4. antrasis ėminys turi būti paimtas iš kraujo / kraujo komponento surinkimo sistemos, tyrimai atliekami imunohematologiniu analizatoriumi;
17.5. antrasis tyrimo metodas (imunohematologiniu analizatoriumi):
17.5.1. donoro kraujo grupė pagal ABO sistemos antigenus nustatoma kryžminiu būdu, naudojant monokloninius IgM klasės reagentus anti-A, anti-B, anti-A,B ir standartinius A ir B grupių eritrocitus;
17.5.2. RhD antigenas nustatomas naudojant IgM klasės monokloninius reagentus tiesioginės agliutinacijos testu;
17.5.3. donorų kraujo mėginiai, kuriuose su IgM klasės reagentais nerasta RhD antigeno, turi būti testuojami dėl RhD antigeno variantų ir kategorijų. Šie tyrimai atliekami su IgG klasės arba IgM + IgG klasės reagentais netiesioginiu antiglobulininiu testu;
17.5.4. donoro RhD antigenas įvertinamas kaip neigiamas, jeigu reakcijos su IgM ir IgG arba IgM+IgG klasės reagentais rezultatai yra neigiami;
17.5.5. jeigu donoro eritrocituose rasta RhD antigeno arba D antigeno kategorijų ar variantų, RhD antigenas įvertinamas kaip teigiamas;
17.6. 17.5.1–17.5.6 papunkčiuose nurodytus tyrimus atlieka kvalifikuotas klinikos laborantas / technologas, rezultatą įvertina – kvalifikuotas laboratorijos darbuotojas;
18. Jei kraujo grupė pagal ABO ir RhD nustatyta ankstesnių donacijų toje pačioje kraujo donorystės įstaigoje metu, antrosios bei vėlesnių donacijų metu donoro kraujo grupė nustatoma kraujo donorystės įstaigos vadovo nustatyta tvarka iš vieno ėminio pirmuoju ir (arba) antruoju tyrimo metodu. Jei Kell antigenas buvo nustatytas ankstesnių donacijų toje pačioje kraujo donorystės įstaigoje metu, antrosios bei vėlesnių donacijų metu jo nustatyti neprivaloma.
19. Donoro, duodančio kraujo / kraujo sudėtinių dalių pirmą kartą, ir kitais teisės aktų nustatytais atvejais imuniniai eritrocitų antikūnai nustatomi netiesioginiu antiglobulino testu, naudojant ne mažiau kaip dviejų O kraujo grupės donorų tipuotus eritrocitus, kurie užtikrintų visų kliniškai svarbių antikūnų aptikimą.
21. Donorų imunohematologinių tyrimų rezultatai dokumentuojami raštu ir (arba) skaitmeninėje laikmenoje kraujo donorystės įstaigos vadovo nustatyta tvarka, užtikrinant privalomos informacijos pateikimą ir tinkamas duomenų apsaugos priemones.
Skyriaus pakeitimai:
Nr. V-306, 2014-03-03, paskelbta TAR 2014-03-06, i. k. 2014-02814
PATVIRTINTA
l. e. sveikatos apsaugos ministro pareigas
2000 10 25 įsakymu Nr. 576
2 priedas
Forma Nr. 176/a
KRAUJO GRUPIŲ ABO IR Rh (D) KONTROLĖS REGISTRAVIMO ŽURNALAS
Eilės Nr |
Data |
Kontroliniai reagentai |
Serijos Nr. |
Šifras |
Galiojimo laikas |
Anti-A serijos Nr. Šifras Galiojimo laikas |
Anti-B serijos Nr. Šifras Galiojimo laikas |
Anti-AB serijos Nr. Šifras Galiojimo laikas |
Anti-D serijos . Nr. Šifras Galiojimo laikas |
Rezultatas |
Tyrimus atlikusio darbuotojo vardas, pavardė, parašas |
______________
PATVIRTINTA
l. e. sveikatos apsaugos ministro pareigas
2000 10 25 įsakymu Nr. 576
3 priedas
Forma Nr. 177/a
KUMBSO REAKCIJOS KONTROLĖS ŽURNALAS
Eilės Nr. |
Data |
Kontroliniai reagentai |
Serijos Nr. |
Šifras |
Galiojimo laikas |
Recipiento vardas, pavardė |
Donoro eritrocitų masės vieneto fragmento Nr. |
Rezultatas |
Tyrimą atlikusio darbuotojo vardas,pavardė, parašas |
______________
PATVIRTINTA
l. e. sveikatos apsaugos ministro pareigas
2000 10 25 įsakymu Nr. 576
4 priedas
Forma Nr. 178/a
SUDERINAMUMO MĖGINIŲ REGISTRACIJOS ŽURNALAS
Registravimo Nr. |
Data |
Recipiento vardas pavardė |
Skyriaus pavadinimas |
Ligos istorijos Nr. |
Recipiento kraujo grupė ABO, Rh(D) fenotipas |
Donoro eritrocitų masės vieneto Nr. ir fragmento Nr |
Analitė |
Atlikimo laikas |
Tyrimus atlikusio darbuotojo vardas, pavardė, parašas
|
|||||||
Kambario temperatūros mėginio rezultatas |
Antikūnai |
Donoro kraujo grupė ABO, Rh(D) fenotipas |
Antiglobulinio testo rezultatas |
Kumbso kontrolė |
||||||||||||
D I |
D II |
D III |
Identifikuoti |
|||||||||||||
______________
Pakeitimai:
1.
Lietuvos Respublikos sveikatos apsaugos ministerija, Įsakymas
Nr. V-306, 2014-03-03, paskelbta TAR 2014-03-06, i. k. 2014-02814
Dėl Lietuvos Respublikos sveikatos apsaugos ministro 2000 m. spalio 25 d. įsakymo Nr. 576 "Dėl Imunohematologinių tyrimų atlikimo tvarkos patvirtinimo“ pakeitimo